流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量，并可以根據(jù)預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。下面就讓小編帶你了解一下流式細胞儀是怎么調(diào)試的。

要想很好地應用流式細胞分析和分選技術，必需先對儀器進行調(diào)試，使其處于良好的工作狀態(tài)，并能正確使用儀器。下面簡要介紹細胞計的調(diào)試項目及要點、使用的程序等等。

調(diào)試和校準

流式細胞儀在使用前，甚至在使用過程中都要精心進行調(diào)試，以保證工作的可靠性和Z佳性。調(diào)試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。

激光強度：

除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為Zda。

液流速度：

可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督，調(diào)節(jié)　氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。

測量區(qū)光路調(diào)節(jié)：

這是調(diào)試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。

流式細胞術中所測得的量是相對值，因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調(diào)整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品，雞血紅細胞做為生物學標準樣品。微球用樹脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血（抗凝劑：雞血=1：4），經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，Z后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。