本文由 冠乾科技（上海）有限公司 整理匯編

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  2024-09-28 01:24

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  2015-04-10 00:00

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  2020-05-06 00:50

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  2024-09-18 18:09

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  2007-03-21 00:00

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  革蘭氏陰性細(xì)菌外膜囊泡制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途革蘭氏陰性細(xì)菌外膜囊泡制備試劑是一種旨在使用差速離心，分離并收集所有細(xì)胞外膜囊泡的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種革蘭氏陰性細(xì)菌外膜囊泡及其蛋白的純化。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，萃取產(chǎn)量和純度皆佳。技術(shù)背景外膜囊泡（outermembranevesicle；OMV）為含有周質(zhì)內(nèi)容物（包括外膜蛋白、DNA、RNA、脂多糖、脂質(zhì)、周質(zhì)蛋白、黏附素、免疫調(diào)節(jié)化合物等）的球形電子致密芽狀體（sphericalbud），細(xì)胞外間隔體，雙層磷脂，20至200納米大小，來自于革蘭氏陰性細(xì)菌周邊突起物的釋放形成或胞外分泌產(chǎn)物，使之與環(huán)境或宿主細(xì)胞進(jìn)行反應(yīng)，并調(diào)解各種功能，包括促進(jìn)病理形成，調(diào)節(jié)細(xì)菌互動(dòng)，轉(zhuǎn)運(yùn)各種信號(hào)分子（例如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、內(nèi)毒素、毒力因子等），保護(hù)細(xì)菌生存、結(jié)合和侵入，引起毒性，產(chǎn)生抗生素抗性等。外膜囊泡的產(chǎn)量取決于細(xì)菌生長周期、營養(yǎng)條件、溫度、氧化應(yīng)激狀態(tài)等。病原菌的外膜囊泡10倍于非病原菌體。外膜囊泡具有疫苗開發(fā)中免疫調(diào)節(jié)潛力。通過差速離心和蛋白酶YZ混合劑，獲得高純外膜囊泡，充分保留其蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。產(chǎn)品內(nèi)容保存液（ReagentA）毫升溶解液（ReagentB）毫升活性液（ReagentC）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存活性液（ReagentC）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器分光光度儀：用于測定細(xì)菌濃度臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作超速離心機(jī)：用于樣品操作恒溫?fù)u床：用于培養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞0.45微米濾膜：用于樣品操作真空濃縮裝置：用于樣品操作實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentC）從－20℃的冰箱里取出，置入冰槽里凍融，然后移出xx毫升溶解液（ReagentB）到1.5毫升離心管，加入xx微升活性液（ReagentC），充分混勻，置于冰槽里，標(biāo)記為溶解工作液。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好1毫升過夜培養(yǎng)的新鮮細(xì)菌樣品移取500微升到50毫升細(xì)菌培養(yǎng)液（注意：用戶可以進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，例如無鐵培養(yǎng)等）放進(jìn)37℃恒溫?fù)u床孵育過夜，速度為200RPM在分光光度儀上測OD600為1（1OD＝1X109細(xì)胞/毫升；總量為5X1010細(xì)胞）轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的50毫升錐形離心管放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心30分鐘，速度為5000g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟6和7一次使用0.45微米濾膜真空過濾一次（選擇步驟）使用100kD蛋白臨界點(diǎn)濃縮處理放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心3小時(shí)，速度為150000g小心抽去上清液加入xx微升預(yù)冷的保存液（ReagentA）或加入xx微升預(yù)冷的含有溶解液（ReagentB）和活性液（ReagentC）的溶解工作液用槍頭上下抽吸，充分混勻轉(zhuǎn)移到到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管即刻放進(jìn)－70℃冰箱里保存或置于冰冰槽里備用進(jìn)行后續(xù)蛋白定量、熒光定量或電鏡檢測等注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次（50毫升菌液）操作所有操作須在4℃狀態(tài)下進(jìn)行建議使用新鮮細(xì)菌接種，培養(yǎng)到指數(shù)生長階段為理想狀態(tài)活性液（ReagentC）避免反復(fù)凍融本產(chǎn)品按照50毫升培養(yǎng)菌液配制。如果操作不同菌液容量，可相應(yīng)調(diào)整試劑用量根據(jù)菌種不同，50毫升（OD600＝1）菌液可獲得5至100微克外膜囊泡蛋白制備產(chǎn)物如果放在－70℃冰箱里儲(chǔ)存?zhèn)溆?，?yán)格避免反復(fù)凍融本公司提供系列細(xì)菌試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染[詳細(xì)]

  2024-10-09 07:55

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• mdea脫碳液的泡高和消泡時(shí)間測定

  HSY-6538A MDEA溶液泡沫趨勢試驗(yàn)器（4孔） HSY-6538 MDEA溶液起泡趨勢試驗(yàn)器（2孔） 本儀器用于按SY/T6538規(guī)定的要求，測定配方型選擇性脫硫溶劑在氮?dú)庖?guī)定條件下通過一定體積的試樣，測定溶液泡沫高度和穩(wěn)定性。 測試原理：氮?dú)庠谝?guī)定的條件下通過一定體積的試樣，測定溶液泡沫高度和穩(wěn)定性。 操作步驟： 1、打開恒溫水浴，控制水浴溫度在30℃±0.1℃。 2、將脫硫溶劑配成40%（W）的水溶液。當(dāng)水浴達(dá)到預(yù)定溫度時(shí)，加入h1=100mm高的試樣于發(fā)泡管中，一并放入恒溫水浴，恒溫10min。 3、氮?dú)馔ㄟ^氣體流量計(jì)后經(jīng)過發(fā)泡管，流率達(dá)到 250mL/min 并穩(wěn)定后開始記時(shí)。通氣 5min,停止通氣，記錄泡沫高度 h2(液面Z終泡沫高度與初始溶液高度之差）及消泡時(shí)間（停氣后記時(shí)，泡沫剛剛破滅見到清液止）。[詳細(xì)]

  2024-09-28 22:45

  應(yīng)用文章

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• mdea脫碳液的泡高和消泡時(shí)間測定

  本儀器用于按SY/T6538規(guī)定的要求，測定配方型選擇性脫硫溶劑在氮?dú)庖?guī)定條件下通過一定體積的試樣，測定溶液泡沫高度和穩(wěn)定性。 測試原理：氮?dú)庠谝?guī)定的條件下通過一定體積的試樣，測定溶液泡沫高度和穩(wěn)定性。[詳細(xì)]

  2024-09-29 06:10

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• Maya2000 Pro深紫外光譜探測范圍拓展至153 nm

  Maya2000 Pro深紫外光譜探測范圍拓展至153 nm[詳細(xì)]

  2016-07-25 00:00

  專利

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• 紅外光譜KBr壓片法鑒定藥物結(jié)構(gòu)

  紅外光譜KBr壓片法鑒定藥物結(jié)構(gòu)[詳細(xì)]

  2024-09-28 01:18

  產(chǎn)品樣冊

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• 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)試劑盒檢測說明

  磷酸化細(xì)胞外信號(hào)試劑盒檢測說明酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T5pmol/L-150pmol/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)水平。用純化的人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)，再與HRP標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（240pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120pmol/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pmol/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pmol/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15pmol/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5pmol/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)：計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-10-09 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 基于電子舌技術(shù)的泡囊草炮制前后味覺比較---日本INSENT電子舌

  摘要：目的：分析泡囊草炮制前后味覺的變化，為泡囊草炮制原理的研究提供依據(jù)。方法：通過電子舌技術(shù)分析泡囊草生品、牛奶制品及浸膏品的有效味覺指標(biāo)；采用主成分分析（PCA）方法研究泡囊草炮制前后各味覺的變化情況。結(jié)果：通過對泡囊草進(jìn)行測試發(fā)現(xiàn)，多個(gè)傳感器會(huì)對其具有明顯的應(yīng)答，本次測試的泡囊草生品和炮制品沒有咸味和酸味回味，除此以外其他味覺指標(biāo)均是其有效的味覺指標(biāo)。泡囊草樣品的澀味回味和苦味回味接近于無味點(diǎn)，可知該樣品的苦味和澀味的持久性不強(qiáng)，其中浸膏品的苦味回味和澀味回味是較強(qiáng)的；澀味是本次測試樣品突出的味覺指標(biāo)，其中浸膏品的澀味較強(qiáng)，生品和牛奶制品澀味相近；苦味方面三個(gè)樣品也存在明顯的不同，其中牛奶制品的苦味較強(qiáng)，生品和浸膏品苦味接近；鮮味和豐富性方面，浸膏品的鮮味和豐富性是較強(qiáng)的，生品的鮮味與浸膏品接近，但豐富性要弱于浸膏品，牛奶制品的鮮味和豐富性均Z小。結(jié)論：電子舌能夠?qū)ε菽也莸挠行队X進(jìn)行準(zhǔn)確辨識(shí)，泡囊草炮制前后味覺的改變與功效之間存在一定的內(nèi)在聯(lián)系。 關(guān)鍵詞：泡囊草;炮制品;電子舌;味覺;炮制原理;[詳細(xì)]

  2024-09-13 14:46

  期刊論文

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• 鼓泡塔反應(yīng)器的特點(diǎn)結(jié)構(gòu)化工原理實(shí)驗(yàn)裝置

  鼓泡塔反應(yīng)器的特點(diǎn)結(jié)構(gòu)化工原理實(shí)驗(yàn)裝置[詳細(xì)]

  2016-06-02 00:00

  安裝說明

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• 納米傅利葉紅外光譜及成像系統(tǒng)NanoIR3_cn_爾迪儀器

  bruker納米傅利葉紅外光譜及成像系統(tǒng)NanoIR3產(chǎn)品資料_cn_爾迪儀器[詳細(xì)]

  2024-09-15 15:55

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 納米和微結(jié)構(gòu)光學(xué)薄膜的解決方案

  納米和微結(jié)構(gòu)光學(xué)薄膜的解決方案[詳細(xì)]

  2024-09-12 15:58

  產(chǎn)品樣冊

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• 固體混合物的分離和紅外光譜鑒定

  固體混合物的分離和紅外光譜鑒定[詳細(xì)]

  2016-03-10 00:00

  課件

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