国产三级在线看完整版-内射白嫩大屁股在线播放91-欧美精品国产精品综合-国产精品视频网站一区-一二三四在线观看视频韩国-国产不卡国产不卡国产精品不卡-日本岛国一区二区三区四区-成年人免费在线看片网站-熟女少妇一区二区三区四区

儀器網(wǎng)(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊2 登錄
網(wǎng)站首頁-資訊-話題-產(chǎn)品-評測-品牌庫-供應(yīng)商-展會-招標-采購-知識-技術(shù)-社區(qū)-資料-方案-產(chǎn)品庫-視頻

資料庫

儀器網(wǎng)> 資料庫>全血基因組DNA提取試劑盒簡介及說明書

全血基因組DNA提取試劑盒簡介及說明書

本文由 上海索寶生物科技有限公司 整理匯編

2018-09-02 10:00 1512閱讀次數(shù)

掃    碼    分   享
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
立即下載
全血基因組DNA提取試劑盒說明書貨號:D1800規(guī)格:50T/100T保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,復(fù)檢期12個月,2℃-8℃保存時間更長。試劑盒內(nèi)容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2紅細胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脫液10ml20ml吸附柱50個100個收集管50個100個說明書1份1份產(chǎn)品簡介:本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統(tǒng),提取全血基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗。操作步驟:使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇,加入休積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的0.lml-1ml血液樣品):a、在血液樣品中加入2-3倍體積的紅細胞裂解液,充分顛倒混勻,12000rpm離心1min,小心吸去上清,沉淀應(yīng)為白色或淡紅色,如果裂解不徹底,可重復(fù)以上述步驟一次。向沉淀中加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。b、如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細胞為有核細胞,因此處理量為5-20u1,不需要再用紅細胞裂解液處理,直接加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。2、向懸浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分顛倒混勻,室溫放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分顛倒混勻,65℃水浴消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化完全為止。4、加入2倍體積溶液B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),充分顛倒混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入股附柱中,室溫放置2min,5、12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。8、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR等。9、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜ZY懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。注意事項:1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個月,更長時間的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因組DNA,可優(yōu)先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因為用肝素抗凝的血液提取的基因組DNA進行PCR擴增時,有PCR擴增YZ現(xiàn)象。3、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。5、絕大多數(shù)哺乳動物的全血如入全血中的紅細胞無核,故在提取基因組DNA時需去除不含DNA的無核紅細胞,以免影響紅細胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細胞為有核細胞,因此處理量減少為5-20ul,不需要再用紅細胞裂解液來裂解紅細胞。6、洗脫緩沖液的體積**不少于50ul,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。相關(guān)產(chǎn)品:D1850全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE緩沖液T10505×TBE緩沖液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色劑(5000×)

參與評論

全部評論(0條)

更多資料

該會員其他資料
merck 默克 現(xiàn)貨 促銷 報價單 2011目錄
spectrum 試劑 目錄 價格 代理 斯佰全 染色劑
大鼠P物質(zhì)(SP)酶聯(lián)免疫分析 ELISA 試劑盒使用說明書
大鼠白細胞介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫 elisa 試劑盒使用說明書
大鼠膽囊收縮素(CCK)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書
移液管相關(guān)
基因組DNA提取相關(guān)
增加RT-PCR靈敏度的方法
細胞凍存及復(fù)蘇
土壤DNA提取

在線留言

換一張?
取消