紫外分析儀分為很多系列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進電泳分析、檢測,PCR產(chǎn)物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。
分子生物學和生物化學研究中熒光技術的應用
1、生物大分子的物理化學特性和其分子的結構的研究
除了分子內(nèi)熒光發(fā)色基團的本身結構對于熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數(shù)會產(chǎn)生影響,并且發(fā)色團周圍的環(huán)境也會強烈地影響著這些參數(shù)。對于熒光發(fā)色團所在部位的微環(huán)境的特征及其變化的研究能夠利用此特點對定上述有關熒光參數(shù)的變化進行測定來獲得。在該研究中,不但能夠?qū)ι锎蠓肿颖旧砭哂械臒晒獍l(fā)色團(如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等,此類熒光稱為內(nèi)源熒光)進行利用之外,還能夠在生物大分子的某一部位共價地結合或吸附一些特殊的熒光染料分子,生物大分子的研究能夠通過對該染料分子的熒光特性變化的測定來獲得,這種染料分子被叫做“熒光探針”,它們發(fā)出的熒光通常叫做外源熒光。熒光技術在分子生物學中的應用范圍由于熒光探針的應用得到了大大地開拓了。

2、生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象的研究
生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象的研究可以通過對熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)進行利用來進行。生物大分子內(nèi)部的許多信息能夠通過對該現(xiàn)象的研究來獲得。
3、物質(zhì)的定性
熒光物質(zhì)不相同,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜也會有所差異,所以,鑒別物質(zhì)可以使用熒光,熒光法相比于吸收光譜法選擇性更加的高。
4、定量測定
樣品中熒光組分的含量的定量分析可以利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關系,在氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量的測定經(jīng)常使用。
較高的靈敏度是熒光定量測定的一個優(yōu)點。此優(yōu)點能夠大大減少測定時所需要樣品量。酶催化的反應也能夠應用這種定量測定方法,只要有熒光強度的變化發(fā)生于反應前后,就能夠?qū)γ傅暮考懊阜磻乃俾实冗M行測定。
熒光分類
物質(zhì)經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象,包括誘發(fā)熒光和自發(fā)熒光兩種。
1、誘發(fā)熒光
熒光染料先對物體進行染色,再利用紫外線對染色了的物體進行照射使熒光發(fā)出,叫做誘發(fā)熒光。
2、自發(fā)熒光
利用紫外線照射葉綠素、血紅素等使紅色的熒光發(fā)出,叫做自發(fā)熒光。
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