細胞培養(yǎng)指的是在體外模擬體內(nèi)的環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），讓它生存、生長、繁殖并且能夠維持主要的結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)在生物學中又叫做細胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細胞培養(yǎng)技術(shù)可以通過一個細胞培養(yǎng)成為大量的單細胞或極少分化的多細胞，細胞培養(yǎng)技術(shù)是細胞生物學研究方法中及其重要和常見的技術(shù)，由細胞培養(yǎng)不僅能夠獲取大量細胞，還能夠借此研究細胞其他的相關知識。

一、準備工作

準備工作包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試這些內(nèi)容。準備工作中的疏漏可能造成實驗的失敗，所以對于細胞培養(yǎng)來說，準備工作尤為的重要，需要認真的對待。

二、取材

根據(jù)實驗的目的，在無菌的環(huán)境中從機體中獲取某種組織細胞，通過消化分散細胞、分離等處理后接入到培養(yǎng)器皿中。這個過程被叫做取材。細胞株的擴大培養(yǎng)沒有取材這一過程。原代培養(yǎng)是指對機體中取出的組織細胞的diyi次培養(yǎng)。

理論上人和動物體內(nèi)的任何組織都能夠被培養(yǎng)，相較于成年個體的組織，幼體組織（尤其是胚胎組織）更容易被培養(yǎng)。相比幼體組織（尤其是胚胎組織），分化程度高的組織更容易被培養(yǎng)。相較于正常組織，腫瘤組織更容易被培養(yǎng)。取材后必須馬上進行處理，立刻進行培養(yǎng)，如果不能立刻培養(yǎng)，需要將組織塊切成黃豆大小的小塊，保存到4℃的培養(yǎng)液里。取組織時要維持無菌的狀態(tài)，而且要防止和有害的物質(zhì)接觸。有些組織細胞獲取時非常容易帶菌。所以可以使用KJ素處理細菌以避免細胞受到污染。

三、培養(yǎng)

將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng)，則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再加入培養(yǎng)基。如系細胞培養(yǎng)，一般應在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數(shù)，按要求以一定的量（以每毫升細胞數(shù)表示）接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細胞進入培養(yǎng)器皿后，立即放入培養(yǎng)箱中，使細胞盡早進入生長狀態(tài)。正在培養(yǎng)中的細胞應每隔一定時間觀察一次，觀察的內(nèi)容包括細胞是否生長良好，形態(tài)是否正常，有無污染，培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時檢查。一般原代培養(yǎng)進入培養(yǎng)后有一段潛伏期（數(shù)小時到數(shù)十天不等），在潛伏期細胞一般不分裂，但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的分裂生長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培養(yǎng)，將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代”。二倍體細胞一般只能傳幾十代，而轉(zhuǎn)化細胞系或細胞株則可無限地傳代下去。轉(zhuǎn)化細胞可能具有惡性性質(zhì)，也可能僅有不死性（Immortality）而無惡性。培養(yǎng)正在生長中的細胞是進行各種生物醫(yī)學實驗的良好材料。

四、凍存和復蘇

保存細胞，尤其是很難獲得的細胞株或者突變型細胞，需要把細胞冷凍保存。通常用液氮冷凍保存細胞。液氮的溫度為零下196℃。把加入了保護劑（通常是二甲亞砜或甘油）細胞放入到凍存管中，通過一定的冷卻速度凍存。如果凍存的溫度足夠低，那么細胞保存的時間會很久很久。細胞的復蘇一般采用速融的方法，也就是從液氮中取出凍存管，然后馬上放到37℃的水中，讓它在很短的時間里快速溶解，再然后把細胞放入到培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng)，細胞的活力和凍存過程中選擇的保護劑，細胞密度、降溫速度及復蘇時溫度、融化速度等都有關聯(lián)。