本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2018-09-27 10:00 587閱讀次數(shù)

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• 常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒

  常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒　　制備、滅菌與消毒：　　一、實驗?zāi)康摹　×私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾CJ的操作方法?！　《嶒炘怼　∨囵B(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實驗?zāi)康牟煌?，培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。　　牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用Z廣泛和Z普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的Z基本的營養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長繁殖之用?！　「蔁崽炀?、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果?！　∪?、試劑與器材　　1.器材　　試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、培養(yǎng)基、分裝器、天平、牛角匙、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、棉花、牛皮紙、記號筆、麻繩、紗布、吸管、培養(yǎng)皿、電烘箱、注射器、微孔濾膜過濾器、鑷子等?！　?.試劑牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂　　四、實驗內(nèi)容　　1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查　　2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物　　3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查　　4.過濾CJ：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌　　五、關(guān)鍵步驟及注意事項　　1.要嚴(yán)格按配方配制?！　?.調(diào)pH不要過頭。　　3.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊，注意溫度的時間控制，70C以下放物、取物。　　4.高壓滅菌要注意物品不要過多，加熱后排除冷空氣，到時降壓回零取物?！　?.過濾CJ要注意各部件滅菌，壓濾時，壓力要適當(dāng)，不可太猛太快，濾膜要注意清洗保存。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 實驗室常用的消毒滅菌方法

  實驗室常用的消毒滅菌方法[詳細(xì)]

  2014-09-23 00:00

  期刊論文

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• 培養(yǎng)基的制備及滅菌

  培養(yǎng)基的制備及滅菌[詳細(xì)]

  2024-09-14 09:59

  實驗操作

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• 博翎儀器-消毒與滅菌常用方法及設(shè)備

  （一）干熱滅菌【原理】高溫對細(xì)菌有明顯的致死作用，主要機理是凝固菌體蛋白質(zhì)，也可能與細(xì)菌DNA單螺旋斷裂、細(xì)菌膜功能受損及菌體內(nèi)電解質(zhì)濃縮有關(guān)。干烤箱為常用的干熱滅菌器，其殺菌作用是通過脫水干燥和大分子變性完成的。[詳細(xì)]

  2018-10-02 10:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 培養(yǎng)基的滅菌及準(zhǔn)備

  培養(yǎng)基的滅菌及準(zhǔn)備B．1大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）培養(yǎng)基的滅菌及準(zhǔn)備B．1.1培養(yǎng)基采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基，可以按以下制備，也可使用按該生產(chǎn)的符合要求的脫水培養(yǎng)基。配制后按培養(yǎng)基規(guī)定的經(jīng)驗證合格的滅菌程序滅菌。B．1.2大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基配方酪蛋白胰酶消化物…………………………………………………………………15g大豆粉木瓜蛋白酶消化物…………………………………………………………5g氯化鈉………………………………………………………………………………5g瓊脂…………………………………………………………………………………15g純化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除瓊脂，混合，微熱溶解，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.3±0.2，加入瓊脂，加熱融化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿（φ90mm1））中。加蓋后在室溫放至凝固。B．2沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基的滅菌及準(zhǔn)備葡萄糖………………………………………………………………………………40g酪蛋白胰酶消化物、動物組織的胃酶消化物等量混合…………………………10g瓊脂…………………………………………………………………………………15g純化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除瓊脂，混合，微熱溶解，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為5.6±0.2，加入瓊脂，加熱融化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿（φ90mm1））中。加蓋后在室溫放至凝固。B．3培養(yǎng)基平皿培養(yǎng)及保存制備好的培養(yǎng)基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周為宜或按廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。采用適宜方法在平皿上做好培養(yǎng)基的名稱、制備日期記錄的標(biāo)記。1）如果用其他規(guī)格的平皿，可適當(dāng)增減培養(yǎng)基的量，使之在平皿中形成至少2mm厚的瓊脂層。[詳細(xì)]

  2018-09-28 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 常用的脫水培養(yǎng)基和添加劑

  常用的脫水培養(yǎng)基和添加劑[詳細(xì)]

  2009-04-15 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 分析移液器是如何滅菌和消毒的

  分子生物技術(shù)的基礎(chǔ)工具移液器的使用中，消毒與滅菌的概念常常是被混用的。兩者差別在于：消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi)，達(dá)到無害化水平，而滅菌則要求消滅所有活菌。滅菌的處理要求高于消毒。1．化學(xué)消毒。簡單說來，就是用酒精等擦拭移液器的外表面，然后晾干即可。這對于所有移液器品牌而言都應(yīng)該是可以做到的，否則其外殼的材質(zhì)也太差了！2．紫外線消毒。用紫外線照射移液器的表面，通過破壞細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)來達(dá)到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強度和細(xì)菌對紫外線的抵抗力的強弱。多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的，但需要事先與供應(yīng)商進(jìn)行確認(rèn)。3．移液器高溫高壓滅菌。通常來說，移液器高溫高壓滅菌的工作條件是：102.9kPa（1.05kg/cm2），121℃，20分鐘。移液器的高溫高壓滅菌分為整支滅菌和半支滅菌，絕可以大多數(shù)品牌的移液器都可以半支滅菌，但是否能整支滅菌，使用者一定要與供應(yīng)商確認(rèn)。市場上，手動移液器等產(chǎn)品可以整支滅菌。不過這里需要提醒幾點：**，除了個別應(yīng)用，如傳染性病毒研究，多數(shù)客戶并不需要整支滅菌；第二，對于同品牌的產(chǎn)品，往往整支滅菌的貴于半支滅菌的，客戶需根據(jù)自己的需要作出決定。[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 潔凈區(qū)使用臭氧消毒滅菌的應(yīng)用研究

  潔凈區(qū)使用臭氧消毒滅菌的應(yīng)用研究[詳細(xì)]

  2024-09-20 13:31

  期刊論文

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• Masterclave——培養(yǎng)基自動制備儀

  Masterclave——培養(yǎng)基自動制備儀[詳細(xì)]

  2016-06-03 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 制備培養(yǎng)基的小技巧

  制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基除附有和使用說明外還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性試驗的質(zhì)控菌株和用途。配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作，受潮結(jié)塊不能使用，以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應(yīng)是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應(yīng)洗凈，用蒸餾水沖凈，烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器，避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合，生成有害物質(zhì)，影響細(xì)菌生長。3.培養(yǎng)基若于非潔凈的玻璃器皿中制備，可能導(dǎo)致YJ物質(zhì)進(jìn)入培養(yǎng)基中。YJ物質(zhì)可能是殘留的玻璃器皿清潔用的清潔劑或之前玻璃器皿所盛裝的物質(zhì)。因此。應(yīng)使用純化水完全沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留，并進(jìn)行清除污物的確認(rèn)。4.配制培養(yǎng)基Z常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水，對熱敏感的培養(yǎng)基應(yīng)用滅菌水和無菌容器配制與分裝，配制時若需加熱助溶應(yīng)注意溫度不要過高。5.對配制培養(yǎng)基的過程作詳細(xì)的記錄，記錄內(nèi)容包括：配制日期、培養(yǎng)基名稱、成分、配制數(shù)量、質(zhì)量監(jiān)控結(jié)果等進(jìn)行全面詳細(xì)記錄。友情推薦：上海勁馬實驗設(shè)備有限公司上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 3種常用低溫滅菌方法研究現(xiàn)狀

  3種常用低溫滅菌方法研究現(xiàn)狀[詳細(xì)]

  2018-08-31 10:11

  產(chǎn)品樣冊

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• 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的滅菌八步驟

  牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的滅菌八步驟[詳細(xì)]

  2015-04-29 00:00

  操作手冊

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• 常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法

  常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法配方一牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化鈉0.5克，瓊脂1.5克，水100毫升在燒杯內(nèi)加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2～7.6,分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌30分鐘。配方二馬鈴薯培養(yǎng)基取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。配方三根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10克磷酸氫二鉀0.5克碳酸鈣3克硫酸鎂0.2克酵母粉0.4克瓊脂20克水1000毫升1%結(jié)晶紫溶液1毫升先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。[詳細(xì)]

  2024-09-29 07:30

  產(chǎn)品樣冊

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• 全自動培養(yǎng)基制備儀產(chǎn)品樣冊

  全自動培養(yǎng)基制備儀產(chǎn)品樣冊[詳細(xì)]

  2016-10-20 09:17

  課件

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• 3 種常用低溫滅菌方法研究現(xiàn)狀

  3 種常用低溫滅菌方法研究現(xiàn)狀[詳細(xì)]

  2024-10-01 12:43

  期刊論文

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• 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)

  德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)[詳細(xì)]

  2014-01-10 00:00

  實驗操作

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• 實驗室自己動手制備培養(yǎng)基的方法要求

  實驗室自己動手制備培養(yǎng)基的方法要求[詳細(xì)]

  2015-06-04 00:00

  安裝說明

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• 甲醛熏蒸滅菌生物指示劑 潔凈區(qū)甲醛熏蒸消毒滅菌效果驗證

  甲醛熏蒸滅菌生物指示劑H6307使用方法：1、在指定位置放置芽孢菌片袋，進(jìn)行滅菌。2、滅菌處理后，將菌片袋移至超凈工作臺，在無菌條件下，用無菌鑷子從菌片袋里取出芽孢菌片放入培養(yǎng)基中。3、培養(yǎng)基瓶蓋擰緊后，插入專用的“ACEmini恒溫培養(yǎng)器（型號：H8200）”內(nèi)，在30～37℃溫度間培養(yǎng)48小時。4、陽性對照：從未經(jīng)過滅菌處理的芽孢菌片袋中取出芽孢菌片放入培養(yǎng)基中，同時進(jìn)行培養(yǎng)。每次培養(yǎng)時都必須使用陽性對照。詳細(xì)資料請下載查看[詳細(xì)]

  2018-12-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 高壓滅菌器做九管法滅菌時如何避免氣泡殘留在培養(yǎng)基

  大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血動物糞便、人類經(jīng)?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。而檢測食品中大腸菌群的方法中，國內(nèi)采用的進(jìn)出口食品大腸菌群檢測方法主要有國家標(biāo)準(zhǔn)，國家標(biāo)準(zhǔn)的三步九管法，即乳糖發(fā)酵試驗、分離培養(yǎng)、證實試驗。由于大腸菌群指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，即：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。因此大腸菌群的檢測一般都是按照它的定義進(jìn)行。1.乳糖發(fā)酵試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。2.分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。3.證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。在乳糖發(fā)酵試驗工作中，經(jīng)常可以看到在發(fā)酵倒管內(nèi)極微少的氣泡（有時比小米粒還?。袝r可以遇到在初發(fā)酵時產(chǎn)酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實驗表明大腸菌群的產(chǎn)氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體，少者可以產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。在試驗過程中，會用到高壓滅菌器來進(jìn)行滅菌，九管法滅菌時，大腸菌在高溫下會產(chǎn)生氣泡，如果用的是ALP高壓力滅菌鍋，可以通過進(jìn)入工程師菜單，調(diào)整在升溫過程中的排氣時間，可以有效的排走殘留在培養(yǎng)基中的氣泡。[詳細(xì)]

  2024-09-11 19:53

  產(chǎn)品樣冊

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• 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)產(chǎn)品樣冊

  德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)產(chǎn)品樣冊[詳細(xì)]

  2016-10-20 10:18

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