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瑞士步琪關(guān)于蛋白質(zhì)和三聚氰胺測定方法
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本文由 步琦實(shí)驗(yàn)室設(shè)備貿(mào)易(上海)有限公司 整理匯編
2024-09-12 21:51 491閱讀次數(shù)
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瑞士步琪關(guān)于蛋白質(zhì)和三聚氰胺測定方法
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瑞士步琪關(guān)于蛋白質(zhì)和三聚氰胺測定方法
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2024-09-12 21:51
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- 蛋白質(zhì)溶液濃度測定方法蛋白質(zhì)溶液濃度測定方法有多種,下述幾種方法可供選用。蛋白質(zhì)濃度的測定,往往用于計(jì)算純化方法的回收率的重要方法。一、雙縮脲法雙縮脲法是**個用比色法測定蛋白質(zhì)濃度的方法,至令仍廣泛采用。在需要快速,但不很準(zhǔn)確的測定中,常用此法。硫銨不干擾顯色,這對蛋白質(zhì)提純的早期價段是非常有利的。雙縮脲法的原理是Cu2+與蛋白質(zhì)的肽鍵,以及酪氨酸殘基絡(luò)合,形成紫藍(lán)色絡(luò)合物,此物在540nm波長處有Zda吸收。雙縮脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白質(zhì)溶液測定。干擾物有硫醇,以及具有肽性質(zhì)緩沖液,如Tris、Good緩沖液等??捎贸恋矸ǔジ蓴_物,即用等體積10%冷的三氯醋酸沉淀蛋白質(zhì),然后棄去上清液,再用已知體積的1mNaOH溶解沉淀的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量測定。二、Lowry法此法是雙縮脲法的進(jìn)一步發(fā)展。他的**步就是雙縮脲反應(yīng),即Cu++與蛋白質(zhì)在堿性溶液中形成絡(luò)合物,然后這個絡(luò)合物還原磷鉬磷-磷鎢酸試劑(福林-酚試劑),結(jié)果得到深藍(lán)色物。此法比雙縮脲法靈敏得多,適合于測定20mg/L~400mg/L含量的蛋白質(zhì)溶液。其干擾物質(zhì)與雙縮脲法相同,而且受他們的影響更大,硫醇和許多其他物質(zhì)的存在會使結(jié)果嚴(yán)重偏差。另外要注意的是,加入福林試劑時要特別小心,試劑只在酸性pH環(huán)境中才穩(wěn)定,上述提到的還原反應(yīng)只有在pH10時才發(fā)生,因此,福林試劑加入到堿性的Cu2+-蛋白質(zhì)溶液中時,必須立刻攪拌,以使磷鉬酸-磷鎢酸試劑在未被破壞之前能有效地被Cu2+-蛋白質(zhì)絡(luò)合物所還原。三、紫外吸收法大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm波長處有特征的Zda吸收,這是由于蛋白質(zhì)中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在的緣故,因此,利用這個特異性吸收,可以計(jì)算蛋白質(zhì)的含量。如果沒有干擾物質(zhì)的存在,在280nm處的吸收可用于測定0.1~0.5mg/ml含量的蛋白質(zhì)溶液。部分純化的蛋白質(zhì)常含有核酸,核酸在260nm波長處有Zda吸收。有核酸時,所測得的蛋白質(zhì)濃度必須作適當(dāng)校正,一般按下述公式粗略計(jì)算:是蛋白質(zhì)溶液在280nm波長處(光程1厘米)測得的光密度值。是蛋白質(zhì)溶液在260nm小波長處(光程1厘米)處所測得的光密度值。此方程是從烯醇酶(在酵母核酸存在時)得出來的。因此,對其他蛋白質(zhì)和其他核酸不一定適用。由于各種蛋白質(zhì)所含芳香族氨基酸的量不同,因此,濃度為0.1%的各種蛋白質(zhì)在280nm處的消光系數(shù)()在0.5~2.5之間變化。所有的蛋白質(zhì)在230nm以下都有強(qiáng)吸收。例如,牛血清白蛋白的α0.1%在225nm和215nm處分別為5.0和11.7,而在280nm處測為0.58。在230nm以下的強(qiáng)吸收是由于肽鍵的存在,因此,此值對所有的蛋白質(zhì)都是一樣的。從215nm和225nm處的光密度之差可用于測定濃度為10μl/ml~100μl/ml的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)濃度可以近似地由下式得到:光密度之差求得,這一公式是減去溶液中非蛋白質(zhì)成分產(chǎn)生的誤差。但是,蛋白質(zhì)之間的分子量差異比較大,因此,在比較幾種蛋白質(zhì)含量時,必須作適當(dāng)?shù)男U?。由于蛋白質(zhì)的吸收峰常因pH改變而變化,所以在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時,必須與樣品條件一致。相關(guān)產(chǎn)品如下:聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-6485566518018609966傳真:021-54261506郵編:200233地址:上海市欽江路15號14層郵箱:solarbio@126.com網(wǎng)址:www.shsolarbio.com優(yōu)質(zhì)試劑質(zhì)量放心價格Zdi為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)蛋白濃度測定相關(guān)產(chǎn)品特價促銷索寶特價另有其他常用生化試劑歡迎詢問【021-54100800】[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
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2011-08-05 00:00
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2016-10-20 10:02
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2011-09-15 00:00
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2011-09-06 00:00
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2024-09-28 22:07
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關(guān)于瑞士BIAX電動工具
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2018-10-26 10:00
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玉米粉蛋白質(zhì)的測定方法
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2024-09-20 03:51
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2016-10-20 10:02
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2011-09-18 00:00
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瑞士步琦熔點(diǎn)儀M-560/M-565樣本
- 瑞士步琦熔點(diǎn)儀M-560/M-565樣本[詳細(xì)]
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2024-10-03 08:25
其它
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關(guān)于絕緣油水含量測定方法和相關(guān)儀器
- 一標(biāo)準(zhǔn)介紹: 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用卡爾費(fèi)休試劑作為滴定劑,用雙鉑電極指示滴定的終點(diǎn)來測定絕緣油中的水含量?! ”緲?biāo)準(zhǔn)適用于水含量小于200ppm的絕緣油。對于高粘度油和硅酮化合物的水含量可用附錄A中替換的溶劑系統(tǒng)進(jìn)行測定。有些化合物如酚類、醛類化合物在滴定時能造成終點(diǎn)漂移,可用替換溶劑系統(tǒng)或其他滴定方法進(jìn)行校正。 二所需輔助材料和試劑: 1.變色硅膠?! ?.分子篩:3A或,球型。 3.真空硅脂。 4.碘:分析純?! ?.吡啶:分析純?! ?.無水甲醇:分析純?! ?.:分析純。 8.無水乙醇:分析純。 9.硫酸:化學(xué)純。 10.蒸餾水或去離了水?! ?1.二氧化硫:鋼瓶裝或自制?! ∽?二氧化硫的制備:將亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉240g加人到2L圓底燒瓶中,滴加硫酸制取二氧化硫氣體。使用前需經(jīng)硫酸干燥。 注意:本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑大多有毒,有腐蝕性,攝人人體內(nèi)對健康有害,應(yīng)注意避免皮膚直接接觸及吸人體內(nèi)?! ∧壳瓣P(guān)于卡爾費(fèi)休試劑的制備已經(jīng)基本上不需要現(xiàn)場完成了,市面上有很多種類可供選擇,用戶可根據(jù)需要直接選購! 三相關(guān)儀器: 容量法手動卡爾費(fèi)休水分測定儀:YT-11133石油產(chǎn)品微量水分測定儀 容量法自動卡爾費(fèi)休水分測定儀:水分測定儀YT-11133F 電量法自動卡爾費(fèi)休水分測定儀:YT-11133B全自動微量水分測定儀[詳細(xì)]
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2018-08-20 10:00
產(chǎn)品樣冊
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奶粉中三聚氰胺的測定方法
- 奶粉中三聚氰胺的測定方法[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:31
操作手冊
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食品中蛋白質(zhì)的測定方法
- 食品中蛋白質(zhì)的測定方法[詳細(xì)]
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2008-06-17 00:00
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牛奶蛋白質(zhì)的測定方法優(yōu)化
- 牛奶蛋白質(zhì)的測定方法優(yōu)化[詳細(xì)]
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2014-11-13 00:00
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