基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清、抗生素等物質(zhì)后,叫完全培養(yǎng)基,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基?;A(chǔ)培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存,要想使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖,還需添加天然培養(yǎng)基,常用的是牛血清,因?yàn)榕Q逯泻写偌?xì)胞增殖的各種生長(zhǎng)因子和其他多種有利于細(xì)胞生存的物質(zhì)。此外為防止污染,培養(yǎng)液中尚需加一定量的抗生素。 完全培養(yǎng)基根據(jù)添加血清量的多少,可分為細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基和細(xì)胞維持培養(yǎng)基,用于不同細(xì)胞和不同研究。
培養(yǎng)方法
在含有微量(<0.01%)蛋白胨的基本培養(yǎng)基平板上接種誘變處理后的細(xì)胞,較大的菌落就由野生型細(xì)胞迅速生長(zhǎng)而成。小菌落則由營(yíng)養(yǎng)缺陷型則緩慢生長(zhǎng)而成。如果某一特定營(yíng)養(yǎng)缺陷型需要被獲取,那么可以再將微量的相應(yīng)物質(zhì)向基本培養(yǎng)基中加入。在基本培養(yǎng)基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營(yíng)養(yǎng)缺陷型能在基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)而被保留下來(lái)。完全培養(yǎng)基在需要對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)時(shí)會(huì)被用到。被培養(yǎng)的微生物生長(zhǎng)之所以較快,是由于營(yíng)養(yǎng)成分較全面。

培養(yǎng)基介紹
完全培養(yǎng)基(Complete medium)是將一些富含氨基酸、維生素和堿基之類(lèi)的天然物質(zhì)加入到基本培養(yǎng)基的天然物質(zhì)。各種營(yíng)養(yǎng)基是由于加入生長(zhǎng)因子而制成的,微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要能夠得到滿(mǎn)足。完全培養(yǎng)基按照添加血清量的多少,可分為細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基和細(xì)胞維持培養(yǎng)基,用于不同細(xì)胞和不同研究。
生長(zhǎng)培養(yǎng)基
細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(液)含有較大比例的血清,它的作用是對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖進(jìn)行維持。培養(yǎng)細(xì)胞工作中Z主要的培養(yǎng)用液是生長(zhǎng)培養(yǎng)液?;A(chǔ)培養(yǎng)基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青霉素100U/mL和鏈霉素100μg/mL)是其的主要成分。這是適用于一般細(xì)胞的培養(yǎng)液組成。為培養(yǎng)特定細(xì)胞,還要選擇適應(yīng)性培養(yǎng)基,可能尚需添加基本培養(yǎng)基中缺少或該細(xì)胞需要的成分。
維持培養(yǎng)基
維持培養(yǎng)基含有極少比例的血清,它的作用是維持細(xì)胞緩慢生長(zhǎng)或不死的培養(yǎng)液。但發(fā)生轉(zhuǎn)化或癌細(xì)胞因自身有產(chǎn)生促生長(zhǎng)增殖因子的能力,雖在血清缺少情況下仍能生長(zhǎng);因此維持液可用于選擇發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。其組成為:基本培養(yǎng)基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青霉素100U/mL和鏈霉素100μg/mL)。此處需注意,如培養(yǎng)正常細(xì)胞完全不加血清,可維持細(xì)胞不死,但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)細(xì)胞難免退化。
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