用于和DNA或RNA結構類似的寡核苷酸合成的自動化儀器,即是DNA合成儀。通常用于固相合成法,每次在長的寡核苷酸鏈上接入一個核苷酸。加入每一個核苷酸均通過相同的化學反應和相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。儀器不同,所用化學反應和操作細節(jié)也會隨之發(fā)生變化。DNA合成的磷酸酰胺法得到了非常廣泛的應用。
發(fā)展
GX率、高產(chǎn)率的儀器的開發(fā)與研究、應用領域的開拓和機器性能的完善為當前DNA合成儀的主要生產(chǎn)廠商的致力方向。
全世界di一臺高密度復制DNA合成儀已經(jīng)為臺灣科學委員會“基因醫(yī)藥衛(wèi)生科技研究計劃”中的基因生物技術組成功研發(fā)出來,每天能夠對768條DNA進行合成,能夠同時對384條不同DNA進行合成。并且能夠和聚合酶連鎖反應裝置相配合,對各種基因大量復制,除了對時間進行節(jié)省外,還能夠對大量人力進行節(jié)省。這部機器能夠將防偽基因、動物、人體、植物的基因甚都復制出來。

因為目前DNA合成儀可以合成的Z長核酸鏈的堿基對數(shù)量對于人們所需要的大部分核酸的堿基對數(shù)量來說還遠遠不夠,所以,還需要對合成工藝不斷地進行改善,才能夠使較長的核酸分子得到。
不斷涌現(xiàn)出按照不同化學方法研制的DNA合成儀,可以將現(xiàn)有核酸合成的堿基對數(shù)量限制突破,使大量人力、物力、財力得以節(jié)省,以便將來能夠對酶的結構進行改變,使其在工業(yè)上更有價值。對蛋白質(zhì)和多肽的結構進行改變,使新藥物得以制備,并且對有關人類疾病和遺傳調(diào)控的新領域進行了開拓。
有效方法
分離和制造目的基因的一些有效方法在基因工程學工作者艱苦細致的探索研究下已經(jīng)掌握了。通常而言,目前有反向轉錄法、基因組擴增法、人工合成三種獲取目的基因的方法。
1、人工合成
全長引物根據(jù)某一蛋白質(zhì)的基因序列或氨基酸序列,進行設計,模版DNA通過OVERLAP方法來形成,再利用PCR擴增的方法使雙鏈DNA得到,之后在克隆載體或者表達載體中轉化克隆PCR產(chǎn)物。目前為止,速度Z快,準確率Z高的方法是化學合成全基因,同時能夠以密碼子在不同宿主細胞的不同的實驗需求和偏愛性,對基因序列進行設計,使表達水平得以提高。
2、反向轉錄法
對于分子量較大而又不知其序列的基因,反向轉錄法比較適用,其的模板為目的基因的mRNA,對上下游引物進行設計,對反轉錄酶合成堿基互補的DNA片段進行借助,然后再在DNA聚合酶的作用下將雙鏈cDNA合成,也就是目的基因的雙鏈DNA。
3、基因組擴增法
基因組能夠通過基因組抽提試劑盒直接從細胞、植物、血液、動物組織中分離出來,對特異擴增的引物進行設計,模版利用抽提的基因組,直接通過PCR擴增來對目的基因進行獲取。
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