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次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書

本文由 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 整理匯編

2018-10-09 10:00 270閱讀次數(shù)

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次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlST1人基質(zhì)裂解素規(guī)格:48T/96TMAT人基質(zhì)裂解蛋白規(guī)格:48T/96TTIMP-1人基質(zhì)金屬蛋白酶組織YZ因子1規(guī)格:48T/96TTIMP-4人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子4規(guī)格:48T/96TTIMP-3人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子3規(guī)格:48T/96TTIMP-2人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子2規(guī)格:48T/96TTIMP-1人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1規(guī)格:48T/96TMMP-9/GelatinaseB人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B規(guī)格:48T/96TMMP-8人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶規(guī)格:48T/96TMMP-7人基質(zhì)金屬蛋白酶7規(guī)格:48T/96TMMP-5人基質(zhì)金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96TMMP-4人基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96TMMP-3人基質(zhì)金屬蛋白酶3規(guī)格:48T/96TMMP-2人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A規(guī)格:48T/96TMMP-13人基質(zhì)金屬蛋白酶13規(guī)格:48T/96TMMP11人基質(zhì)金屬蛋白酶11規(guī)格:48T/96TMMP-10人基質(zhì)金屬蛋白酶10規(guī)格:48T/96TMMP-1人基質(zhì)金屬蛋白酶1規(guī)格:48T/96TMGP人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白規(guī)格:48T/96Tlumican人基膜聚糖規(guī)格:48T/96TMSTN人肌抑素規(guī)格:48T/96Tdystrophin人肌養(yǎng)蛋白規(guī)格:48T/96TMYOG人肌細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96TCK-MB人肌酸激酶同工酶MB規(guī)格:48T/96TCK-MB人肌酸激酶同工酶MB規(guī)格:48T/96TCK人肌酸激酶規(guī)格:48T/96TMHC人肌球蛋白重鏈規(guī)格:48T/96TMLCK人肌球蛋白輕鏈激酶規(guī)格:48T/96TMLC人肌球蛋白輕鏈規(guī)格:48T/96TMyosin人肌球蛋白規(guī)格:48T/96TTN-R人肌腱蛋白R(shí)規(guī)格:48T/96TTN-R人肌腱蛋白R(shí)規(guī)格:48T/96TMYO/MB人肌紅蛋白規(guī)格:48T/96TMYO/MB人肌紅蛋白規(guī)格:48T/96TTn-Ⅰ人肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TFⅫa人活化凝血因子Ⅻ規(guī)格:48T/96TAPCR人活化蛋白C抵抗素規(guī)格:48T/96TAPC人活化蛋白C規(guī)格:48T/96TLHRH人黃體生成素釋放激素規(guī)格:48T/96TcAMP人環(huán)磷酸腺苷規(guī)格:48T/96TcGMP人環(huán)磷酸鳥苷規(guī)格:48T/96TCOX-2人環(huán)加氧酶2規(guī)格:48T/96TCsA人環(huán)孢素A規(guī)格:48T/96Ttalin人踝蛋白規(guī)格:48T/96TALOX-5人花生四烯酸5脂加氧酶規(guī)格:48T/96TAA人花生四烯酸規(guī)格:48T/96TEPOR人紅細(xì)胞生成素受體規(guī)格:48T/96TEPO人紅細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96TEMP人紅細(xì)胞膜蛋白規(guī)格:48T/96TESF人紅細(xì)胞刺激因子規(guī)格:48T/96TsmActinin-α人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α規(guī)格:48T/96TMLZE人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子規(guī)格:48T/96TMCAb人黑色素細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TMSH人黑色素細(xì)胞刺激素規(guī)格:48T/96TMMSAM人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子規(guī)格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96TMART/Melan-A人黑色素瘤標(biāo)記物規(guī)格:48T/96TNF-κBp65人核因子-κB亞基p65親和肽規(guī)格:48T/96TRANKL人核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96TRNASE人核糖核酸酶規(guī)格:48T/96TAg-NORs人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白規(guī)格:48T/96TNMP-22人核基質(zhì)蛋白22規(guī)格:48T/96TLPO人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶規(guī)格:48T/96TPPAR-γ人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96TPPARs人過氧化物酶體增殖因子活化受體規(guī)格:48T/96TPPAR-α人過氧化物酶體增殖物激活受體α規(guī)格:48T/96TC4a人過敏毒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