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人抗核抗體(ANA)檢測試劑盒
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本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2024-09-28 00:19 169閱讀次數(shù)
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人抗核抗體(ANA)檢測試劑盒
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人抗核抗體(ANA)檢測試劑盒
- 人抗核抗體(ANA)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:19
課件
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小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒
- 小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-18 18:09
安裝說明
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人抗核仁抗體(ANA)檢測試劑盒
- 人抗核仁抗體(ANA)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-11 00:00
操作手冊
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人抗中性粒細胞抗體(ANA)檢測試劑盒
- 人抗中性粒細胞抗體(ANA)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-11 00:00
標準
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小鼠抗核抗體(ANA)定量EIA試劑盒使用說明
- 小鼠抗核抗體(ANA)定量EIA試劑盒使用說明原理本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠ANA單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的ANA與單抗結(jié)合,加入酶標抗體,形成免疫復合物連接在板上,加入酶底物TMB,出現(xiàn)藍色,加終止液,顏色變黃,在450nm處測OD值,ANA濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中ANA濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體稀釋液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):500ng2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml酶標抗體濃縮液(100X)120ul終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液作1:10稀釋(取20ul,加標本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入1000ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.酶標抗體濃縮液用酶標抗體稀釋液作1:100倍稀釋(示例:10ul濃縮液+990ul稀釋水)。5.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。。3.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。6.每孔加入100ul終止液混勻。7.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應ANA含量,再乘上稀釋倍數(shù)10即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的ANA檢測濃度小于4ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠ANA。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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小鼠抗核抗體(ANA)elisa試劑盒使用說明書
- 小鼠抗核抗體(ANA)elisa試劑盒使用說明書[詳細]
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2024-09-24 02:26
選購指南
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人抗核糖體抗體(ANA )試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T4ng/L-120ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗核糖體抗體(ANA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗核糖體抗體(ANA)水平。用純化的人核糖體抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核糖體抗體(ANA),再與HRP標記的核糖體抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗核糖體抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗核糖體抗體(ANA)濃度。試劑盒組成[詳細]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠抗核抗體(ANA)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說明書
- 實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中大鼠抗核抗體(ANA)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入抗核抗體(ANA),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗核抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠抗核抗體(ANA)濃度。[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA試劑盒
- 人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-16 00:00
應用文章
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人抗核糖體抗體(ANA) ELISA試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T4ng/L-120ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗核糖體抗體(ANA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗核糖體抗體(ANA)水平。用純化的人核糖體抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核糖體抗體(ANA),再與HRP標記的核糖體抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗核糖體抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗核糖體抗體(ANA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人抗核糖體抗體(ANA)ELISA試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T4ng/L-120ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗核糖體抗體(ANA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗核糖體抗體(ANA)水平。用純化的人核糖體抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核糖體抗體(ANA),再與HRP標記的核糖體抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗核糖體抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗核糖體抗體(ANA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠抗中性粒細胞抗體(ANA)試劑盒,ANA檢測說明書北京
- 本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷小鼠(Mouse)抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗中性粒細胞抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)檢測試劑盒
- 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-12 00:00
應用文章
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人抗核周因子抗體(APF)檢測試劑盒
- 人抗核周因子抗體(APF)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-12 00:00
選購指南
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人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)檢測試劑盒
- 人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-28 08:52
產(chǎn)品樣冊
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人抗核糖體抗體(ANA)酶聯(lián)免疫分析
- 人抗核糖體抗體(ANA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T4ng/L-120ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗核糖體抗體(ANA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗核糖體抗體(ANA)水平。用純化的人核糖體抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核糖體抗體(ANA),再與HRP標記的核糖體抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗核糖體抗體(ANA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗核糖體抗體(ANA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月聯(lián)系電話:021-60517348QQ:2675483613[詳細]
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2024-09-28 01:11
產(chǎn)品樣冊
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人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)檢測試劑盒
- 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-11 00:00
標準
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人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)檢測試劑盒
- 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-29 02:22
操作手冊
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現(xiàn)貨銷售人抗核抗體ELISA檢測試劑盒說明書
- 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:ANA試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ANA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將ANA和生物素標記的抗體同時溫育。人抗核抗體ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ANA的濃度呈比例關(guān)系。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,人抗核抗體ELISA檢測試劑盒避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),人抗核抗體ELISA檢測試劑盒相應的ANA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的ANA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-8.0IU/ml4、敏感度:0.01IU/mlRC037-20ugRecombinantHumanInterferon-α2b(rHuIFN-α2b)重組人干擾素α2b20ugRC038-2ugRecombinantHumanInterferon-β1b(rHuIFN-β1b)重組人干擾素β1b2ugRC039-20ugRecombinantHumanInterferon-γ(rHuIFN-γ)重組人干擾素γ20ugRC040-2ugRecombinantHumanGliaMaturationFactorbeta(rHuGMF-β)重組人神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子-β2ugCLS1085-200ml細胞分離液1.085200mlCLS1091-200ml細胞分離液1.091200mlCLS1100-200ml細胞分離液1.100200mlRC041-5ugRecombinantHumanCiliaryNeurotrophicFactor(rHuCNTF)重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子5ugRC042-20ugRecombinantHumanBrainNatriureticPeptide(rHuBNP)重組人腦鈉素20ug[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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特價銷售人抗核抗體ELISA檢測試劑盒說明書
- 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:ANA試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ANA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將ANA和生物素標記的抗體同時溫育。人抗核抗體ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ANA的濃度呈比例關(guān)系。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。人抗核抗體ELISA檢測試劑盒不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的ANA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的ANA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-8.0IU/ml4、敏感度:0.01IU/mlRC074-5ugRecombinantHumanFractalkine/CX3CL1(rHuFractalkine/CX3CL1)5ugRC075-2ugRecombinantHumanMCP-2/CCL8(rHuMCP-2/CCL8)2ugRC076-5ugRecombinantHumanMCP-4/CCL13人抗核抗體ELISA檢測試劑盒(rHuMCP-4/CCL13)5ugRC077-5ugRecombinantHumanMIP-5/CCL15(rHuMIP-5/CCL15)5ugRC078-5ugRecombinantHumanLEC/NCC-4(CCL16)(rHuLEC/NCC-4/CCL16)5ugRC079-2ugRecombinantHumanMIP-4/CCL18(rHuMIP-4/CCL18)2ugRC080-5ugRecombinantHumanMIP-3alpha/CCL20(rHuMIP-3a/CCL20)5ug[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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