隨著拉曼光譜儀、激光技術(shù)的發(fā)展,拉曼光譜技術(shù)已發(fā)展了多種不同的分析技術(shù),如傅里葉拉曼光譜、表面增強(qiáng)拉曼光譜、激光共振拉曼光譜、共焦顯微拉曼光譜、光聲拉曼技術(shù)、高溫高壓原位拉曼光譜技術(shù)。
1、傅里葉變換拉曼光譜技術(shù)
傅立葉變換拉曼光譜原理是傅里葉變換技術(shù)采集信號,1064nm的激光光源。來自試樣的拉曼散射光通過干涉儀進(jìn)入探測器,獲得干涉圖,隨后進(jìn)行傅里葉變換得到拉曼光譜。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):針對熒光強(qiáng)、顏色深的樣品更適用、克服了熒光干擾,測量波段寬、熱效應(yīng)小、光譜頻率精度高及靈敏度高等。且具有多通路的特點(diǎn),能同時測定所有頻率。其缺點(diǎn)是溫度漂移,試樣移動對光譜影響大。主要應(yīng)用領(lǐng)域于樣品的結(jié)構(gòu)分析,如蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)分析,染色纖維檢驗(yàn)等。

2、表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)
表面增強(qiáng)拉曼散射原理是衡痕量分子吸附于金屬膠粒和粗糙金屬(如銀、金、銅等)表面作用下,試樣的拉曼散射強(qiáng)度會增加10^4~10^6倍。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):檢測快速、靈敏度高,所需樣品濃度低、無破壞性。其缺點(diǎn)是基襯重線性和穩(wěn)定性難以控制。該技術(shù)主要用于分子的理化研究,病理分析,藥物分析等研究領(lǐng)域,如L-天冬氨酸在銀膠中的吸附研究。
3、激光共振拉曼光譜技術(shù)
激光共振拉曼光譜技術(shù)原理是當(dāng)激發(fā)光波長與分子的電子躍遷波長相等時將發(fā)生共振拉曼散射,激光頻率與待測分子的某個電子吸收峰接近或重合時,信號增強(qiáng)10^4~10^6倍。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,所需樣品濃度低、量少等,特別適用于生物大分子試樣檢測。其缺點(diǎn)是熒光干擾,熱效應(yīng),要求光源可調(diào)。該技術(shù)主要用于低濃度和微量樣品檢測,藥物、生物大分子檢測等領(lǐng)域,如色素蛋白的研究。
4、共聚焦顯微拉曼光譜技術(shù)
共聚焦顯微拉曼光譜技術(shù)通常是指裝備有顯微鏡系統(tǒng)的拉曼光譜儀。其原理是使光源、樣品、探測器三點(diǎn)共軛聚焦,消除雜散光,信號增強(qiáng)10^4~10^6倍。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):采用了低功率激光器、高轉(zhuǎn)換效率、檢測靈敏度高、時間短、所需樣品量少、樣品無需制備、所需樣品濃度低,信息量大。其缺點(diǎn)是受熒光干擾。該技術(shù)主要用于電化學(xué)研究,寶石中細(xì)小包裹體的測量、檢測、司法鑒定等領(lǐng)域。
5、固體光聲拉曼技術(shù)
光聲拉曼光譜術(shù)是通過光聲方法來直接探測樣品中因相干拉曼過程而存儲的能量的一種非線性光譜技術(shù)。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,分辨率高,避免了非共振拉曼散射的影響。其缺點(diǎn)是要求激光具有高度。該技術(shù)主要用于氣體、液體、固體介質(zhì)的特性分析領(lǐng)域。
6、高溫高壓原位拉曼光譜技術(shù)
高溫高壓原位拉曼光譜技術(shù)原理是高溫下發(fā)生理化反應(yīng),得到反應(yīng)物和產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)信息以及反應(yīng)中間體和變化過程的信息。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn):空間分辨率高、消除雜散光、樣品可程序控溫。其缺點(diǎn)有熱輻射。主要用于晶體生長、冶金熔渣、地質(zhì)巖漿等物質(zhì)的高溫結(jié)構(gòu)等研究領(lǐng)域。
拉曼光譜儀要的是無損傷的定性定量分析,它無需樣品準(zhǔn)備,樣品可直接通過光纖探頭或者通過玻璃、石英、和光纖測量。拉曼光譜技術(shù)的優(yōu)越性主要有以下幾點(diǎn):
1、由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學(xué)化合物的理想工具。
2、拉曼光譜儀一次可以同時覆蓋50-4000波數(shù)的區(qū)間,可對有機(jī)物及無機(jī)物進(jìn)行分析。相反,若讓紅外光譜覆蓋相同的區(qū)間則必須改變光柵、光束分離器、濾波器和檢測器。

3、拉曼光譜譜峰清晰尖銳,更適合定量研究、數(shù)據(jù)庫搜索、以及運(yùn)用差異分析進(jìn)行定性研究。在化學(xué)結(jié)構(gòu)分析中,獨(dú)立的拉曼區(qū)間的強(qiáng)度可以和功能集團(tuán)的數(shù)量相關(guān)。
4、因?yàn)榧す馐闹睆皆谒木劢共课煌ǔV挥?.2-2毫米,常規(guī)拉曼光譜只需要少量的樣品就可以得到。這是拉曼光譜相對常規(guī)紅外光譜一個很大的優(yōu)勢。而且,拉曼顯微鏡物鏡可將激光束進(jìn)一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面積的樣品。
5、共振拉曼效應(yīng)可以用來有選擇性地增強(qiáng)大生物分子特個發(fā)色基團(tuán)的振動,這些發(fā)色基團(tuán)的拉曼光強(qiáng)能被選擇性地增強(qiáng)1000到10000倍。
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