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高效液相色譜儀

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GX液相色譜儀使用方法

更新時(shí)間:2025-10-23 13:46:08 類型:高效液相色譜儀使用方法 閱讀量:7980
導(dǎo)讀:高效液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。

  GX液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。

GX液相色譜儀使用步驟

  1、過濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜.

  2、對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。

  3、打開GX液相色譜儀工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動(dòng)相管道,連接檢測系統(tǒng)。

  4、進(jìn)入GX液相色譜儀控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。

  5、有一段時(shí)間沒用,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖洗時(shí)速度不要超過10ml/min。

GX液相色譜儀使用方法.jpg

  6、調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動(dòng)相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。

  7、設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file,選取se-lect users and methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊new method。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:①進(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘;②基線歸零;③進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;④走樣時(shí)間,隨不同的樣品而不同。

  8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。

  9、關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)GX液相色譜儀。

  10、填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。

GX液相色譜儀使用價(jià)值

  1、分離分析藥物的組分含量:由于一種藥劑常含有多組分,一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時(shí)分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測得各組分的含量。

  2、藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)KJ素時(shí),首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測定,對硝酸甘油可測定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。

  3、分析藥物在體內(nèi)的殘量:這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一,如冬凌草甲素是植物中的一組分,有效果,但是毒性大。測定其在血清中含量很重要,現(xiàn)在可用C18柱及甲醇水為流動(dòng)相,測定處理后的血清樣品,即可得到血中的含量。如磺胺類藥品在血清及尿中含量也不允許太大,可用C18柱及酸性乙醇為流動(dòng)相,測定含量后,則可估計(jì)Z合適的用藥劑量。

  4、測定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物,特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測血清中的酮酸及戊二酸。測尿中代謝產(chǎn)物更為方便,不需要繁鎖的預(yù)處理。因?yàn)檠芯磕蛑械慕M分能鑒別病人的代謝功能,對病理研究或監(jiān)床診斷均具有重要的參考價(jià)值。

  GX液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,GX液相色譜儀所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。

GX液相色譜儀.jpg

GX液相色譜儀使用注意事項(xiàng)

  GX液相色譜儀作為實(shí)驗(yàn)室常用的分析型儀器,上手比較快,但有五個(gè)操作細(xì)節(jié)容易被忽略。即使是經(jīng)驗(yàn)豐富的老分析員也會(huì)犯錯(cuò)誤,導(dǎo)致一些儀器故障。

  1、GX液相色譜儀流動(dòng)相不過濾因?yàn)閴m埃或其它雜質(zhì)會(huì)磨損柱塞、密封圈和單向閥,因此流動(dòng)相Z好預(yù)先用0.2um或0.45um濾膜過濾后再使用。流動(dòng)相的溶劑濾頭要不定期清洗或更換。

  2、GX液相色譜儀使用后沒有及時(shí)清洗流動(dòng)相中不應(yīng)含有腐蝕性物質(zhì),含有緩沖鹽的不應(yīng)留在GX液相色譜儀系統(tǒng)內(nèi),由于蒸發(fā)或漏液,可能造成鹽類晶體析出,會(huì)堵塞密封圈和單向閥。

  3、GX液相色譜儀流動(dòng)相走空泵工作時(shí)要防止流動(dòng)相走空,否則泵空轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞桿和密封圈,造成漏液故障。

  4、GX液相色譜儀沒有流動(dòng)相流出,有無壓力可能是泵內(nèi)有空氣,需要先排空,或使用注射器針筒抽出液體,還有可能性是密封圈磨損,需更換。

  5、GX液相色譜儀壓力和流量不穩(wěn)可能是有氣泡,或者是單向閥內(nèi)有異物,需要卸下單向閥,放在10%甲醇水,或者異丙醇超聲后再使用。


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