示差折光檢測器和紫外檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器一樣,也是液相色譜儀常用的檢測器之一。由于各種物質(zhì)具有不同的折射率,溶劑和樣品各組分折射率存在一定差異,所以通過檢測折射率的變化,就可以達到分析樣品組分的目的。
任意一束光由一種介質(zhì)射入另一種介質(zhì)時由于兩種介質(zhì)的折射率不同而發(fā)生折射現(xiàn)象。折光率是一個無量綱的常數(shù),光在真空中的速度和光在某種介質(zhì)中的速度之比定義為該介質(zhì)的折射率,其大小表明了介質(zhì)光密度的高低。示差折光檢測器是通過連續(xù)測定色譜柱流出液折射率的變化而對樣品濃度進行檢測的。

1、通用型檢測器;
2、靈敏度不高,檢測限在10^-6g/ml~10^-7g/ml;
3、對壓力和溫度很敏感;
4、對流動相的要求低;
5、不能用于梯度淋洗。
示差折光檢測器是一種非選擇性液相色譜儀檢測器,基本上對所有被測對象均有響應(yīng),但靈敏度較低,不適合做痕量分析,也不適合作梯度洗脫。示差折光檢測器多用于制備色譜和凝膠色譜,也用于糖類等無吸收物質(zhì)的分析。
1、示差折光檢測器對含鹽類流動相比較敏感,不要讓儀器里有鹽類、粘度大的樣品、強酸強堿的樣品殘留;
2、用做液相色譜儀實驗時,先把液相泵用甲醇變換流速沖洗1小時,然后用實驗所需的流動相沖洗1小時,再接上專用色譜柱色譜柱沖洗1小時(別接檢測器),Z后把色譜柱接到檢測器(示差檢測器可以先通電升溫達到要求的溫度)上,待基線走平做實驗;
3、做完實驗,用兩通取代色譜柱,用甲醇沖洗整個液相系統(tǒng)至少1小時,再關(guān)閉液相系統(tǒng)(如果是含鹽類的流動相、粘度大的樣品、強酸強堿的樣品,變換流速沖洗整個液相系統(tǒng)至少2小時,再關(guān)閉液相系統(tǒng));
4、沖洗后的液相系統(tǒng)及其檢測器若長期不用,泵和檢測器的各個接口用封口膜封上(特別是大的接口處一定要封口膜封上),避免進入灰塵或爬入小生物造成不必要的麻煩;
5、盡量專柱專用,避免影響檢測結(jié)果;
6、若是基線不穩(wěn),不接色譜柱、檢測器,用純水沖洗系統(tǒng)30分鐘,再接示差檢測器沖洗。一切正常后,接上沖洗好的色譜柱,待基線平穩(wěn)后可以進樣。
示差折光檢測器和紫外吸收檢測器各自的優(yōu)點:
紫外吸收檢測器它不僅有較好的選擇性和較高的靈敏度,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。示差折光檢測器這一系統(tǒng)通用性強、操作簡單。
示差檢測器屬于總體性能濃度型檢測器,其響應(yīng)值取決于柱后流出液折射率的變化,采用含有樣品的流出液和不含樣品的流出液的同一物理量的示差測量。其響應(yīng)信號與溶質(zhì)的濃度成正比。屬于中等靈敏度檢測器,檢測限可達1mg/ml-0.1mg/ml。
紫外檢測器靈敏度高,噪音低,線性范圍寬,對流速和溫度均不敏感,可于制備色譜。由于靈敏高,因此既使是那些光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì)也可用UV檢測器進行微量分析。
示差折光檢測器是目前液相色譜中常用的一種檢測器,它可與輸液泵,色譜柱,進樣器等組成凝膠滲透色譜儀或高速液相色譜儀系統(tǒng),也可以配置適當?shù)倪M樣系統(tǒng)作為單獨的分析儀器使用。對所有溶質(zhì)都有響應(yīng),某些不能用選擇性檢測器檢測的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測器檢測。由于不同的液體折光不同,因此本檢測器通用性強,可廣泛地應(yīng)用于化工、石油、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域為科研、生產(chǎn)服務(wù)。
紫外檢測器有較好的選擇性和較高的靈敏度,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫,示差檢測器幾乎對所有溶質(zhì)都有響應(yīng)。

示差折光檢測器和紫外吸收檢測器之間的區(qū)別:
示差折光檢測器這一系統(tǒng)靈敏度低(檢測下限為10^-7g/ml),流動相的變化會引起折光率的變化,因此,它既不適用于痕量分析,也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。UV檢測的主要缺點在于紫外不吸收的化合物靈敏度很低。
①紫外是選擇性檢測器,示差是通用性檢測器;
?、谧贤鈾z測器靈敏度高,示差檢測器靈敏度低;
?、圩贤鈾z測器可進行梯度洗脫,示差檢測器不能進行梯度洗脫;
④紫外檢測器對壓力和溫度不敏感,示差檢測器很敏感。
示差檢測在原理上雖然是通用型檢測器,但是它的靈敏度低,和梯度脫洗不相容,因此它對于液相色譜儀來說不是理想的檢測器。而紫外檢測器既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。
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