培養(yǎng)的細胞在通常條件下需要有一定的密度才可以生長良好,因此需要要進行細胞計數(shù)。以每毫升細胞數(shù)來表示計數(shù)結果。細胞計數(shù)的原理和方法與血細胞計數(shù)相同。
在細胞群體中,一些細胞常常因為各種因素而死亡,細胞活力是指活細胞占總細胞數(shù)的百分比,為了了解在細胞分離的過程細胞是否有損傷,所以通常需要對組織中分離的細胞進行活力檢查。為了了解細胞凍存和復蘇的效果,對復蘇后的細胞也要進行活力檢查。
用臺盼藍對細胞進行染色,死細胞著色,活細胞不著色,以便可以辨別出死細胞與活細胞。也可以通過細胞內某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應,來測定細胞相對數(shù)和相對活力。

活細胞計數(shù)法
活細胞計數(shù)常用的方法有平板菌落計數(shù)法,平板菌落計數(shù)法是根據(jù)每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng),通過培養(yǎng)出的菌落數(shù),能夠計算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。這種方法靈敏度相當高,這種方法可以檢測污染活菌數(shù),現(xiàn)在國際上眾多國家都采用這種方法。
平板菌落計數(shù)法有以下三點注意事項:
①選取進行計數(shù)的平板的菌落數(shù)通常在30~300之間,過多或過少結果都不準確;
②菌落可能蔓延,影響計數(shù),Z好在培養(yǎng)基中加入0.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);
③此方法只用于形成菌落的微生物。
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