現(xiàn)代的色譜儀具有穩(wěn)定性、靈敏性、多用性和自動化程度高等特點。有氣相色譜儀、液相色譜儀和凝膠色譜儀等。這些色譜儀廣泛地用于化學(xué)產(chǎn)品，高分子材料的某種含量的分析，凝膠色譜還可以測定高分子材料的分子量及其分布。

液相色譜儀和氣相色譜儀的簡介

　　氣相色譜儀：氣相于分配層析或吸附層析，僅適用于分析分離揮發(fā)性和低揮發(fā)性物質(zhì)。固定相是在惰性支持物(如磨細(xì)的耐火磚)上覆蓋一層高沸點液體，如硅油、高沸點石蠟和油脂、環(huán)氧類聚合物。

　　液相色譜儀：通常任何氣體均能無限混合，所以系統(tǒng)內(nèi)無論含有多少種氣體都是一個相，稱為氣相。均勻的溶液也是一個相，稱為液相。

液相色譜儀和氣相色譜儀的性能特點

　　氣相色譜儀：

　　具有GX能、高選擇性、高靈敏度、分析速度快和應(yīng)用范圍廣等特點。

　?、貵X能：可以分析沸點十分相近的組分和極為復(fù)雜的多組分混合物，如用毛細(xì)管氣相色譜儀可分析輕油中150個組分。

　?、诟哌x擇性：通過選用高選擇性固定液可對性質(zhì)極為相似的組分行有效分離，如同位素和烴類的異構(gòu)體等。

　　③高靈敏度：配置高靈敏度的檢測器可檢測出10^-11～10^-13g/mL的組分，可用于痕量分析。

　?、芊治鏊俣瓤欤阂粋€分析周期幾分鐘至十幾分鐘，某些快速分析幾秒鐘可以分析若干組分。

　　液相色譜儀：

　?、俑邏海毫鲃酉酁橐后w，流經(jīng)色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。

　?、诟咚伲阂合嗌V儀分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時。

　?、跥X：液相色譜儀分離效能高?？蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到Z佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

　　④高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。

　　⑤應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用GX液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢。

　　⑥柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物

　?、邩悠妨可佟⑷菀谆厥眨簶悠方?jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。

液相色譜儀和氣相色譜儀的分離機(jī)理

　　氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)(溶解度)的微小差異，當(dāng)兩相作相對運動時，這些物質(zhì)在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果，而使不同組分得到分離。

　　GX液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動相改為高壓輸送(Zgao輸送壓力可達(dá)4.9×10^7Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進(jìn)行連續(xù)檢測

液相色譜儀和氣相色譜儀的應(yīng)用范圍

　　氣相色譜儀具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點，但是受技術(shù)條件的限制，沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。一般對500℃以下不易揮發(fā)或受熱易分解的物質(zhì)部分可采用衍生化法或裂解法。

　　液相色譜儀只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機(jī)物(些物質(zhì)幾乎占有機(jī)物總數(shù)的75%～80%)原則上都可應(yīng)用GX液相色譜法來進(jìn)行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜儀分析的約占70～80%。

液相色譜儀和氣相色譜儀的儀器構(gòu)造

　　氣相色譜儀：

　　氣相色譜儀由載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣部分、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。

　　1、柱箱：

　　色譜柱是氣相色譜儀的心臟，樣品中的各個組份在色譜柱中經(jīng)過反復(fù)多次分配后得到分離，從而達(dá)到分析的目的，柱箱的作用就是安裝色譜柱。由于色譜柱的兩端分別連接進(jìn)樣器和檢測器，因此進(jìn)樣器和檢測器的下端(接頭)均插入柱箱。

　　2、進(jìn)樣器：

　　進(jìn)樣器的作用是將樣品送入色譜柱。如果是液體樣品，進(jìn)樣器還必須將其汽化，因此采用微機(jī)對進(jìn)樣器進(jìn)行溫度控制。

　　3、檢測器：

　　檢測器的作用是將樣品的化學(xué)信號轉(zhuǎn)化為物理信號(電信號)。檢測器也需要在一定的溫度條件下才能正常工作，因此采用微機(jī)對檢測器進(jìn)行溫度控制。

　　4、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：

　　該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。

　　液相色譜儀：

　　GX液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。

　　1、進(jìn)樣系統(tǒng)：

　　液相色譜儀進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。

　　2、輸液系統(tǒng)：

　　液相色譜儀輸液系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為1.47～4.4×10^7Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值，或改用競爭性YZ劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團(tuán)的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離。

　　3、分離系統(tǒng)：

　　液相色譜儀分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm(需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管)，內(nèi)徑為2～5mm。固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成，它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的有機(jī)化合物。

　　4、檢測系統(tǒng)：

　　GX液相色譜儀常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。

　?、僮贤鈾z測器

　　該檢測器適用于對紫外光(或可見光)有吸收性能樣品的檢測。其特點：使用面廣(如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);靈敏度高(檢測下限為10^-10g/ml);線性范圍寬;對溫度和流速變化不敏感;可檢測梯度溶液洗脫的樣品。

　　②示差折光檢測器

　　凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測。糖類化合物的檢測使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強(qiáng)、操作簡單，但靈敏度低(檢測下限為10^-7g/ml)，流動相的變化會引起折光率的變化，因此，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。

　?、蹮晒鈾z測器

　　凡具有熒光的物質(zhì)，在一定條件下，其發(fā)射光的熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機(jī)化合物(如多環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質(zhì)等)的測定，其靈敏度很高(檢測下限為10^-12～10^-14g/ml)，痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用。

　　5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：

　　液相色譜儀數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。