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光譜干擾問(wèn)題分析
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本文由 東莞市譜標(biāo)實(shí)驗(yàn)器材科技有限公司 整理匯編
2013-10-31 00:00 228閱讀次數(shù)
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光譜干擾問(wèn)題分析
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光譜干擾問(wèn)題分析
- 光譜干擾問(wèn)題分析[詳細(xì)]
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2013-10-31 00:00
其它
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XRF分析中鉛元素的光譜干擾
- XOS軟件旨在對(duì)樣品的基體效應(yīng)做出準(zhǔn)確響應(yīng)。然而,和任何分析技術(shù)一樣,總有一些樣品對(duì)XRF來(lái)說(shuō)具有特別的挑戰(zhàn)性,一般是由于材料的密度和/或元素的組成。本文件討論了光譜干擾的一般成因,對(duì)涉及到檢測(cè)和定量測(cè)量各種均勻樣品基體中鉛(Pb)含量時(shí)所碰到的常見(jiàn)問(wèn)題做出了回答。是什么原因?qū)е裸U的測(cè)量濃度偏高和檢測(cè)限(LOD)的增加?在塑料基底中是否有內(nèi)在的鉛干擾因素?在金屬基底中是否有內(nèi)在的鉛干擾因素?[詳細(xì)]
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2018-08-28 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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利用通用池技術(shù)消除光譜干擾
- 本工作將專注于證明在反應(yīng)模式SP-ICP-MS下,NexION通用池技術(shù)應(yīng)用于測(cè)定納米粒子。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 問(wèn)題分析 解決方法
- 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 問(wèn)題分析 解決方法[詳細(xì)]
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2012-12-13 00:00
安裝說(shuō)明
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分析球磨機(jī)的節(jié)能降耗問(wèn)題
- 在我國(guó)的主要工業(yè)企業(yè)中,球磨機(jī)屬于一種非常重要的工業(yè)設(shè)備,特別是在選礦企業(yè)中,作用更是舉足輕重。球磨機(jī)屬于一種高能耗的設(shè)備,因此有效的節(jié)約能耗是球磨機(jī)繼續(xù)發(fā)展和創(chuàng)新的途徑之一,同時(shí)也是選礦企業(yè)追求更GX益的途徑之一。文章針對(duì)球磨機(jī)的節(jié)能降耗問(wèn)題進(jìn)行詳細(xì)的分析和論述,希望通過(guò)文章的分析和論述,能夠更好的推動(dòng)我國(guó)的球磨機(jī)設(shè)備的節(jié)能降耗工作的進(jìn)行,為我國(guó)的選礦企業(yè)的進(jìn)一步節(jié)約能源貢獻(xiàn)力量。[詳細(xì)]
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2018-09-11 11:42
標(biāo)準(zhǔn)
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球磨機(jī)的應(yīng)用問(wèn)題分析
- 本文主要針對(duì)球磨機(jī)設(shè)備進(jìn)行了分析,并針對(duì)其作業(yè)原理以及運(yùn)行過(guò)程中容易出現(xiàn)的一些問(wèn)題展開(kāi)了探討,為球磨機(jī)設(shè)備的發(fā)展提供了具有參考價(jià)值的研究結(jié)果。[詳細(xì)]
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2018-09-11 11:50
標(biāo)準(zhǔn)
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毛細(xì)管分析的常見(jiàn)9個(gè)問(wèn)題
- 毛細(xì)管分析的常見(jiàn)9個(gè)問(wèn)題[詳細(xì)]
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2010-04-20 00:00
安裝說(shuō)明
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ELISA實(shí)驗(yàn)原理、步驟、問(wèn)題分析
- 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬elisa試劑盒,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對(duì)試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問(wèn)題,我們無(wú)條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請(qǐng)來(lái)的咨詢:電話:021-6052049813636351217業(yè)務(wù)QQ:1005074258何經(jīng)理ELISA實(shí)驗(yàn)原理、步驟、ELISA問(wèn)題分析ELISA實(shí)驗(yàn)原理酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度類型及步驟ELISA的主要常用類型及步驟1.間接法測(cè)抗體間接法是檢測(cè)抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。2)加稀釋的樣本,保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,樣本中的其他成份在洗滌過(guò)程中被洗去。3)加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合,從而間接記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。4)加底物顯色。2.雙抗體夾心法測(cè)抗原雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原Z常用的方法,操作步驟如下:1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2)加受檢樣本,保溫反應(yīng)。樣本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與樣本中受檢抗原的量相關(guān)。4)加底物顯色。3.雙抗原夾心法測(cè)抗體反應(yīng)原理和模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體4.競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,Z后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。ELISAQ&A如何選擇合適的陽(yáng)性對(duì)照?陽(yáng)性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成一致,一般陽(yáng)性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì),加入一定量的待檢物質(zhì)。比如,以人血清為標(biāo)本的測(cè)定,陽(yáng)性對(duì)照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。如何選擇合適的陰性對(duì)照?陰性對(duì)照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成一致,**先行檢測(cè)確定其中不含待檢物質(zhì)。比如,檢測(cè)人血清標(biāo)本時(shí),陰性對(duì)照應(yīng)該選擇正常人血清;檢測(cè)免疫動(dòng)物血清中抗體效價(jià)時(shí),陰性對(duì)照應(yīng)該選擇該動(dòng)物的免疫前血清。如何選擇Zyou化的包被條件?1.包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過(guò)特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。2.包被液的選擇一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。3.包被溫度的選擇通常是4-8度條件下過(guò)夜或者37度保溫2小時(shí),我們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。4.包被濃度的選擇包被的Z適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對(duì)特定包被抗原的Z適包被濃度需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?封閉是否必要,取決于ELISA的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。一般說(shuō)來(lái),雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌徹底,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測(cè)定中,封閉一般是必不可少的。常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明膠、5%的脫脂奶粉,AbMART推薦使用5%脫脂奶粉,價(jià)廉而且封閉能力強(qiáng),不過(guò)5%脫脂奶粉只適合短期內(nèi)使用,不宜長(zhǎng)期保存,所以試劑盒中較少使用。如何正確使用酶結(jié)合物?1.酶結(jié)合物的稀釋液在稀釋液中常加入高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉),通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)YZ酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。一般還加入能夠YZ蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜)。2.正確稀釋酶結(jié)合物酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定,濃度過(guò)高易導(dǎo)致本底偏高,濃度過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致陽(yáng)性信號(hào)的減弱。酶結(jié)合物**在使用前稀釋,稀釋后的酶結(jié)合物不宜長(zhǎng)期保存,因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活。問(wèn)題可能的原因解決方法陰性對(duì)照產(chǎn)生了陽(yáng)性的結(jié)果試劑或者耗材污染更換試劑,使用一次性耗材洗板出現(xiàn)問(wèn)題更換更強(qiáng)配方的洗滌液,增加洗板次數(shù),延長(zhǎng)洗板時(shí)間如果是在雙抗體夾心法中出現(xiàn),有可能是包被抗體與二抗間有交叉反應(yīng)更換包被抗體或二抗使用了過(guò)多的抗體減少抗體使用量整板出現(xiàn)高背景二抗產(chǎn)生了非特異性吸附減少二抗使用量,縮短二抗反應(yīng)時(shí)間顯色液不新鮮使用現(xiàn)配的顯色液顯色反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)沒(méi)有終止控制顯色反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)終止反應(yīng)試劑或者耗材污染更換試劑,使用一次性耗材反應(yīng)溫度過(guò)高導(dǎo)致的非特異性吸附嚴(yán)格控制反應(yīng)在Z適溫度下進(jìn)行封閉條件不佳導(dǎo)致的非特異性吸附更換封閉能力更強(qiáng)的封閉液,延長(zhǎng)封閉時(shí)間反應(yīng)信號(hào)偏低包被條件不合適提高包板濃度,延長(zhǎng)包板時(shí)間抗原抗體反應(yīng)不夠充分延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,確保反應(yīng)在Z適溫度下進(jìn)行顯色液配方不恰當(dāng)增加顯色底物的量二抗結(jié)合不夠提高二抗?jié)舛?,延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,更換效果更好的二抗梯度稀釋做ELISA時(shí)產(chǎn)生跳孔現(xiàn)象酶標(biāo)板疊放導(dǎo)致傳熱不均勻,各孔反應(yīng)溫度有差異盡量避免酶標(biāo)板疊放在一起移液器稀釋時(shí)未能保持連續(xù)性定期校準(zhǔn)移液器,確保移液器的正確使用反應(yīng)溶液蒸發(fā)酶標(biāo)板用封條密封或者加蓋洗板不均勻確定洗板機(jī)能夠正常工作酶標(biāo)板底有雜物或者水珠讀板時(shí)清理干凈酶標(biāo)板底部[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
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2015-03-31 00:00
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- 根據(jù)千分尺的檢定規(guī)程,對(duì)檢定中出現(xiàn)的不合格項(xiàng)和實(shí)際使用中遇到的問(wèn)題進(jìn)行分析,提供相應(yīng)的修理方法,提高千分尺的示值極ng確度,以滿足檢定要求。[詳細(xì)]
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2024-09-14 00:03
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2011-07-21 00:00
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細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題
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2018-09-02 10:00
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- 分析生物安全柜在實(shí)際使用中存在問(wèn)題和解決方法[詳細(xì)]
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2024-09-28 09:49
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吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題34到38
- 吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題34到38[詳細(xì)]
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2010-01-25 00:00
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吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題十一到十七
- 吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題十一到十七[詳細(xì)]
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2010-01-19 00:00
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吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題五到七
- 吸附解析進(jìn)樣技術(shù)GC分析中的問(wèn)題100答 問(wèn)題五到七[詳細(xì)]
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2010-01-15 00:00
安裝說(shuō)明
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單顆粒ICP-MS測(cè)定鐵納米粒子:利用通用池技術(shù)消除光譜干擾
- 隨著納米顆粒興趣的增加,各種測(cè)試方法正被應(yīng)用。采用單顆粒模式電感耦合等離子體質(zhì)譜法(SP-ICP-MS)分析金屬納米粒子成為Z有前途的技術(shù)之一。由于其高靈敏度、易用性和分析速度快等特點(diǎn),ICP-MS是一種理想的技術(shù),用于檢測(cè)納米顆粒的特性:無(wú)機(jī)成分、濃度、尺寸大小、粒度分布和聚集等。ICP-MS分析挑戰(zhàn)之一為干擾導(dǎo)致錯(cuò)誤的分析結(jié)果。然而,這并非是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)槠駷橹勾蠖鄶?shù)SP-ICP-MS應(yīng)用均沒(méi)有涉及到基體干擾或常規(guī)光譜干擾問(wèn)題。例如,金和銀納米粒子在工業(yè)中應(yīng)用較廣,未受到常規(guī)干擾。另外,大多數(shù)納米顆粒存在簡(jiǎn)單基體中,該基體幾乎不產(chǎn)生干擾。隨著納米技術(shù)領(lǐng)域的拓展,分析需求增加,尤其是需要測(cè)定納米顆粒中受干擾的元素,如擴(kuò)展為其它受干擾的金屬納米粒子,如鈦,鉻,鋅或硅。例如,由于零價(jià)鐵納米(ZVI)顆粒具有獨(dú)特的化學(xué)特性和相對(duì)大的比表面積,使之更廣泛應(yīng)用于環(huán)境修復(fù)項(xiàng)目中。由于他們獨(dú)特的性質(zhì),ZVI納米粒子具有以下作用:去除有機(jī)溶劑中氯,轉(zhuǎn)化肥料中有害化合物,降解殺蟲劑和固定金屬。然而,為監(jiān)測(cè)ZVI顆粒,鐵需被測(cè)定,因?yàn)榇嬖诨诘入x子體產(chǎn)生的信號(hào)ArO+對(duì)同樣質(zhì)量數(shù)(56)鐵的Z高豐度同位素(56Fe+豐度91.72%)形成嚴(yán)重干擾。消除這種干擾的Z有效方式是采用氨氣作為反應(yīng)氣的反應(yīng)模式ICP-MS。至今為止,已有的大多數(shù)SP-ICP-MS報(bào)道聚焦于無(wú)干擾的納米粒子,而這種反應(yīng)模式SP-ICP-MS還未被廣泛使用。本工作將專注于證明在反應(yīng)模式SP-ICP-MS下,NexION通用池技術(shù)應(yīng)用于測(cè)定納米粒子。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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多重譜線擬合(MSF)扣除光譜干擾法在電感耦合等離子發(fā)射
- 多重譜線擬合(MSF)扣除光譜干擾法在電感耦合等離子發(fā)射[詳細(xì)]
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2007-01-08 00:00
報(bào)價(jià)單
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