熒光分光光度計(jì)的操作使用比較復(fù)雜，用戶在買來(lái)熒光分光光度計(jì)后往往對(duì)如何使用往往比較犯難。我們就此來(lái)為大家分享該設(shè)備的使用方法。

使用說(shuō)明（操作前必讀）

1、硬件操作

熒光分光光度計(jì)在使用時(shí)，需要注意開(kāi)機(jī)次序，以保護(hù)設(shè)備之間不受影響。熒光光譜儀開(kāi)機(jī)順序一般為先開(kāi)氙燈，然后開(kāi)儀器主機(jī)，Z后開(kāi)跟儀器連接的計(jì)算機(jī)。如此操作的原因在于穩(wěn)態(tài)氙燈是高壓點(diǎn)亮，為了避免瞬問(wèn)脈沖電流對(duì)周圍設(shè)備造成影響，需要先開(kāi)氙燈，等電流穩(wěn)定后再打開(kāi)周邊的電腦等設(shè)備。關(guān)機(jī)順序則相反。

2、軟件操作

熒光定量分析多采用工作曲線法，即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按試樣相同方法處理后，配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度和空白溶液的相對(duì)熒光強(qiáng)度；扣除空白值后，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線；然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液，在同一條件下測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度，扣除空白值后，從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。

在用熒光分析法測(cè)定某些會(huì)引起熒光改變的微量物質(zhì)時(shí)，常采用差示熒光法，可使熒光強(qiáng)度的讀數(shù)差距拉大，使熒光強(qiáng)度的降低加大，從而提高方法的靈敏度和準(zhǔn)確度。

熒光分光光度計(jì)操作步驟

1、開(kāi)機(jī)

（1）開(kāi)啟計(jì)算機(jī)

（2）開(kāi)啟儀器主機(jī)電源按下儀器主機(jī)左側(cè)面板下方的黑色按鈕（POWER）同時(shí)，觀察主機(jī)正面面板右側(cè)的Xe LAMP 和RUN指示燈依次亮起來(lái)，都顯示綠色為正常。

（3）雙擊桌面圖標(biāo)（FL SoluTIons 4.1 for F-7000），主機(jī)自行初始化，掃描界面自動(dòng)進(jìn)入

（4）初始化結(jié)束后，須預(yù)熱15-20分鐘，出現(xiàn)操作主界面（界面右下角出現(xiàn)Ready）

2、點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“Method”

在“General”選項(xiàng)中的“Measurement”選擇“wavelength scan”測(cè)量模式 在“Instrument”選項(xiàng)中設(shè)置儀器參數(shù)和掃描參數(shù) 選擇掃描模式“Scan Mode”：Emission/ExcitaTIon（發(fā)射光譜/激發(fā)光譜） 選擇數(shù)據(jù)模式“Data Mode”：Fluorescence （熒光測(cè)量） 設(shè)定波長(zhǎng)掃描范圍

掃描熒光激發(fā)光譜（ExcitaTIon）：需設(shè)定激發(fā)光的起始/終止波長(zhǎng)（EX Start/End WL）和熒光發(fā)射波長(zhǎng)（EM WL）

掃描熒光發(fā)射光譜（Emission）：需設(shè)定發(fā)射光的起始/終止波長(zhǎng)（EM Start/End WL）和熒光激發(fā)波長(zhǎng)（EX WL）

其他選項(xiàng)可選擇默認(rèn)值（也可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求自行設(shè)定） 參數(shù)設(shè)置好后，點(diǎn)擊“確定”

3、設(shè)置文件存儲(chǔ)路徑（此步也可不進(jìn)行參數(shù)設(shè)置，可以在按5中方法進(jìn)行保存）

（1）點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“Sample”

（2）樣品名可自行命名

（3）選中“Auto File”，可以自動(dòng)保存原始文件和TXT格式文本文檔數(shù)據(jù)

（4）參數(shù)設(shè)置好后，點(diǎn)擊“OK”

4、掃描測(cè)試

（1）打開(kāi)蓋子，放入待測(cè)樣品后，蓋上蓋子（請(qǐng)勿用力）

（2）點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“Measure”，窗口在線出現(xiàn)掃描譜圖

5、數(shù)據(jù)處理與保存

（1）選中自動(dòng)彈出的數(shù)據(jù)窗口

（2）右鍵--“Trace”，進(jìn)行讀數(shù)并尋峰等操作

（3）“File”--“Save as”對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行保存

6、關(guān)機(jī)順序：

（1）關(guān)閉運(yùn)行軟件FL SoluTIon 2.1 for F-7000

（2）選中“Close the lamp，then close the monitor windows？”點(diǎn)擊“Yes”窗口自動(dòng)關(guān)閉同時(shí)，觀察主機(jī)正面面板右側(cè)的Xe LAMP指示燈暗下來(lái)，而RUN指示燈仍顯示綠色

（3）約十分鐘后，關(guān)閉儀器主機(jī)電源，即按下儀器主機(jī)左側(cè)面板下方的黑色按鈕（POWER）（目的是僅讓風(fēng)扇工作，使Xe燈室散熱）

（4）從樣品池中取出所有比色皿，清洗干凈以便下一次使用

（5）關(guān)閉計(jì)算機(jī)

熒光分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)

1、在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，應(yīng)提前打開(kāi)儀器預(yù)熱，并配制好所需的溶液，對(duì)于已經(jīng)配制好的溶液，在不用時(shí)放在4℃冰箱中保存，放置時(shí)間超過(guò)一星期的溶液要重新配制。

2、在測(cè)試樣品時(shí)，注意熒光強(qiáng)度范圍的設(shè)定不要太高，以免測(cè)得的熒光強(qiáng)度超過(guò)儀器的測(cè)定上限。

3、實(shí)驗(yàn)所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時(shí)候用手指掐住池體的上角部，不能接觸到四個(gè)面，清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對(duì)其四個(gè)面進(jìn)行輕輕擦拭。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要及時(shí)的清理臺(tái)面，處理廢液，清洗和放置好樣品池，將下次要用的溶液放回冰箱，并且按規(guī)定登記實(shí)驗(yàn)記錄，養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。