在蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定方法中,圓二色光譜(簡(jiǎn)稱CD)得到了Z為廣泛的應(yīng)用。在對(duì)溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的研究,其比較準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單以及快速。其能夠在溶液狀態(tài)下測(cè)定,和其生理狀態(tài)比較接近。并且測(cè)定方法快速簡(jiǎn)便,對(duì)構(gòu)象變化靈敏,因此,到目前為止,在對(duì)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的研究中,其占據(jù)主導(dǎo)地位,并且已經(jīng)在蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中得到了廣泛地應(yīng)用。圓二色光譜儀為按照?qǐng)A二色光譜法的原理和測(cè)試要求設(shè)計(jì)制成的儀器。到目前為止目前圓二色光譜法及其儀器已在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、配位化學(xué)和藥物化學(xué)等領(lǐng)域得到了廣泛地應(yīng)用,已經(jīng)成為對(duì)有機(jī)化合物的立體構(gòu)型進(jìn)行研究的一個(gè)重要方法。

對(duì)固體CD光譜或理想溶液的獲得建議:
1、應(yīng)當(dāng)選擇合適溶劑,濃度和光路(類似于UV可見光譜)的溶液樣品。對(duì)于在紫外線區(qū)域中測(cè)試的樣品,較小光程,且足夠低截止波長(zhǎng)的溶劑建議選擇,建議為高純水或醇類溶劑。
2.對(duì)于固體樣品的壓片試驗(yàn),百分比濃度和稀釋劑(KBr,KCl或CSI等)應(yīng)當(dāng)按照不同的樣品來選擇合適的,并且在研磨和壓片后進(jìn)行透射掃描。
3、波長(zhǎng)范圍,掃描速度,靈敏度,狹縫等測(cè)量參數(shù)選擇適當(dāng)?shù)摹?/span>
4、根據(jù)結(jié)果可知,CD光譜法的要求,手性樣品符合(CD信號(hào)在給定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)比較強(qiáng),也具有比較合適的吸收值)。為了對(duì)CD峰的可能位置預(yù)測(cè)和對(duì)合適的樣品濃度(對(duì)于溶液吸收光譜,≈1)加以選擇,必須事先對(duì)手性樣品的紫外可見吸收光譜(溶液或固體漫反射率)進(jìn)行確定。
5、高對(duì)映體純度的手性樣品被提供。
6、測(cè)定方法(溶液,固體,單晶或熒光CD)按照樣品的性質(zhì)來選擇。
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