在1885年，Escherich發(fā)現(xiàn)了大腸桿菌，起初，大腸桿菌被認(rèn)為是非致病菌，一直作為正常腸道菌群的組成部分被看待。直到20世紀(jì)中葉，人們才了解一些特殊血清型的大腸桿菌對(duì)人和動(dòng)物有病原性。下面就讓小編帶你了解一下大腸桿菌是如何培養(yǎng)的。

一、配置培養(yǎng)基和滅菌

將50毫升LB液體培養(yǎng)基（LB液體培養(yǎng)基用于細(xì)菌的擴(kuò)大培養(yǎng)）與剛配好尚未凝固的50毫升LB固體培養(yǎng)基（LB固體培養(yǎng)基用于細(xì)菌的劃線(xiàn)分離）分別置入兩個(gè)250毫升的三角瓶中，加上封口膜（既通氣又不讓細(xì)菌進(jìn)入），用牛皮紙包好后高壓鍋滅菌15分鐘。

二、倒平板操作

1.在火焰旁的桌面上放上滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿，右手持著裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，用左手拔出棉塞。

2.將瓶口快速地通過(guò)火焰。

3.將培養(yǎng)皿用左手的拇指和食指打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，用右手往培養(yǎng)皿中導(dǎo)入約為10-20毫升的培養(yǎng)基，然后立即用皿蓋將培養(yǎng)皿蓋上。

4.等待大約5-10分鐘后，平板冷卻凝固，倒置平板，讓皿底朝上，皿蓋向下。

上述操作的注意事項(xiàng)

1.倒平板操作需要在培養(yǎng)基滅菌并且冷卻到60攝氏度左右才能進(jìn)行。

2.消毒和滅菌：用酒精棉球?qū)θ耸忠约白烂孢M(jìn)行消毒，無(wú)菌操作臺(tái)通過(guò)超凈紫外燈和過(guò)濾風(fēng)滅菌。

3.在操作時(shí)，封口膜使用右手無(wú)名指和小指夾住，三角瓶用其他三指拿著，使用左手持著培養(yǎng)皿并且將上蓋的一邊打開(kāi)，在酒精燈火焰旁操作。

4.必須將錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰，從而灼燒滅菌。

5.為了避免皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，引起污染，必須在平板冷卻凝固后將其倒過(guò)來(lái)放置。如果培養(yǎng)皿中已經(jīng)形成菌落，那么形成單菌落就很困難了，分離的目的也就很難達(dá)成了。

三、擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌

向滅菌后的液體培養(yǎng)基中接種斜面上培養(yǎng)的大腸桿菌菌種，將其在37攝氏度的搖床上培養(yǎng)12h。

大腸桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)的注意事項(xiàng)

1.在火焰的旁邊用接種環(huán)從斜面上獲取大腸桿菌。

2.在獲取大腸桿菌之前，需要用酒精燈對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌并且在接種環(huán)冷卻后才能夠獲取大腸桿菌。

3.在獲取大腸桿菌后，復(fù)原棉塞和封口膜。