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凝膠成像系統(tǒng)常見問題

更新時間:2025-10-22 11:47:50 類型: 閱讀量:5422
導讀:凝膠成像系統(tǒng)是對DNA/RNA/蛋白質等凝膠電泳不同染色及微孔板、平皿等非化學發(fā)光成像檢測分析的儀器。凝膠成像系統(tǒng)常用于分子量計算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。

  凝膠成像系統(tǒng)是對DNA/RNA/蛋白質等凝膠電泳不同染色及微孔板、平皿等非化學發(fā)光成像檢測分析的儀器。凝膠成像系統(tǒng)常用于分子量計算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。

  1、凝膠成像系統(tǒng)像素越高是不是成像更清晰,產(chǎn)品就越好?

  像素是要針對成像設備來看的,CCD本身的質量比單純的像素高低更重要。對于同級別CCD來說,Z重要的指標是CCD的尺寸大小,尺寸越大其本身價值就成幾何倍地增長。

  2、CCD和CMOS有什么區(qū)別,哪種芯片更好?

  CCD是集成在半導體單晶材料上,而CMOS是集成在被稱做金屬氧化物的半導體材料上。

  在成像方面,相同像素下CCD的成像通透性、明銳度都很好,色彩還原、曝光可以保證基本準確。而CMOS的產(chǎn)品往往通透性一般,對實物的色彩還原能力偏弱,曝光也都不太好,由于自身物理特性的原因,CMOS的成像質量和CCD還是有一定距離的。但由于CMOS低廉的價格以及高度的整合性,因此在凝膠成像系統(tǒng)中得到了廣泛的應用。

凝膠成像系統(tǒng)常見問題.jpg

  3、什么是分辨率,它與像素值有什么關系?

  分辨率的大小和像素值是分不開的,像素值是指凝膠成像系統(tǒng)能分辨到的Z小的感光元件,平時說的多少萬像素就是這些感光元件的個數(shù)了。

  一般來講像素越多,成像也就越清晰細膩,當然這其中還要受許多因素限制。但是高像素也不一定是好的CCD,其原因就是像素大小,也是很重要的因素,相同數(shù)目的像素,排列越密集,像素之間就越容易出現(xiàn)電流干擾,容易出現(xiàn)“噪點”等干擾成像質量的現(xiàn)象出現(xiàn)。由于制造工藝的限制,增加尺寸,成本將會以幾何級數(shù)提高。

  4、什么是動態(tài)范圍值,它如何反映CCD的性能?

  動態(tài)范圍決定著能否同時在一張膠上同時看到強的信號和弱的信號,而且他們之間能保持比較好的定量關系。一般動態(tài)范圍采用數(shù)量級來表示,這個數(shù)越大,表明動態(tài)范圍越寬。灰階表示一種表征光亮度的方法,12bit表示從Z暗到Z亮等分為212=4096個級別,16bit即分為216個級別,可見bit值越高能分出的細微差別越大。

  目前來說,市場上主流的凝膠成像系統(tǒng)的CCD以12bit為主,16bit的凝膠成像系統(tǒng),一般情況下,分辨率均在200萬像素左右,對于真正的16bit,而像素值又近400萬的CCD是非常少見的。

  5、為什么凝膠成像系統(tǒng)需要制冷CCD,它適用于哪些情況?

  凝膠成像系統(tǒng)曝光超過5-10秒時,CCD芯片就會發(fā)熱,沒有致冷設備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。

  制冷CCD的適用性:熒光及化學發(fā)光本身較弱,所以對CCD噪音的降低要求很高,應選用高分辨率數(shù)字冷卻CCD相機結合高通透鏡頭的凝膠成像系統(tǒng),使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學發(fā)光樣品圖像,并且能夠Zda程度的降低噪音,減少背景,提供出色的圖像清晰度。

  6、如何選擇凝膠成像系統(tǒng)的光學鏡頭?

  光學鏡頭是凝膠成像系統(tǒng)視覺系統(tǒng)中必不可少的部件,直接影響成像質量的優(yōu)劣,影響算法的實現(xiàn)和效果。光學鏡頭規(guī)格繁多,有時不免頭暈。

  光學鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角、標準,遠攝鏡頭;結構上分有固定光圈定焦鏡頭,手動光圈定焦鏡頭,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭、自動變焦鏡頭,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。

凝膠成像系統(tǒng).jpg

  7、凝膠成像系統(tǒng)軟件功能包括哪幾個方面?

  選擇好成像系統(tǒng)后,凝膠成像系統(tǒng)配套的軟件選擇也很重要。硬件設備再好,如果不配上好的軟件,也無法發(fā)揮它應有的功能。凝膠成像系統(tǒng)軟件功能和用途都基本相似,Z關注的幾個特點是:

 ?、佘浖幕竟δ埽嚎蓪Σ煌瑯悠罚鐥l帶,斑點,細菌克隆,芯片,細胞或者活體動物等,進行定性、定量分析,加批注,輸出圖像等操作。

  ②圖像采集方式:對于化學發(fā)光或多色熒光產(chǎn)品,凝膠成像系統(tǒng)軟件應具備電影模式,可以進行圖像多禎累計功能來增強線性動態(tài)范圍和數(shù)據(jù)準確度。

  ③操作簡便,凝膠成像系統(tǒng)軟件應具備操作輔助工具,使軟件操作更簡單易用。Z好采用三步式泳道及條帶分析,可以快速計算蛋白質和核酸的分子量及含量。

 ?、軘?shù)據(jù)庫功能也是必不可少的,這樣可以檢索、分類或比較所有生成的圖像。可利用不同的顯示算法程序圖像化顯示條帶差異。

 ?、萜毓夥绞剑簯捎脝我黄毓?、多重曝光,累計曝光,延時(定時)曝光多種模式可選。

 ?、抻洃浌δ埽耗z成像系統(tǒng)軟件能記憶并自動調用成像數(shù)據(jù),這樣你不用每次設置就能獲得重復性好的結果。

  ⑦軟件應配備兩套以上,使用單機版,多用戶版或網(wǎng)絡版,用戶可彼此獨立操作,互不干擾,互不混淆。

  8、能否在凝膠成像系統(tǒng)上直接切膠?

  如需直接切膠,首先按凝膠成像系統(tǒng)中間的觀察窗,打開裝有進口防紫外玻璃的觀察窗口,然后打開左右兩側專為割膠所設計的小門,即可進行切膠操作。

 

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