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PEN3-基于電子鼻技術(shù)的魚露與魚釀醬油的品質(zhì)分析
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2018-08-16 10:00 786閱讀次數(shù)
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摘要通過電子鼻獲取魚露、魚釀醬油和生抽的氣味信息,進行主成分分析(PCA)、線性判別分析(LDA)和負(fù)荷加載分析(Loadings),并結(jié)合氨基酸態(tài)氮、鹽分、全氮和游離氨基酸含量,對比分析3種調(diào)味品的品質(zhì)。結(jié)果顯示,3種調(diào)味品中游離氨基酸種類豐富,魚露中蘇氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、賴氨酸的含量明顯高于魚釀醬油和生抽;生抽和魚釀醬油中鮮味氨基酸的含量明顯高于魚露,但生抽中必需氨基酸的含量遠低于魚釀醬油和魚露;3種調(diào)味品揮發(fā)性成分復(fù)雜,電子鼻10個金屬傳感器能很好地區(qū)分3種調(diào)味品的揮發(fā)性氣味,W5S、W1S、W2S號傳感器比其他7個傳感器有更高的響應(yīng)值,其中W2S號傳感器的響應(yīng)值變化Z顯著。這說明電子鼻能較好地區(qū)分魚露、魚釀醬油和生抽,雖然3種調(diào)味品中第1、2主成分相同,但醇類、氮氧化合物類物質(zhì)對第1、2主成分的貢獻率不同。
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PEN3-基于電子鼻技術(shù)的魚露與魚釀醬油的品質(zhì)分析
- 摘要通過電子鼻獲取魚露、魚釀醬油和生抽的氣味信息,進行主成分分析(PCA)、線性判別分析(LDA)和負(fù)荷加載分析(Loadings),并結(jié)合氨基酸態(tài)氮、鹽分、全氮和游離氨基酸含量,對比分析3種調(diào)味品的品質(zhì)。結(jié)果顯示,3種調(diào)味品中游離氨基酸種類豐富,魚露中蘇氨酸、甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、賴氨酸的含量明顯高于魚釀醬油和生抽;生抽和魚釀醬油中鮮味氨基酸的含量明顯高于魚露,但生抽中必需氨基酸的含量遠低于魚釀醬油和魚露;3種調(diào)味品揮發(fā)性成分復(fù)雜,電子鼻10個金屬傳感器能很好地區(qū)分3種調(diào)味品的揮發(fā)性氣味,W5S、W1S、W2S號傳感器比其他7個傳感器有更高的響應(yīng)值,其中W2S號傳感器的響應(yīng)值變化Z顯著。這說明電子鼻能較好地區(qū)分魚露、魚釀醬油和生抽,雖然3種調(diào)味品中第1、2主成分相同,但醇類、氮氧化合物類物質(zhì)對第1、2主成分的貢獻率不同。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-基于電子鼻的冷藏大菱鲆品質(zhì)變化研究
- 摘要利用電子鼻技術(shù)檢測不同貯藏溫度下大菱鲆樣品的揮發(fā)性氣體變化情況,對所得數(shù)據(jù)進行主成分分析(PCA)、載荷分析(LA)和聚類分析(CA),并結(jié)合細(xì)菌菌落總數(shù)和揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)含量變化進行分析,建立一種基于電子鼻的冷藏大菱鲆新鮮度判別方法。結(jié)果表明:電子鼻主成分分析、載荷分析和聚類分析能很好地區(qū)分大菱鲆0℃與4℃貯藏過程中的揮發(fā)性氣味變化,氣味發(fā)生變化的時間拐點分別是貯藏20d和16d;電子鼻分析結(jié)果與細(xì)菌菌落總數(shù)和TVB-N值變化預(yù)測的貨架期終點基本一致。因此電子鼻技術(shù)可以用來判別大菱鲆冷藏過程中的新鮮度變化。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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基于電子鼻技術(shù)的荊州魚糕貯藏過程新鮮度預(yù)測---德國AIRSENSE電子鼻
- 摘要:以荊州魚糕為研究對象,采用感官評定、揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)檢測和電子鼻技術(shù)分析不同貯藏條件下荊州魚糕的新鮮度變化,并基于電子鼻檢測數(shù)據(jù),結(jié)合主成分分析(PCA)、層次聚類分析(HCA)、偏Z小二乘判別分析(PLS-DA)和逐步多元線性回歸分析(Stepwise-MLR)建立魚糕新鮮度的判別和預(yù)測模型。結(jié)果表明:在4℃和室溫條件下,電子鼻響應(yīng)信號均能很好地區(qū)分魚糕樣品的新鮮度;魚糕貯藏過程中產(chǎn)生的氮氧化物、硫化物、甲烷等是新鮮度下降的重要指標(biāo);基于電子鼻檢測數(shù)據(jù)建立的多元線性回歸預(yù)測模型的R2均大于0.932 5,預(yù)測集樣品的預(yù)測均方根誤差均小于1.22,即電子鼻技術(shù)結(jié)合多元統(tǒng)計分析可作為一種無損、簡便和快速檢測魚糕新鮮度的方法。
關(guān)鍵詞:魚糕;貯藏;新鮮度;電子鼻技術(shù);[詳細(xì)]
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2023-03-13 11:36
期刊論文
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PEN3-基于電子鼻的蘋果低溫貯藏時間及品質(zhì)預(yù)測
- 【目的】研究利用電子鼻對蘋果低溫貯藏時間及品質(zhì)的預(yù)測效果,為蘋果低溫貯藏品質(zhì)的無損檢測及合理加工利用提供參考。【方法】以富士蘋果為試材,在(0±1)℃低溫條件下貯藏,分別在貯藏后的第0,30,60,90,120,150和180天,隨機選?。常皞€果實,利用PEN3型電子鼻檢測其香氣,并一一對應(yīng)測定蘋果的主要品質(zhì)指標(biāo)(硬度、可溶性固形物含量和可滴定酸含量)。利用載荷分析優(yōu)化電子鼻傳感器陣列,對優(yōu)化后的電子鼻檢測數(shù)據(jù)進行線性判別分析,建立蘋果低溫貯藏品質(zhì)的偏Z小二乘預(yù)測模型、BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預(yù)測模型和貯藏時間的多層感知器預(yù)測模型,并對預(yù)測效果進行了比較?!窘Y(jié)果】線性判別分析能夠較好地區(qū)分蘋果的貯藏品質(zhì),且蘋果香氣在貯藏60~90d時變化較大;建立的多層感知器神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型對蘋果貯藏時間有較好的預(yù)測效果,預(yù)測準(zhǔn)確率均>92.0%;利用偏Z小二乘法和BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)均能對果實的品質(zhì)建立有效的預(yù)測模型,其中偏Z小二乘法對冷藏蘋果硬度和可滴定酸含量的預(yù)測效果優(yōu)于對可溶性固形物含量的預(yù)測,利用BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)所建立預(yù)測模型的決定系數(shù)均>0.930 0,預(yù)測效果較偏Z小二乘法更好?!窘Y(jié)論】利用電子鼻的快速無損檢測功能可以實現(xiàn)對蘋果低溫貯藏時間及品質(zhì)的預(yù)測。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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測量淀粉對魚露屈服應(yīng)力的影響
- 測量淀粉對魚露屈服應(yīng)力的影響[詳細(xì)]
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2009-06-10 00:00
產(chǎn)品樣冊
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測定淀粉對魚露屈服應(yīng)力的影響
- 測定淀粉對魚露屈服應(yīng)力的影響[詳細(xì)]
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2007-07-23 00:00
專利
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電子鼻用于貯藏溫度對鮐魚品質(zhì)的影響研究
- 摘要:運用電子鼻檢測鮐魚的揮發(fā)性成分變化,并結(jié)合化學(xué)方法測定揮發(fā)性鹽基氮、組胺、pH值以及鮐魚質(zhì)構(gòu),綜合分析低值青皮紅肉魚-鮐魚在常溫、4℃和-20℃下新鮮度及品質(zhì)變化情況。結(jié)果表明,在常溫以及4℃貯藏條件下,電子鼻主成分分析(PCA)可以區(qū)分不同貯藏天數(shù)的鮐魚,而在-20℃,PCA的累積貢獻率只有74.77%,不能有效區(qū)分開。在常溫貯藏,TVB-N、組胺和pH值各項指標(biāo)檢測第1天,魚肉即開始發(fā)生腐敗;在4℃貯藏條件下,第4天開始即發(fā)生腐敗;在-20℃,鮮度品質(zhì)未發(fā)生大幅降低。隨著貯藏時間的延長,鮐魚各參數(shù)總體呈下降趨勢。在不同貯藏溫度下,TVB-N和組胺隨時間延長而增加,且兩者之間呈現(xiàn)正相關(guān)性。此外,質(zhì)構(gòu)測定結(jié)果表明低溫凍藏可以有效減少魚肉在貯藏過程中鮮度的降低程度。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-基于高光譜與電子鼻融合的番石榴機械損傷識別方法
- 摘要:提出了一種基于高光譜與電子鼻融合的水果機械損傷識別方法。分別采用高光譜儀與電子鼻對無損傷、輕度機械損傷和重度機械損傷的番石榴進行采樣,提取特征信息后,運用主成分分析(PCA)、線性判別分析(LDA)、歐氏距離分析(ED)和模糊C均值聚類(FCM)對高光譜儀、電子鼻以及高光譜與電子鼻融合3種識別方法的識別效果進行了對比。PCA和LDA的分析結(jié)果表明,高光譜與電子鼻識別番石榴機械損傷是可行的,但單獨采用這兩種識別方法均無法對番石榴機械損傷程度進行分級。采用高光譜與電子鼻融合方法,結(jié)合LDA分析可以較好地識別番石榴機械損傷程度,比單一識別方法具有更好的識別效果。此外,LDA比PCA對番石榴機械損傷識別效果更佳。根據(jù)PCA、LDA和ED分析結(jié)果可以推測多源信息融合的分類識別方法既可獲取更多的樣本信息,提高相同樣本之間的聚類性,又可較多地保持單一分類識別方法得到的不同樣本之間的Zda距離。根據(jù)FCM分析結(jié)果,高光譜識別、電子鼻識別和高光譜與電子鼻融合識別3種方法對番石榴機械損傷識別的正確率分別為89.74%、82.05%和97.44%,驗證了多源信息融合方法對提高水果機械損傷識別效果的可行性。關(guān)鍵詞:番石榴機械損傷多源信息融合高光譜電子鼻[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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基于電子鼻技術(shù)的不同品質(zhì)鹿茸飲片氣味特征分析-德國AIRSENSE電子鼻
- 摘要:目的:基于電子鼻技術(shù)對不同品質(zhì)鹿茸飲片氣味特征進行分析與表征。方法:采用PEN3型電子鼻系統(tǒng),分析22批鹿茸樣品的氣味特征,以對傳感器響應(yīng)值為指標(biāo),進行傳感器區(qū)別貢獻率分析(Loadings)、主成分分析(PCA)、線性判別分析(LDA)。結(jié)果:Loadings分析表明,5個傳感器對鹿茸飲片氣味特征具有較好的響應(yīng),不同規(guī)格鹿茸飲片氣味差異貢獻率主要體現(xiàn)為氮氧化物類、甲烷等短鏈烷烴、有機硫化物、醇醚醛酮類、芳香成分、無機硫化物等成分;PCA表明不同品種與規(guī)格鹿茸飲片,其氣味的差異性比較明顯;LDA發(fā)現(xiàn)不同品種及規(guī)格鹿茸飲片(除梅花鹿白片與粉片外)樣品的氣味差異均較明顯,表明構(gòu)成氣味的物質(zhì)存在差異性。結(jié)論:電子鼻技術(shù)可闡明不同品質(zhì)鹿茸飲片氣味的物質(zhì)基礎(chǔ);不同品質(zhì)鹿茸飲片氣味存在差異性可揭示鹿茸飲片氣味的科學(xué)內(nèi)涵并為其質(zhì)量控制提供參考。
關(guān)鍵詞:鹿茸飲片;氣味;電子鼻;[詳細(xì)]
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2024-06-28 16:02
期刊論文
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添加劑對魚糜品質(zhì)改善的解決方案
- 添加劑對魚糜品質(zhì)改善的解決方案[詳細(xì)]
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2024-09-29 00:07
期刊論文
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PEN3-基于電子鼻的果園荔枝成熟階段監(jiān)測
- 摘要:為了無損快速監(jiān)測荔枝成熟階段,該文提出了一種基于電子鼻技術(shù)的果園荔枝成熟階段監(jiān)測方法,采用PEN3電子鼻獲取掛果約25d到果實成熟過程中6個成熟階段荔枝樣本的仿生嗅覺信息并同步獲取了各成熟階段荔枝的3項物理特征(果實直徑、果實質(zhì)量與果實可溶性固形物含量)。根據(jù)不同成熟階段荔枝物理特征變化可知,荔枝果實直徑與果實質(zhì)量2項物理指標(biāo)在掛果約32d~39d,以及53d~60d增長較快,可溶性固形物含量在掛果約32d前無法測量,53d~60d階段增長速度較慢。提取各樣本電子鼻采樣數(shù)據(jù)75s時刻的各傳感器響應(yīng)值作為特征值后,采用載荷分析(loadings)進行傳感器陣列優(yōu)化,優(yōu)選了傳感器R2、R4、R6、R7、R8、R9和R10的響應(yīng)數(shù)據(jù)進行后續(xù)分析。將優(yōu)化后的傳感器響應(yīng)數(shù)據(jù)進行歸一化處理。采用線性判別分析(lineardiscriminantanalysis,LDA)進一步提取特征信息,降低數(shù)據(jù)中包含的冗余信息。LDA對荔枝成熟階段的分類識別效果不佳。為進一步探究電子鼻監(jiān)測果園荔枝成熟階段的可行性,采用模糊C均值聚類分析(fuzzyCmeansclustering,F(xiàn)CM)、kZ近鄰函數(shù)分析(knearestneior,KNN)和概率神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(probabilisticneuralnetwork,PNN)進行模式識別。研究結(jié)果表明,F(xiàn)CM對果園荔枝成熟階段識別的正確率為89.17%。采用KNN與PNN建立識別模型后,KNN與PNN識別模型對訓(xùn)練集的回判正確率均為1**%,對測試集的識別率均96.67%,具有較好的分類識別效果。試驗證明了采用電子鼻進行果園荔枝成熟度監(jiān)測的可行性,為果園水果品質(zhì)的實時監(jiān)測提供參考。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-基于電子鼻技術(shù)研究保鮮方法對鮮切菠蘿貯藏品質(zhì)的影響
- 摘要:采用三種保鮮方式對鮮切菠蘿進行處理(有機酸處理、漂燙處理、酸+漂燙綜合處理),通過電子鼻技術(shù)結(jié)合感官分析對鮮切菠蘿的貯藏品質(zhì)變化進行研究。感官評價結(jié)果表明:不同保鮮處理的效果從菠蘿貯藏中期(3~5d)開始出現(xiàn)差異性(p<0.05),酸結(jié)合漂燙處理在貯藏中后期(3~7d)分值較高,即酸結(jié)合漂燙處理能夠更好的保持鮮切菠蘿的貯藏品質(zhì);香氣損失的線性判別分析(LDA)分析表明,酸結(jié)合漂燙處理能夠有效延緩菠蘿香氣的損失;傳感器貢獻率分析(LA)表明,酸結(jié)合漂燙處理與對照組菠蘿香氣主要成分Z為接近??傮w來看,電子鼻分析結(jié)果與感官分析的結(jié)果基本一致,即電子鼻可用于快速評價菠蘿貯藏品質(zhì);酸結(jié)合漂燙處理能夠較好的保持菠蘿原有特征香氣及貯藏品質(zhì)。關(guān)鍵詞:電子鼻技術(shù),鮮切菠蘿,貯藏品質(zhì),快速檢測[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-海藻膠低聚寡糖對秘魯魷魚魚糜品質(zhì)特性的影響研究
- 摘要以秘魯魷魚(Perusquid)魚糜為研究對象,采用酶技術(shù)制備低聚糖,ZD評價聚合度為60008000Da的低聚寡糖對不同狀態(tài)下魚糜的品質(zhì)影響。結(jié)果表明:平均聚合度為60008000Da的海藻膠低聚寡糖不僅可以顯著提高蒸煮魚糜的出品率,而且對新鮮魚糜增重率提高影響也很大,并且對凍藏魚糜的解凍損失降低影響也有很顯著。研究表明經(jīng)過60008000Da的海藻膠低聚寡糖處理的魚糜品質(zhì)與常用的復(fù)合磷酸鹽處理效果無顯著性差異。采用60008000Da的海藻膠低聚寡糖處理的魷魚魚糜,肌肉組織硬度更低,魚糜彈性及咀嚼性更強,產(chǎn)品色澤更加鮮艷。并且利用60008000Da的海藻膠低聚寡糖浸泡處理對魚糜中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)并未產(chǎn)生明顯影響。該研究成果對開發(fā)一種安全GX的生物保水劑具有重要的意義,將為魚糜加工業(yè)的發(fā)展提供技術(shù)性的革命。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-一種基于電子鼻的辛味中藥材的分類鑒別方法研究
- 摘要:為獲取新的氣味識別方法以提高智能傳感器模式分類識別準(zhǔn)確率和速度,使用了內(nèi)置10個傳感器的便攜式電子鼻PEN3對辛味中藥材進行氣味采集檢測.將辛味中藥材在燒杯中進行密封靜置待其形成穩(wěn)定的氣味頂空環(huán)境時,運用電子鼻對其進行檢測采樣得到樣品高維氣味數(shù)據(jù)信息.與傳統(tǒng)的線性數(shù)據(jù)分析方法不同,針對氣味蘊含多種諸如濃度、各種揮發(fā)性物質(zhì)成分等特征,可知氣味非線性的本質(zhì)特征,在本次分析中采用了流形算法中的非線性的局部線性嵌入(LocallyLinearEmbedding,LLE)算法對非線性的氣味數(shù)據(jù)進行特征提取與降維,再采用基于Fisher的線性判別分析(LinearDiscriminantAnalysis,LDA)實現(xiàn)對特征子空間的模式聚類與分類,通過多次實驗優(yōu)化LLE算法的參數(shù),得到了**的辛味中藥材的模式識別效果.分析結(jié)果表明,運用LLE和LDA相結(jié)合的算法(即LLE_LDA)可以很好地完成不同種類辛味中藥材的揮發(fā)性氣味信息的模式分類,為深層次地分析基于電子鼻的氣味數(shù)據(jù)信息提供了一種新方法.關(guān)鍵詞:模式識別;氣敏傳感器;局部線性嵌入_線性判別分析;分類鑒別;非線性降維[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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不同植物油對金線魚魚糜凝膠風(fēng)味的影響---德國AIRSENSE電子鼻
- 摘要:為改善魚糜制品的風(fēng)味,比較添加6種植物油(2 mL/100 g的花生油、大豆油、玉米油、椰子油、橄欖油和紅花籽油)對金線魚魚糜凝膠氣味、揮發(fā)性化合物組成和感官特性的影響,探討植物油的種類對魚糜凝膠風(fēng)味的改善作用。結(jié)果表明,添加6種植物油均能改善金線魚魚糜凝膠的氣味,使魚糜凝膠中醛類、酮類和烴類等揮發(fā)性化合物的濃度增大,種類增多(P<0.05),其中添加椰子油的凝膠被檢出揮發(fā)性化合物的種類Z多為66種。添加椰子油的凝膠中,氣味活度值≥1的化合物高達10種,明顯多于對照組和添加其它植物油的凝膠(P<0.05),且其關(guān)鍵氣味成分主要是具有清新、椰子、果香等香味的2-庚酮、辛酸乙酯、2-十一酮、癸酸乙酯和丁位癸內(nèi)酯,它們共同作用形成了凝膠的風(fēng)味,提高了凝膠的總體可接受性,而添加其它植物油的凝膠中,關(guān)鍵氣味成分主要是己醛、1-辛烯-3-醇、辛醛、癸醛和正十一醛。綜上,添加植物油均能改善金線魚魚糜凝膠的風(fēng)味,且椰子油改善效果較佳,更適于開發(fā)風(fēng)味俱佳的魚糜制品。
關(guān)鍵詞:金線魚魚糜;植物油;關(guān)鍵氣味成分;風(fēng)味;感官特性;[詳細(xì)]
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2023-09-11 10:13
期刊論文
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基于電子鼻和HS-SPME-GC-MS技術(shù)分析陳釀容器對葡萄酒品質(zhì)的影響
- 摘要:以賀蘭山東麓‘赤霞珠’干紅葡萄酒為原料,采用不銹鋼罐、微氧罐、橡木桶進行陳釀處理,與原酒作為對照,以期探究不同容器陳釀對干紅葡萄酒基本理化指標(biāo)、香氣成分和感官特性的影響。[詳細(xì)]
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2026-01-26 11:06
期刊論文
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PEN3-基于電子鼻技術(shù)監(jiān)測羊奶發(fā)酵前后不同階段風(fēng)味的變化
- 摘要:本文利用電子鼻PEN3分析了羊奶發(fā)酵前后不同階段的風(fēng)味變化。結(jié)果表明,新鮮羊奶經(jīng)過發(fā)酵后,特征揮發(fā)性成分在電子鼻傳感器上的響應(yīng)由原來的傳感器6(甲烷)為主轉(zhuǎn)變成以傳感器7(充化氫)、傳感器9(有機芳香硫化物)和傳感器2(氮氧化合物)為主的揮發(fā)性物質(zhì),改變了羊奶的氣味。采用PCA及LDA分析發(fā)現(xiàn):PCA分析法能準(zhǔn)確區(qū)分羊奶發(fā)酵前后的不同階段,LDA體現(xiàn)出了發(fā)酵前后的不同階段揮發(fā)性成分明顯的變化趨勢,且變化趨勢與理論分析相符。[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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PEN3-基于電子鼻判別富士蘋果貨架期的研究
- 摘要:利用電子鼻對不同貨架期內(nèi)的富士蘋果揮發(fā)性成分進行檢測。通過雷達圖和負(fù)荷加載(Loadings)分析研究主要傳感器響應(yīng)值的變化,利用主成分分析(PCA)、線性判別分析(LDA)模式判別方法進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果表明,第7、8號傳感器在蘋果常溫貨架期判別中起主要作用,而第2、7號傳感器在蘋果貯后貨架期的判別中起主要作用。PCA、LDA方法均可準(zhǔn)確判別常溫不同貨架期的蘋果;與PCA相比,LDA方法可以更準(zhǔn)確對不同貯后貨架壽命蘋果進行判別,并呈現(xiàn)出良好的集中性和單向趨勢。因此,電子鼻快速判別不同貨架期的蘋果具有可行性。關(guān)鍵詞:電子鼻,蘋果,貨架期,判別[詳細(xì)]
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2018-08-16 10:00
產(chǎn)品樣冊
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基于電子鼻技術(shù)的金華火腿鑒別與分級
- 基于電子鼻技術(shù)的金華火腿鑒別與分級[詳細(xì)]
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2024-09-20 06:20
標(biāo)準(zhǔn)
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魚sbGnRH酶聯(lián)免疫分析
- 魚sbGnRH酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.8ng/L-24ng/L使用目的:本試劑盒用于測定魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中sbGnRH含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中魚sbGnRH水平。用純化的魚sbGnRH抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入sbGnRH,再與HRP標(biāo)記的sbGnRH抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的sbGnRH呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中魚sbGnRH濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。24ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-09-28 10:00
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