流式細(xì)胞儀是在流動(dòng)狀態(tài)下檢測細(xì)胞中各種物理和生物特征的一種儀器。下面就讓小編帶你了解一下流式細(xì)胞儀使用的一些技巧。

一、對(duì)目標(biāo)細(xì)胞群體進(jìn)行定位

如果尋找外周血白細(xì)胞，那么在FSC/SSC散點(diǎn)圖中信號(hào)Z強(qiáng)的是粒細(xì)胞，其后是單核，淋巴，紅細(xì)胞碎片。如果尋找淋巴細(xì)胞，可先調(diào)低FSC/SSC電壓找到粒細(xì)胞后再調(diào)高電壓找其他細(xì)胞群。如果是沒有明顯特征的細(xì)胞群，可以用已經(jīng)建立的淋巴細(xì)胞檢測方案依據(jù)相對(duì)位置找尋目標(biāo)細(xì)胞群。

二、陰性或者陽性對(duì)照

陰性對(duì)照：調(diào)整PMT電壓，設(shè)立陰性或者陽性界限。

使用抗體相應(yīng)同型熒光免疫球蛋白作為陰性對(duì)照，對(duì)照和抗體必須來自同一個(gè)廠家（檢查過性樣本中的一些指標(biāo)）。

使用對(duì)照組樣本作陰性對(duì)照（和其他實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照組含義一樣，但依然需要初始化陰性對(duì)照儀器）。

對(duì)非抗體染色，使用空白樣本作陰性對(duì)照，或者設(shè)立陽性對(duì)照。

三、檢測指標(biāo)

檢測前要明白，不僅有陽性百分率指標(biāo)，而且還有熒光強(qiáng)度指標(biāo)。并且熒光強(qiáng)度指標(biāo)比陽性百分率指標(biāo)更有價(jià)值。

檢測時(shí)，應(yīng)當(dāng)靈活使用放大模式，線性放大或者對(duì)數(shù)放大（如果指標(biāo)相差不大，通常使用線性；而熒光參數(shù)一般使用對(duì)數(shù)放大）。

靈活應(yīng)用設(shè)門的邏輯關(guān)系和顏色示蹤 功能。

合理選擇不同的熒光素標(biāo)記試劑，以便用Z少的投入獲得Z多的信息。