Real-Time PCR 技術(shù)，又稱實時定量熒光PCR，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，Z后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行總量分析或通過Ct值對模板進(jìn)行相對定量。

介紹

熒光定量PCR的光學(xué)系統(tǒng)

熒光檢測系統(tǒng)

旋轉(zhuǎn)機(jī)制：

（1）成本低廉，高溫均一性好。

（2）不太容易操作，對于低溫儲存不支持。

（3）需要特殊的加樣支架和耗材

掃描機(jī)制：

（1）檢測時間之后，需要更多的檢測時間。

（2）價格便宜，操作方便，校正容易。

CCD：

（1）能夠同時檢測。

（2）價格不便宜，校正很困難。

激光光源

Lamp

（1）對于多通道以及多種不同的光路顏色都適用

（2）對2D傳感器方案唯yi適用

（3）對高能量分析系統(tǒng)適用

LED

（1）一般用于孔掃描模式

（2）有比較多相對可選的光路顏色

（3）價格和維護(hù)的成本比較低

Laser:

（1）只能夠在逐孔掃描模式下使用

（2）光路的顏色有限

（3）價格和維護(hù)的成本比較高

（4）能量高，信號不容易受到干擾。

熱模塊系統(tǒng)

空氣離心加熱模塊

1.不方便加樣

2.偏低的通量（32或者72）

3.比較差的溫控準(zhǔn)確性

4.很好的溫度均一性

5.比較快的升降溫度（高于每秒5攝氏度）

半導(dǎo)體加熱模塊

1.比較差的溫控均一性

2.比較慢的的升降溫度

3.很好的溫控準(zhǔn)確性

4.比較方便加樣

5.有很高的通量

熒光定量PCR儀的選擇標(biāo)準(zhǔn)

1.靈活性

2.運(yùn)行速度

3.硬件設(shè)計特點

4.耗材的開放性

5.儀器的通道數(shù)量

6.儀器的檢測通量（反應(yīng)孔數(shù)）

7.儀器使用的廣泛程度