GX液相色譜儀一般由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。GX液相色譜儀以它分辨率高、分析速度快和應(yīng)用廣泛的優(yōu)點(diǎn)倍受儀器分析工作者的青睞,廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測、食品檢測等領(lǐng)域。
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾)。
2、流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。
4、使用緩沖溶液時(shí),做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時(shí),然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20ml以上。
5、長時(shí)間不用GX液相色譜儀,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機(jī)相(如甲醇等),因?yàn)榧兯组L霉。

6、每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。
7、C18柱不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8、堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗。清洗方法;①以異丙醇作溶劑沖洗:②放在異丙醇中間用超聲波清洗;③用10%稀硝酸清洗。
9、氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10、如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時(shí),要使用注射器吸液,通常在輸液前要進(jìn)行流動相的清洗。
11、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更換流動相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時(shí)要用異丙醇過渡一下。
1、色譜柱中的流動相是否會會排干的問題:
不少做色譜分離試驗(yàn)的人遇到過這樣的情形:不慎未及時(shí)補(bǔ)充流動相,泵將溶劑瓶中的流動相吸干了,GX液相色譜儀系統(tǒng)由此而停止工作了。如此情況是否會損壞色譜柱?泵是否已將色譜柱中所有流動相都排干了?色譜柱還能使用嗎?事實(shí)上,如果泵將溶劑瓶中的流動相吸干,并不會造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣,泵也不會將空氣排入色譜柱。因?yàn)楸弥荒茌斔鸵后w,而不能輸送空氣。
2、色譜柱變干的問題:
可能發(fā)生的原因有忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣,整個(gè)色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生,多半可能只是色譜柱兩端的幾個(gè)毫米變干了,因揮發(fā)掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當(dāng)長的時(shí)間。
即使色譜柱真的變干了,也不一定就不可救藥了??梢試LSY一種完全脫氣的、表面張力低的溶劑(如經(jīng)氦氣脫氣的甲醇)沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤填料表面;已脫氣的溶劑應(yīng)該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。GX液相色譜儀色譜柱大約需要(以1mL/min的流速)沖一個(gè)小時(shí)或更多的時(shí)間被徹底浸潤,恢復(fù)到正常狀態(tài)。
3、使用PEEK管路和接頭需要注意以下問題:
如果經(jīng)常需要改變流路或更換不同品牌的色譜柱,使用PEEK材料制成的管路和接頭會非常方便。PEEK管路容易連接;PEEK接頭不僅無需工具,手?jǐn)Q即可固定,而且容易調(diào)節(jié)錐箍之外的管路長度,方便與不同品牌或規(guī)格的色譜柱相連接。
使用此類材料的管路需要注意的是:PEEK對鹵代烷烴和四氫呋喃的兼容性不好。雖然未觀察到上述溶劑溶解PEEK材料的明顯跡象,但PEEK遇到上述溶劑會變脆。另一個(gè)西藥考慮的因素是壓力限。不銹鋼管可耐受6000psi的壓力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多數(shù)GX液相色譜儀應(yīng)用系統(tǒng)壓力不會超過3000psi)。
使用PEEK接頭時(shí)則無需擔(dān)心接頭耐溶劑性能,因?yàn)榻宇^幾乎或很少與溶劑直接接觸。但手?jǐn)Q固定的PEEK接頭壓力限低于不銹鋼管,因而壓力太高時(shí),可能會使接頭在管路上滑動而產(chǎn)生死體積或漏液。

4、預(yù)防液相泵的故障:
處于良好操作狀態(tài)的泵,應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn);保留時(shí)間的重復(fù)性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。要保持泵的良好操作性能,必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對流動相進(jìn)行過濾和脫氣。
下面列出預(yù)防GX液相色譜儀泵故障的幾項(xiàng)措施:
?、儆酶哔|(zhì)量試劑和HPLC級溶劑;
②過濾流動相和溶劑;
?、勖摎?
?、苊刻扉_始使用時(shí)放空排氣,工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液;
⑤不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中;
?、薅ㄆ诟鼡Q墊圈;
?、咝枰獣r(shí)加潤滑油;
?、嗖殚営嘘P(guān)泵操作手冊中的其它建議。
?、釣榱耸笹X液相色譜儀故障發(fā)生后盡快 排除,平時(shí)應(yīng)常備密封、單向閥(入口與出口)、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等部件,以及更換工具。
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