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- 月影繚繞 2017-09-30 00:26:23
- 電感耦合等離子體質(zhì)譜 ICP-MS所用電離源是感應(yīng)耦合等離子體(ICP),它與原子發(fā)射光譜儀所用的ICP是一樣的,其主體是一個(gè)由三層石英套管組成的炬管,炬管上端繞有負(fù)載線圈,三層管從里到外分別通載氣,輔助氣和冷卻氣,負(fù)載線圈由高頻電源耦合供電,產(chǎn)生垂直于線圈平面的磁場(chǎng)。如果通過高頻裝置使氬氣電離,則氬離子和電子在電磁場(chǎng)作用下又會(huì)與其它氬原子碰撞產(chǎn)生更多的離子和電子,形成渦流。強(qiáng)大的電流產(chǎn)生高溫,瞬間使氬氣形成溫度可達(dá)10000k的等離子焰炬。樣品由載氣帶入等離子體焰炬會(huì)發(fā)生蒸發(fā)、分解、激發(fā)和電離,輔助氣用來維持等離子體,需要量大約為1L/min。冷卻氣以切線方向引入外管,產(chǎn)生螺旋形氣流,使負(fù)載線圈處外管的內(nèi)壁得到冷卻,冷卻氣流量為10-15L/min。 Z常用的進(jìn)樣方式是利用同心型或直角型氣動(dòng)霧化器產(chǎn)生氣溶膠,在載氣載帶下噴入焰炬,樣品進(jìn)樣量大約為1ml/min,是靠蠕動(dòng)泵送入霧化器的。 在負(fù)載線圈上面約10mm處,焰炬溫度大約為8000K,在這么高的溫度下,電離能低于7eV的元素完全電離,電離能低于10.5ev的元素電離度大于20%。由于大部分重要的元素電離能都低于10.5eV,因此都有很高的靈敏度,少數(shù)電離能較高的元素,如C,O,Cl,Br等也能檢測(cè),只是靈敏度較低。 ICP-MS由ICP焰炬,接口裝置和質(zhì)譜儀三部分組成;若使其具有好的工作狀態(tài),必須設(shè)置各部分的工作條件。 ICP工作條件 主要包括ICP功率,載氣、輔助氣和冷卻氣流量。樣品提升量等,ICP功率一般為1KW左右,冷卻氣流量為15L/min,輔助氣流量和載氣流量約為1L/min,調(diào)節(jié)載氣流量會(huì)影響測(cè)量靈敏度。樣品提升量為1ml/min。 接口裝置工作條件 ICP產(chǎn)生的離子通過接口裝置進(jìn)入質(zhì)譜儀,接口裝置的主要參數(shù)是采樣深度,也即采樣錐孔與焰炬的距離,要調(diào)整兩個(gè)錐孔的距離和對(duì)中,同時(shí)要調(diào)整透鏡電壓,使離子有很好的聚焦。 質(zhì)譜儀工作條件 主要是設(shè)置掃描的范圍。為了減少空氣中成分的干擾,一般要避免采集N2、O2、Ar等離子,進(jìn)行定量分析時(shí),質(zhì)譜掃描要挑選沒有其它元素及氧化物干擾的質(zhì)量。 同時(shí)還要有合適的倍增器電壓。
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- 偏光應(yīng)力儀工作原理及使用方法
對(duì)于玻璃來說,應(yīng)力分布不均還有可能引起事故的發(fā)生。因此,把玻璃、塑料等的內(nèi)部應(yīng)力控制在一定范圍內(nèi)也是非常重要的。目前,常用于測(cè)量透明材料內(nèi)部應(yīng)力的儀器是偏光應(yīng)力儀。那么,它的工作原理是怎樣的,以及它是怎么測(cè)量玻璃等材料的內(nèi)部應(yīng)力的呢?
偏光應(yīng)力儀可對(duì)透明及弱色材料的雙折射率進(jìn)行檢測(cè),并通過Senarmont補(bǔ)償法較好計(jì)算出光程誤差不超過10nm的雙折射率的值。并通過偏振光對(duì)雙折射率的分布進(jìn)行檢測(cè)分析。折射率的分布和大小直接反應(yīng)出材料應(yīng)力的分布與大小。
偏光應(yīng)力儀的工作原理
偏光應(yīng)力儀的工作原理是基于應(yīng)力雙折射檢測(cè),即:玻璃是各向同性體,各方向的折射率相同。如果玻璃中存在應(yīng)力,各向同性的性質(zhì)會(huì)受到破壞,引起折射率的變化,兩個(gè)主應(yīng)力方向的折射率不再相同,會(huì)出現(xiàn)雙折射現(xiàn)象。
雙折射導(dǎo)致材料產(chǎn)生光學(xué)相位延遲,其相位延遲值與應(yīng)力值的關(guān)系由下式確定:C為應(yīng)力光學(xué)常數(shù),它是物性常數(shù),僅與玻璃品種有關(guān)。只要能測(cè)量出相位延遲值,就可以知道材料的內(nèi)部應(yīng)力。并且,絕大多數(shù)偏光應(yīng)力儀給出的量值就是相位延遲值。
偏光應(yīng)力儀的使用方法
偏光應(yīng)力儀經(jīng)常用于玻璃瓶廠、光學(xué)儀器廠,玻璃廠、實(shí)驗(yàn)室作測(cè)量光學(xué)玻璃、玻演制品及其他光學(xué)材料的應(yīng)力值,它的使用方法如下:
1、將靈敏色片取下,將四分之一波片置入視場(chǎng),調(diào)整偏光應(yīng)力儀零點(diǎn),使之呈暗視場(chǎng)。
2、把試樣放入視場(chǎng),從口部觀察底部,這時(shí)視場(chǎng)中會(huì)出現(xiàn)暗十字,如果試樣應(yīng)力小,則這個(gè)暗十字便會(huì)模糊不清。
3、旋轉(zhuǎn)檢偏鏡,使暗十字分離成兩個(gè)沿相反方向移動(dòng)的圓弧,隨著暗區(qū)的外移,在圓弧的凹側(cè)便出現(xiàn)藍(lán)灰色,凸側(cè)便出現(xiàn)褐色。如測(cè)定某選定點(diǎn)的應(yīng)力值,則旋轉(zhuǎn)檢偏鏡直至該點(diǎn)藍(lán)灰色剛好被褐色取代為止。
4、繞軸線旋轉(zhuǎn)供試品,找出大的應(yīng)力點(diǎn),旋轉(zhuǎn)檢偏鏡,直至藍(lán)灰色被褐色取代
5、記錄此時(shí)的檢偏鏡旋轉(zhuǎn)角度,并測(cè)量該點(diǎn)的厚度。
濟(jì)南賽成儀器一直致力于為大部分國家客戶提供高性價(jià)比的整體解決方案,公司的核心宗旨就是持續(xù)創(chuàng)新,打造高精尖檢測(cè)儀器,滿足行業(yè)內(nèi)不同客戶的品控需求,期待與行業(yè)內(nèi)的企事業(yè)單位增進(jìn)交流和合作。
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- 偏光應(yīng)力儀工作原理及使用方法
說起偏光應(yīng)力儀,很多人都知道是檢測(cè)玻璃瓶的內(nèi)應(yīng)力的,但是玻璃瓶怎么就會(huì)有內(nèi)應(yīng)力呢?這個(gè)應(yīng)力來自于哪里呢?偏光應(yīng)力儀工作原理是什么?這些問題很少有人去探究,也有很多人覺得沒有研究的必要。
應(yīng)力是什么?
我們現(xiàn)在所看到的市面上的瓶子本身并不是這個(gè)樣子的,開始時(shí)是一根玻璃管,然后經(jīng)過專業(yè)的設(shè)備加熱變形才有了我們看到的瓶子,但是玻璃本身有一種回到原來狀態(tài)的趨勢(shì),這種趨勢(shì)便形成了力的作用,即我們所說的內(nèi)應(yīng)力。
內(nèi)應(yīng)力是我們的肉眼看不到的,但是若是這個(gè)應(yīng)力太過集中于玻璃瓶的某一個(gè)部位或者某幾個(gè)點(diǎn),玻璃瓶容易破碎,所以需要后期的再次加熱灼燒以分散集中的應(yīng)力,這個(gè)過程稱為玻璃瓶的退火。
工作原理:
偏光應(yīng)力儀的工作原理是基于應(yīng)力雙折射檢測(cè),即:玻璃是各向同性體,各方向的折射率相同。如果玻璃中存在應(yīng)力,各向同性的性質(zhì)會(huì)受到破壞,引起折射率的變化,兩個(gè)主應(yīng)力方向的折射率不再相同,會(huì)出現(xiàn)雙折射現(xiàn)象。
雙折射導(dǎo)致材料產(chǎn)生光學(xué)相位延遲,其相位延遲值與應(yīng)力值的關(guān)系由下式確定:C為應(yīng)力光學(xué)常數(shù),它是物性常數(shù),僅與玻璃品種有關(guān)。只要能測(cè)量出相位延遲值,就可以知道材料的內(nèi)部應(yīng)力。并且,絕大多數(shù)偏光應(yīng)力儀給出的量值就是相位延遲值。
使用方法
偏光應(yīng)力儀經(jīng)常用于玻璃瓶廠、光學(xué)儀器廠,玻璃廠、實(shí)驗(yàn)室作測(cè)量光學(xué)玻璃、玻演制品及其他光學(xué)材料的應(yīng)力值,它的使用方法如下:
1、將靈敏色片取下,將四分之一波片置入視場(chǎng),調(diào)整偏光應(yīng)力儀零點(diǎn),使之呈暗視場(chǎng)。
2、把試樣放入視場(chǎng),從口部觀察底部,這時(shí)視場(chǎng)中會(huì)出現(xiàn)暗十字,如果試樣應(yīng)力小,則這個(gè)暗十字便會(huì)模糊不清。
3、旋轉(zhuǎn)檢偏鏡,使暗十字分離成兩個(gè)沿相反方向移動(dòng)的圓弧,隨著暗區(qū)的外移,在圓弧的凹側(cè)便出現(xiàn)藍(lán)灰色,凸側(cè)便出現(xiàn)褐色。如測(cè)定某選定點(diǎn)的應(yīng)力值,則旋轉(zhuǎn)檢偏鏡直至該點(diǎn)藍(lán)灰色剛好被褐色取代為止。
4、繞軸線旋轉(zhuǎn)供試品,找出大的應(yīng)力點(diǎn),旋轉(zhuǎn)檢偏鏡,直至藍(lán)灰色被褐色取代
5、記錄此時(shí)的檢偏鏡旋轉(zhuǎn)角度,并測(cè)量該點(diǎn)的厚度。
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實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常要對(duì)動(dòng)物、植物類的組織樣品進(jìn)行檢測(cè),而檢測(cè)前往往要對(duì)樣品進(jìn)行前處理,研磨就是前處理工作中非常關(guān)鍵的一步,研磨的細(xì)致程度、均勻度都高通量組織研磨儀會(huì)影響到后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。動(dòng)植物組織類的樣品通常質(zhì)地較為柔軟,有一定韌性,且樣品量較小,常規(guī)的刀式研磨儀、行星式球磨機(jī)在研磨這類樣品時(shí)都存在一定的缺陷,那么有沒有專門針對(duì)這類樣品的研磨儀呢?它就是高通量組織研磨儀。
高通量組織研磨儀的研磨容器一般為特制的離心管,研磨完成可直接放在離心機(jī)上進(jìn)行離心,其中高通量是形容詞,指的是通量多,有多個(gè)研磨離心管。
高通量組織研磨儀能實(shí)現(xiàn)組織樣品的研磨、混合、均化及細(xì)胞破碎,可以研磨硬性、軟性、彈性樣品,也可進(jìn)行細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取,研磨方式可以選擇干磨、濕磨和冷凍研磨,儀器在農(nóng)業(yè)食品、生物醫(yī)藥、地質(zhì)化工、環(huán)境質(zhì)檢等行業(yè)領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室都有應(yīng)用。
葡萄幼葉研磨實(shí)驗(yàn)步驟:
1、用直徑6-8mm的打孔器在葉片合適部位打孔,取8片葉圓片作為研磨樣品。
2、將5顆直徑為3mm的研磨珠和葉圓片共同放置在2ml的離心管(EP管)中。
3、將離心管放入適配器中,向離心管中通入液氮進(jìn)行冷凍,三高通量組織研磨儀到五分鐘后,蓋上離心管的蓋子,再等待三分鐘。
4、將適配器裝配到高通量組織研磨儀中,設(shè)定1500次/分鐘的條件下研磨三分鐘,可得到細(xì)致研磨后的葉片粉末,該粉末可用于提取核酸、蛋白質(zhì)或糖類。
適用情況:
以木本植物為研究材料,需要提取核酸、蛋白質(zhì)或糖類等物質(zhì)來進(jìn)行遺傳或是生理生化分析研究的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,如各種果樹的分子標(biāo)記研究等。
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- 單細(xì)胞ICP-MS的原理及癌癥相關(guān)應(yīng)用
上次我們介紹了單顆粒ICP-MS 的原理,可以高分辨的檢測(cè)到每個(gè)小至納米尺寸的顆粒中的元素類型,顆粒尺寸,并可以統(tǒng)計(jì)樣品中納米顆粒的粒徑分布。每個(gè)納米顆粒產(chǎn)生一個(gè)脈沖峰,所得信號(hào)的強(qiáng)度同顆粒尺寸相關(guān),脈沖數(shù)與顆粒濃度相關(guān)。這種技術(shù)基于超快速掃描時(shí)間的四級(jí)桿質(zhì)量分析器,目前已經(jīng)可以達(dá)到10μs 的采樣時(shí)間,1 秒鐘就能采集多達(dá)100000 個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)。
利用單顆粒ICP-MS的快速采樣時(shí)間的技術(shù),搭配專用的進(jìn)樣系統(tǒng),就可以分析每個(gè)細(xì)胞中的金屬含量,稱為單細(xì)胞ICP-MS。細(xì)胞逐個(gè)進(jìn)入等離子體,被電離,內(nèi)部金屬產(chǎn)生的離子云被ICP-MS 檢測(cè)。在單細(xì)胞ICP-MS 分析中,每個(gè)細(xì)胞被看做是一個(gè)單獨(dú)的個(gè)體或粒子,可以產(chǎn)生自己的離子云。
準(zhǔn)確地定量單個(gè)細(xì)胞的金屬含量,可以更好的理解單個(gè)細(xì)胞對(duì)金屬和/或含金屬納米顆粒的吸收和清除機(jī)制,含金屬藥物與細(xì)胞相互作用的機(jī)制,以及營養(yǎng)物質(zhì)在細(xì)胞群中的分布。傳統(tǒng)的測(cè)量細(xì)胞中金屬含量的方法使用名義質(zhì)量濃度,即假設(shè)金屬在細(xì)胞間的分布是相等的,從而忽略了在單細(xì)胞水平上金屬分布和變化的重要信息。
使用單細(xì)胞ICP-MS,我們可以獲得以下信息
每個(gè)細(xì)胞的金屬含量
細(xì)胞群的金屬含量分布
含有金屬或納米顆粒的細(xì)胞濃度
每個(gè)細(xì)胞的納米顆粒數(shù)量
將納米顆粒設(shè)計(jì)為同時(shí)攜帶藥物和成像探針的模式,以便同時(shí)檢測(cè)和ZL癌癥。還可將其設(shè)計(jì)為專門針對(duì)機(jī)體病變組織和細(xì)胞的模式。納米顆粒相對(duì)傳統(tǒng)小分子藥物,具備以下優(yōu)勢(shì)(i)延長體內(nèi)循環(huán)時(shí)間;(ii)減少非特異性細(xì)胞攝取、意外偏離目標(biāo)和副作用;以及(iii)通過特定癌細(xì)胞靶向部分來提高細(xì)胞相互作用。很多基于納米粒子的癌癥療法已獲準(zhǔn)在臨床上使用和/ 或目前正在開發(fā)中。
金納米顆粒AuNP
制備檸檬酸鹽穩(wěn)定劑的50 nmAuNP,并聚乙二醇化。
癌細(xì)胞
人類T24 膀胱癌細(xì)胞。在組織培養(yǎng)處理過的培養(yǎng)皿上采用McCoy 培養(yǎng)基(補(bǔ)充10% FBS),將細(xì)胞培養(yǎng)為單層細(xì)胞。
攝入實(shí)驗(yàn)
以每孔一百萬個(gè)細(xì)胞的密度接種T24 癌細(xì)胞,并在37 ℃(5% CO2)的溫度下培養(yǎng)24 小時(shí),以確保細(xì)胞粘附在培養(yǎng)皿表面。然后,在濃度為0.4nM AuNP 的McCoy 培養(yǎng)基(補(bǔ)充10% FBS)中,讓細(xì)胞和50 nm聚乙二醇化的AuNP 接觸4 小時(shí)。形成Z終濃度為100,000 個(gè)細(xì)胞/mL 的單細(xì)胞懸浮液。
結(jié)論
結(jié)果表明,每個(gè)細(xì)胞吸收的AuNP 分布并不均勻,特定細(xì)胞群內(nèi)的某些細(xì)胞比其他細(xì)胞明顯攝取更多AuNP。SC-ICP-MS 是一個(gè)強(qiáng)大的分析工具,可在單個(gè)細(xì)胞水平上量化元素濃度和納米粒子的分布。這項(xiàng)技術(shù)在單細(xì)胞基礎(chǔ)上,具有提供的納米粒子-細(xì)胞相互作用差異新見解的潛力。
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