本文由 賽默飛色譜及質(zhì)譜 整理匯編

2018-08-10 10:58 314閱讀次數(shù)

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• QExactive一小時(shí)DDA鑒定DIA定量Hela 蛋白

  數(shù)據(jù)非依賴(lài)性的掃描模式（data-independentacquisition,DIA）是近幾年來(lái)發(fā)展的一種新的質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集方式[1]。它的理念是用二級(jí)碎片離子進(jìn)行蛋白相對(duì)/定量。DIA掃描模式中，超高分辨質(zhì)譜對(duì)特定質(zhì)量范圍內(nèi)的所有母離子進(jìn)行碎裂，采集所有母離子的碎片離子，并快速地依次掃描相鄰的母離子寬口內(nèi)的所有碎片離子。DIA的數(shù)據(jù)中包含了所有碎片離子的保留時(shí)間和強(qiáng)度信息。用非常小的質(zhì)量偏差寬口（如10ppm）目標(biāo)性地抽提同一肽段的多個(gè)子離子，計(jì)算子離子的強(qiáng)度，就能對(duì)該肽段進(jìn)行鑒定和定量。DIA定量相比傳統(tǒng)的基于母離子強(qiáng)度的DDA定量有選擇性好，定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)[1]，所以DIA成為定量蛋白組學(xué)新的發(fā)展方向。QExactiveHF是賽默飛世爾科技在2014年的ASMS上推出的全新靜電場(chǎng)軌道阱超高分辨質(zhì)譜儀（圖1）[2,3]。QExactiveHF采用了分段式四極桿技術(shù)（AdvancedQuadrupoleTechnology，AQT）使離子傳輸效率至少提高了2倍；超高場(chǎng)Orbitrap技術(shù)，提高了Orbitrap掃描速度，在15000分辨率時(shí)，二級(jí)譜圖的掃描速度是20Hz。這兩項(xiàng)技術(shù)提高了QEHF進(jìn)行DDA、DIA數(shù)據(jù)的采集能力。本文用1小時(shí)快速色譜梯度對(duì)QEHF的DDA鑒定能力和DIA定量能力進(jìn)行考察，同時(shí)從定量肽段數(shù)目和CV兩方面對(duì)DDA定量和DIA定量能力進(jìn)行比較。使用儀器：QExactiveHF[詳細(xì)]

  2018-08-10 10:58

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 超高分辨質(zhì)譜一小時(shí)DIA 定量4000 個(gè)Hela 蛋白

  超高分辨質(zhì)譜一小時(shí)DIA 定量4000 個(gè)Hela 蛋白[詳細(xì)]

  2015-12-29 00:00

  應(yīng)用文章

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• FH0314-人宮頸癌細(xì)胞；Hela

  FH0314-人宮頸癌細(xì)胞；Hela[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• 賽默飛QExactive不同高分辨定量方式在藥物分析中的應(yīng)用

  質(zhì)譜技術(shù)因其出色的靈敏度和專(zhuān)屬性已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于藥物分析，傳統(tǒng)質(zhì)譜定量采用單位分辨選擇離子檢測(cè)SIM或選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)SRM的定量方式，高分辨質(zhì)譜具有獲得化合物離子極ng確質(zhì)量數(shù)和分離相鄰質(zhì)量峰的能力，被越來(lái)越多的應(yīng)用于定量分析中。基于Orbitrap靜電場(chǎng)軌道阱技術(shù)的QExactiveFocus將高性能四極桿與高分辨Orbitrap技術(shù)相結(jié)合，具有高達(dá)70,000FWHM的分辨率和長(zhǎng)期穩(wěn)定的高質(zhì)量精度，可獲得高質(zhì)量的一級(jí)和二級(jí)高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)，保證了定性和定量結(jié)果的可靠性；媲美高端三重四極桿的靈敏度和寬線(xiàn)性范圍可輕松定量藥物中的微量組分。QExactiveFocus提供不同的高分辨定量模式，滿(mǎn)足不同的定量需要：如有需要請(qǐng)下載，謝謝。[詳細(xì)]

  2018-08-10 10:58

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 安捷倫用于藥物代謝物鑒定及定量的強(qiáng)大解決方案

  安捷倫用于藥物代謝物鑒定及定量的強(qiáng)大解決方案[詳細(xì)]

  2024-09-27 23:50

  其它

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• 幽門(mén)螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定

  幽門(mén)螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定[詳細(xì)]

  2013-04-22 00:00

  其它

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• 幽門(mén)螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定

  幽門(mén)螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定[詳細(xì)]

  2012-07-18 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 人P21蛋白（P21）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）

  上海金穗生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)銷(xiāo)售各種生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、透析袋。本公司所有產(chǎn)品主要用于科研方面，不用于臨床診斷。歡迎來(lái)電洽詢(xún)！全國(guó)免費(fèi)客服熱線(xiàn)：400-021-1237本公司多年專(zhuān)業(yè)酶免服務(wù)，質(zhì)量保證，價(jià)格低，超過(guò)5萬(wàn)家科研單位、10萬(wàn)家工廠(chǎng)的合作經(jīng)驗(yàn)，讓我們的elisa試劑盒、生化試劑更具有競(jìng)爭(zhēng)力。期待您的來(lái)電合作！[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 賽默飛數(shù)據(jù)非依賴(lài)采集DIA解決方案

  賽默飛數(shù)據(jù)非依賴(lài)采集DIA解決方案[詳細(xì)]

  2015-06-11 00:00

  應(yīng)用文章

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• 抗血清鑒定

  抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項(xiàng)：1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正／逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原抗體結(jié)合下降50％；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清。2．特異性（specificity）是指一種抗體識(shí)別相應(yīng)抗原決定簇的能力。由于一種抗原常有結(jié)構(gòu)極相似的類(lèi)似物（同類(lèi)物、前體、降解物和代謝物），其抗血清可能對(duì)該抗原的類(lèi)似物產(chǎn)生交叉反應(yīng)。因此，抗體的特異性通常以交叉反應(yīng)率表示：將反應(yīng)的Zda結(jié)合率YZ下降50％時(shí)特異性抗原與類(lèi)似物的劑量（）之比來(lái)計(jì)算交叉反應(yīng)率。如胰島素標(biāo)準(zhǔn)品使125I胰島素與抗血清的Zda結(jié)合下降50％的用量為0．5ng，而類(lèi)似的物（前體）胰島素原的用量為500ng，則相應(yīng)的交叉反應(yīng)率（％）為：0．5／500＝0．1％?？贵w交叉反應(yīng)程度的高低直接影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，但應(yīng)注意，抗血清特異性與分析方法特異性并不完全相同，因后者對(duì)某一待測(cè)抗原的特異性程度不僅取決于所用抗體，尚有賴(lài)于標(biāo)記物的質(zhì)量和方法學(xué)設(shè)計(jì)。3．效價(jià)（titer）是反映抗血清中有效抗體含量的相對(duì)參數(shù)，即抗血清稀釋至能與抗原發(fā)生有效反應(yīng)的Zda稀釋度。通常是將一株抗血清作系列稀釋后與標(biāo)記抗原反應(yīng)，計(jì)算不同稀釋度時(shí)抗體結(jié)合標(biāo)記抗原的百分率，繪制出抗體稀釋度曲線(xiàn)。結(jié)合具體方法設(shè)計(jì)要求。效價(jià)一般指結(jié)合50％標(biāo)記抗原時(shí)，抗血清的稀釋度。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 有機(jī)溶劑鑒定

  有機(jī)溶劑鑒定[詳細(xì)]

  2024-09-25 21:17

  應(yīng)用文章

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• 超氧化物歧化酶對(duì)抗腫瘤藥物促宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的影響

  超氧化物歧化酶對(duì)抗腫瘤藥物促宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的影響[詳細(xì)]

  2013-07-12 00:00

  報(bào)價(jià)單

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• 組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙酰化p53多肽底物，經(jīng)過(guò)SIRT1脫乙?；?，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類(lèi)共20多個(gè)蛋白：種類(lèi)I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類(lèi)II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類(lèi)的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類(lèi)III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱(chēng)為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴(lài)氨酸脫乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化賴(lài)氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來(lái)標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙?；琙后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長(zhǎng)405nm），由此來(lái)定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶(hù)自備磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品操作和保存的容器（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為20次操作，包括背景對(duì)照2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過(guò)程中，背景測(cè)定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要5．樣品處理時(shí)，避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測(cè)定7．濾波器可以使用波長(zhǎng)400nm替代405nm8．測(cè)定值由低到高變化；酶動(dòng)法測(cè)定可以持續(xù)60分鐘9．測(cè)定值吸光讀數(shù)越高，表明酶活性越高10．比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底11．待測(cè)樣本為核蛋白樣品，其蛋白濃度為50微克/20微升；待測(cè)樣本為組織裂解懸液，其蛋白濃度為200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）12．如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度13．沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為：在30℃，pH8.0條件下，每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對(duì)硝基苯酚所需的酶量作為一個(gè)活性單位14．本公司提供系列組蛋白脫乙?；笝z測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過(guò)SIRT1脫乙?；螅晃稽c(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類(lèi)共20多個(gè)蛋白：種類(lèi)I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類(lèi)II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類(lèi)的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類(lèi)III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱(chēng)為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴(lài)氨酸脫乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化賴(lài)氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來(lái)標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙酰化，Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長(zhǎng)405nm），由此來(lái)定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 兔骨成型蛋白7（BMP-7）elisa定量試劑盒說(shuō)明書(shū)

  兔骨成型蛋白7（BMP-7）elisa定量試劑盒說(shuō)明書(shū)l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中兔骨成型蛋白7（BMP-7）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被兔骨成型蛋白7（BMP-7）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔骨成型蛋白7（BMP-7）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本處理1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉?biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類(lèi)樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。7.建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過(guò)期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并得到直線(xiàn)回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測(cè)范圍：2.5pg/mL80pg/mL。2.靈敏度：Zdi檢測(cè)濃度小于0.1pg/mL。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說(shuō)明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別，如：檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到**的檢測(cè)結(jié)果。[詳細(xì)]

  2024-09-28 21:57

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 蛋白（肽段）定量的原理及安捷倫的解決方案

  本文詳細(xì)的介紹了蛋白（肽段）定量的意義及出現(xiàn) MRM 質(zhì)譜技術(shù)平臺(tái)的緣由、MRM 肽段定量的基本原理、安捷倫 MRM 肽段定量的完整定義以及安捷倫 LC/QQQ 肽段定量應(yīng)用實(shí)例等。[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:35

  應(yīng)用文章

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• 人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）說(shuō)明書(shū)

  本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）使用說(shuō)明書(shū)【試劑盒名稱(chēng)】人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）【試劑盒用途】定量檢測(cè)人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鈣聯(lián)蛋白（calnexin）的含量?！緳z測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）濃度呈正相關(guān)，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中人鈣聯(lián)蛋白（calnexin）含量?！驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說(shuō)明書(shū)1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個(gè)備注：標(biāo)準(zhǔn)品（1號(hào)→6號(hào)）濃度依次為：640、320、160、80、40、20ng/L【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先2加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對(duì)照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板）。6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板）。9、顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL，再加入顯色劑B液50μL，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s），37℃避光顯色15min。10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）。12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。Z終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒?！咀⒁馐马?xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為20-640ng/L，超過(guò)此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果（20-640ng/L范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過(guò)淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。9、底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。3【操作程序總結(jié)】準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計(jì)算【檢測(cè)范圍】20ng/L-640ng/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃，避光防潮保存。【有效期】6個(gè)月[詳細(xì)]

  2024-09-29 13:23

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 賽默飛提供數(shù)據(jù)非依賴(lài)采集DIA 解決方案

  隨著生命科學(xué)的快速發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)的關(guān)注焦點(diǎn)和研究趨勢(shì)已經(jīng)逐漸從定性轉(zhuǎn)向定量。定量蛋白質(zhì)組學(xué)是對(duì)細(xì)胞、組織乃至完整生物體的蛋白質(zhì)表達(dá)量及差異進(jìn)行分析，對(duì)于生物過(guò)程機(jī)理的探索和臨床診斷標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證具有重要意義?；陟o電場(chǎng)軌道阱Orbitrap的數(shù)據(jù)非依賴(lài)采集（DataIndependentAcquisition,DIA）是賽默飛為用戶(hù)帶來(lái)的一項(xiàng)全新的、全息式的質(zhì)譜技術(shù)。DIA將質(zhì)譜整個(gè)全掃描范圍分為若干個(gè)窗口，高速、循環(huán)地對(duì)每個(gè)窗口中的所有離子進(jìn)行選擇、碎裂、檢測(cè)，從而無(wú)遺漏、無(wú)差異地獲得樣本中所有離子的全部碎片信息（圖1）。[詳細(xì)]

  2018-08-10 10:58

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• 重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定

  重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定[詳細(xì)]

  2013-11-02 00:00

  選購(gòu)指南

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• 細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)

  要用途細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ劑存在下，受到PP1去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又稱(chēng)為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶，是7個(gè)主要絲/蘇氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成員之一，從酵母到人類(lèi)高度進(jìn)化保留。其參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞生理功能，包括糖原代謝、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、信號(hào)傳導(dǎo)、神經(jīng)元功能、轉(zhuǎn)錄、翻譯等，以及與HIV-1轉(zhuǎn)錄過(guò)程的調(diào)節(jié)，并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關(guān)。PP1分子結(jié)構(gòu)表面的3個(gè)凹槽及β12-β13Loop環(huán)結(jié)構(gòu)，是底物與YZ劑的結(jié)合部位；其催化亞體為37kd，調(diào)節(jié)亞體有2種：目標(biāo)亞體和YZ亞體?；谔禺愋缘孜锾窃姿峄竌，在PP2AYZ劑福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情況下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠（malachitegreen）染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長(zhǎng)）產(chǎn)生峰值的變化，由此測(cè)定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特異活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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