制備液相色譜儀可以滿足常規(guī)實(shí)驗(yàn)室純化制備,并可根據(jù)使用需要,搭配紫外檢測(cè)器組成等度系統(tǒng),高壓二元梯度系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室制備提取。廣泛用于制藥、化工、食品、生化,環(huán)保等領(lǐng)域。
制備液相色譜儀通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動(dòng)相的多少來(lái)決定制備GX液相色譜,而是依據(jù)分離目的來(lái)決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對(duì)產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法(如蒸餾、萃取)比較,制備液相色譜儀是一種更有效的分離儀器,因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加,制備液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。

GX液相色譜(HPLC)是近30年發(fā)展起來(lái)的一種具有高靈敏度、高選擇性的GX快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過(guò)其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長(zhǎng),為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。
根據(jù)用途和泵配置的不同,一般可以將常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室級(jí)別液相色譜儀分為以下幾種:分析型GX液相色譜儀(HPLC),半制備液相色譜儀(Semi-PrepHPLC)和制備型GX液相色譜儀(Prep-HPLC)以及中壓液相色譜儀(MPLC)。
這三者的原理基本一樣,不同之處主要在于泵的Zda流速,一般而言,分析型HPLC的Zda流速為10.00mL/min,半制備HPLC為50mL/min,制備HPLC為100mL/min,中壓液相色譜更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、體積,管道的內(nèi)徑,六通閥、定量環(huán)等零件也會(huì)相應(yīng)改變;并且,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的需要,可以增加自動(dòng)接收器等配件。
制備液相色譜是指采用液相色譜技術(shù)制備純物質(zhì),即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備液相色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物,以滿足研究和其它用途。制備液相色譜的出現(xiàn),使液相色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備液相色譜的兩個(gè)重要指標(biāo)。
制備液相色譜儀按照操作的樣品量分為三種:半制備(≤100mg)、制備(0.1-100g)、大規(guī)模制備(≥100g)。色譜柱直徑一般大于2厘米,主要用于工業(yè)化大生產(chǎn)。
制備液相色譜儀優(yōu)勢(shì)有:
1、開(kāi)機(jī)進(jìn)行自檢。
2、單一波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)靈敏度、高靈敏度吸收譜。
3、波長(zhǎng)、時(shí)間編程標(biāo)準(zhǔn)靈敏度、高靈敏度吸收譜。
4、顯示錯(cuò)誤提示信息:燈無(wú)點(diǎn)燃、燈能量不足、設(shè)定參數(shù)錯(cuò)誤。
5、自動(dòng)測(cè)定D2燈及W燈的開(kāi)啟次數(shù)、燈狀態(tài)、燈點(diǎn)燃時(shí)間、燈能量、設(shè)定D2燈及W燈狀態(tài)。
6、針對(duì)復(fù)雜混合物中各化合物在不同波長(zhǎng)下的響應(yīng)差異,用時(shí)間程序切換波長(zhǎng)進(jìn)行分析,與傳統(tǒng)紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器相比,能夠極大程度提高所有化合物的測(cè)定靈敏度。
7、制備液相色譜儀采用進(jìn)口光電二極管陣列作為光電檢測(cè)元件,無(wú)需任何機(jī)械部分調(diào)整、選擇和改變波長(zhǎng),儀器使用過(guò)程中不會(huì)引起波長(zhǎng)的改變,與常規(guī)的單色儀相比有良好的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性,使得分析結(jié)果更加可靠。

目前,實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的制備液相色譜儀主要用于以下領(lǐng)域:
1、天然藥物化學(xué)、中藥化學(xué):這是國(guó)內(nèi)目前Z廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開(kāi)放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個(gè)天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺(tái)制備液相色譜儀。
2、蛋白純化:相對(duì)于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn),但是發(fā)展很迅速。同時(shí),由于外國(guó)儀器廠家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)不算太大,目前國(guó)內(nèi)也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展,搶占地盤。
3、藥物雜質(zhì)純化:由于合成工藝并不能做到1**%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量,這就得靠液相色譜。
4、手性化合物的制備:這個(gè)主要是有機(jī)合成和方法學(xué)的在用。
總之,目前有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域里,開(kāi)放手工柱層析依然是Z常用的分離手段,其在未來(lái)很長(zhǎng)一段時(shí)間里將仍然扮演重要的角色。制備液相色譜儀已經(jīng)在天然藥化領(lǐng)域大面積使用,在將來(lái),隨著科研的需要和價(jià)格的下降,將會(huì)逐漸進(jìn)入千家萬(wàn)戶。
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