本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編

2018-09-29 10:02 2316閱讀次數(shù)

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• Kainos FGF-23 ELISA Kit說明書

  KainosLaboratories是日本的生物公司，其生產(chǎn)的FGF-23ELISAKit和ADAMTS13-cleaved廣泛應(yīng)用于各大醫(yī)藥企業(yè)，上海起發(fā)實驗試劑有限公司正式為您帶來KainosLaboratories高品質(zhì)的產(chǎn)品，歡迎來電查詢http://www.kainos.co.jpKainosLaboratories代理KainosLaboratoriesZG代理，KainosLaboratories上海代理，KainosLaboratories總代，KainosLaboratories北京代理ThiskitcapturesADAMTS13-cleavedproductsusingasandwichmethodwiththeanti-GSTmousemonoclonalantibodyandtheperoxidase-conjugatedmousemonoclonalanti-N10antibody.First,theanti-GSTmousemonoclonalantibodyimmobilizedontothemicroplatereactswiththeVWF73substrate（GST-VWF73-His）.Thesampleisthenappliedtothemicroplate,onwhichADAMTS13cleavestheVWF73substrate.Byapplyingthemousemonoclonalanti-N10antibodyconjugatedwithhorseradishperoxidase（HRPconjugatedantibody）,thecleavageproductissandwichedbetweenthetwoantibodies.BecausetheamountofthecleavageproductsdependsontheADAMTS13activity,theamountoftheenzyme-labeledantibodiesthatbindtothecleavageproductsalsoreflectthelevelofADAMTS13activity.Therefore,theplasmaADAMTS13activitycanbedeterminedbycolorimetricallymeasuringtheamountofdetachedoxidized（colored）TMBZusingureahydrogenperoxide（H2O2）and3,3’,5,5’-Tetramethyl-benzidine（TMBZ）asthesubstrates.上海起發(fā)實驗試劑有限公司實驗試劑一站式采購服務(wù)商1：強大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營超過700多個品牌，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。4：富有競爭力的價格優(yōu)勢，絕大部分價格有優(yōu)勢。5：多年積累良好的信譽，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等知名藥企。6：我們還是Santa,AdvancedBiotechnologiesInc,AthensResearch&Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FDNeurotechnologies,Inc.FormuMaxScientific,Inc,Genebridege,GlycotopeBiotechnologyGmbH;iduron,InnovativeResearchofAmerica,Ludger,neuroprobe,omicronbio,Polysciences,prospecbi,QA-BIO,quickzyme,RESEARCHDIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLinkBioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。7：我們還是invitrogen,qiagen,Tempshield,Inc.am,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批發(fā)，歡迎合作。[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）說明書

  www.biokanu.com大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）的含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）水平。用純化的大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23），再與HRP標(biāo)記的成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-23（FGF-23）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：90ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為60ng/L，40ng/L，20ng/L，10ng/L，5ng/L）。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍：2ng/L-80ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 人成纖維生長因子-23（FGF-23）ELISA試劑盒說明書

  人成纖維生長因子-23（FGF-23）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人FGF-23單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的FGF-23與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人FGF-23，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，F(xiàn)GF-23濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中FGF-23濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)FGF-23含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的FGF-23檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人FGF-23。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人黑色素ELISA Kit說明書

  人黑色素ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-21 00:00

  安裝說明

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• Protein A ELISA Kit 9333-1說明書

  P/N9333-1RepligenA蛋白ELISA試劑盒ProteinAELISAKitP/N9333-1上海起發(fā)實驗試劑有限公司ProteinAELISAKitP/N9333-1專業(yè)代理，具體產(chǎn)品信息歡迎電詢：4006551678。ProteinAELISAKitHighlightsAlargepercentageoftheworld'scommercialsupplyofantibodyreliesonaRepligenmanufacturedproteinAligandforpurificationandRepligen’sELISAkitforproductrelease.2kitsforthemostaccuratedetectionandquantitationofleachedproteinARecombinantProteinAKitMabSelectSuReKitSuperiorinterandintrakitconsistencyforunparalleledreproducibilityPolyclonalchickencaptureantibodyforgreaterProteinAspecificityBiotinylatedrabbitanti-ProteinAdetectionantibodyforgreatersensitivityMatchedstandardsforthegreatestquantitationaccuracyThreesampleprepprotocolsforsuperiormethodoptimization上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 組胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59221）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測。深化此實驗可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明組胺（β-咪唑乙胺）是人體中Z重要的介質(zhì)，它主要存在于過敏反應(yīng)的起始階段（速發(fā)型過敏）。組胺是由組胺酸經(jīng)脫氨基作用產(chǎn)生的。組胺幾乎存在于機體的所有組織中，主要儲存于柱狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無活性的復(fù)合體性存在，只有當(dāng)需要的時候才會釋放。像其它的介質(zhì)一樣，組胺不僅能調(diào)節(jié)過敏反應(yīng)的各種臨床癥狀，也可以調(diào)節(jié)終止過敏反應(yīng)的一系列效應(yīng)。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測組胺的方法有：定量檢測各種速發(fā)型過敏反應(yīng)中嗜堿性白細(xì)胞釋放組胺的量，也可以檢測過敏藥物ZL后各種體液（血漿，尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清）中組胺的量。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應(yīng)。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲存血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品。混濁的樣品應(yīng)當(dāng)在實驗開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性5小時3個月2年尿液實驗必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計算結(jié)果，請確定尿液的總體積。實驗開始前請先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽直射，避免反復(fù)凍融。儲存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時3天6個月細(xì)胞培養(yǎng)上清使用細(xì)胞培養(yǎng)上清作樣品，一般沒特殊注意事項細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測必須用肝素化全血，具體信息請見相應(yīng)的說明書（RE95000）6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍(lán)色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，200倍濃縮，內(nèi)含辣根過氧酶標(biāo)記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標(biāo)準(zhǔn)品A-G，凍干，用于血漿樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺、人血漿。具體濃度請見試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質(zhì)控1+2，凍干，內(nèi)含：組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質(zhì)控1+2，即用，內(nèi)含：組胺、人尿液（酸化的）。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.25mlACYLREAG?；噭?，即用，內(nèi)含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，5倍濃縮，內(nèi)含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含：Tris緩沖液、苯酚（pH＜7.5時顏色會發(fā)生改變＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;20;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲器的8道移液器7）洗滌瓶，自動或半自動洗板機8）酶標(biāo)儀（參考波長：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準(zhǔn)備說明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進(jìn)行檢測，下述體積為檢測32人份時所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性20ml檢測緩沖液100ml蒸餾水1：52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標(biāo)準(zhǔn)品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月血漿質(zhì)控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月10ul（*）酶聯(lián)物2ml檢測緩沖液1:200臨時配置,只能使用一次18-25℃30分鐘（*）在稀釋前,確保塞子內(nèi)無殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)在?；坝孟鄳?yīng)的稀釋液稀釋,尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液（Cat.no.KEHP711）,試劑盒內(nèi)未提供。8.3樣品的?；迷嚬軠?zhǔn)備樣品注意不能血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線確定?；蛞夯蚣?xì)胞培養(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標(biāo)準(zhǔn)曲線確定酰化血漿樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標(biāo)準(zhǔn)品、血漿質(zhì)控品和病人樣品分別100ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入20ul酰化試劑，加入?；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。8.3.2尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清1將U/C標(biāo)準(zhǔn)品、尿液質(zhì)控品和病人尿液或細(xì)胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液，旋渦混合。如果指示劑變成無色，說明溶液的pH值很低，樣品中含有很多酸性物質(zhì)。在這種情況下，再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?；噭?，加入?；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。注意：?；幚砗玫臉悠房稍?-8℃下存放一晚，-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實驗步驟1將酰化處理過的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)物，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔的時間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細(xì)胞培養(yǎng)上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內(nèi)450nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、期望值實驗結(jié)果不能當(dāng)作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：血漿尿液24小時尿液自然產(chǎn)生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考，詳情請以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59251）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進(jìn)行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清（綠色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜20＜110＜125＜0.68本譯文僅供參考，詳情請以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 去甲腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59261）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進(jìn)行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹謩硬僮靼妫?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清（藍(lán)色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜90＜535＜600＜3.55本譯文僅供參考，詳情請以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 多巴胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59161）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測，可手動操作，也可自動操作。進(jìn)一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明兒茶酚氨類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚氨激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，所以用戶可使用各種各樣的動物材料進(jìn)行實驗。如果用此試劑盒測大鼠、小鼠或其它動物，則兒茶酚氨的化學(xué)結(jié)構(gòu)與動物的相同。3、實驗原理此固相酶聯(lián)免疫吸附實驗利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時間之內(nèi)，加入的溶液抗在體可直接與抗原分子上的一個表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗（可與抗原分子上的不同表位結(jié)合）在包被孔中溫育。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒所提供的試劑足夠做96孔單孔檢測或48孔雙份檢測。注意此包被板也可用于檢測腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺。數(shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,內(nèi)含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。2×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗多巴胺抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。4×13mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。2×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，內(nèi)含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器9）樣品稀釋用試管。8、手動操作8.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無需稀釋。8.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液225ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h9、實驗步驟（手動操作）9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶化注意如果使用自動置換型移液器，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加回到提取板相應(yīng)的微孔內(nèi)。將提取板置于一斜坡位置比較適當(dāng)?？蒲杏媒M織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清可按如下建議處理：細(xì)胞培養(yǎng)上清必須根據(jù)其培養(yǎng)基及其相應(yīng)濃度進(jìn)行處理：根據(jù)尿液樣品的操作說明（至少提取20ul上清液），未稀釋樣品的靈敏度大概為1.0ng/ml。如果基質(zhì)內(nèi)添加了血清（FCS），血漿（至少提取500ul上清）操作的靈敏度可以是5pg/ml。無高氯酸的組織勻漿可用做勻漿樣品，具體信息請咨詢IBL漢堡公司。9.3檢測尿液和血漿中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。將100ul提取好的血漿樣品加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育120min5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育60min8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）10、自動操作步驟10.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無需稀釋。10.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前10.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提取（提取板）1）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各30μL和750μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入750μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入450μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。10.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液450ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶聯(lián)物15ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h11、實驗步驟（自動操作）11.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。11.2實驗步驟在使用自動方法做實驗時，我們建議按1：10的比例預(yù)先稀釋提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品（如果是手動操作則用Release緩沖液進(jìn)行稀釋）。如果稀釋了，第二個步驟可簡化為：將已提取好的血漿樣品、已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品（按1：10的比例預(yù)先稀釋）、質(zhì)控品和尿液樣品各100μL加入到微孔中。在進(jìn)行預(yù)稀釋時，應(yīng)當(dāng)考慮到自動操作的死容積。1）在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2）在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min5）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。6）每孔加入100μL酶聯(lián)物7）蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min8）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。9）加底物液和終止液時，其時間間隔應(yīng)相同10）每孔加入200μL底物液11）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動操作時的溫度超過25℃時，則應(yīng)相應(yīng)的將溫育時間縮短至30min。12）每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。13）加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）12、期望值實驗結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本譯文僅供參考，詳情請以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

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  人活性氧(ROS)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-21 00:00

  安裝說明

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