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使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus色譜柱分析合成多肽雜質(zhì)
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本文由 安捷倫科技(中國)有限公司 整理匯編
2020-05-08 14:54 365閱讀次數(shù)
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通常,使用 UV 檢測的多肽色譜分離是通過 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流動(dòng) 相完成,這種方法可以改善分離度,但同時(shí)會(huì)YZ質(zhì)譜 (MS) 信號(hào)。甲酸 (FA) 是用 于 MS 檢測的流動(dòng)相改性劑,但它可能會(huì)導(dǎo)致傳統(tǒng) C18 柱無法達(dá)到**分離效 果。本應(yīng)用簡報(bào)介紹了通過單一液相色譜方法,采用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色譜柱分離合成多肽雜質(zhì),并使用 UV 或 MS 進(jìn)行檢測。本方法使用 FA 作為流 動(dòng)相改性劑,可以提供足夠的分離度以鑒定并定量多肽雜質(zhì)。
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使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus色譜柱分析合成多肽雜質(zhì)
- 通常,使用 UV 檢測的多肽色譜分離是通過 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流動(dòng) 相完成,這種方法可以改善分離度,但同時(shí)會(huì)YZ質(zhì)譜 (MS) 信號(hào)。甲酸 (FA) 是用 于 MS 檢測的流動(dòng)相改性劑,但它可能會(huì)導(dǎo)致傳統(tǒng) C18 柱無法達(dá)到**分離效 果。本應(yīng)用簡報(bào)介紹了通過單一液相色譜方法,采用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色譜柱分離合成多肽雜質(zhì),并使用 UV 或 MS 進(jìn)行檢測。本方法使用 FA 作為流 動(dòng)相改性劑,可以提供足夠的分離度以鑒定并定量多肽雜質(zhì)。[詳細(xì)]
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2020-05-08 14:54
應(yīng)用文章
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大豆多肽(peptide)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 大豆多肽(peptide)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2ng/L-90ng/L使用目的:本試劑盒用于測定發(fā)酵豆粕樣本中大豆多肽(peptide)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大豆多肽(peptide)水平。用純化的大豆多肽(peptide)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大豆多肽(peptide),再與HRP標(biāo)記的大豆多肽(peptide)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大豆多肽(peptide)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大豆多肽(peptide)濃度。大豆多肽(peptide)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大豆多肽(peptide)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。大豆多肽(peptide)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬多肽YY(peptide YY)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 豬多肽YY(peptideYY)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中多肽YY(peptideYY)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬多肽YY(peptideYY)水平。用純化的豬多肽YY(peptideYY)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入多肽YY(peptideYY),再與HRP標(biāo)記的多肽YY(peptideYY)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多肽YY(peptideYY)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬多肽YY(peptideYY)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480pg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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CD8抗原(合成多肽)使用說明書
- 上海華壹生物科技有限公司供應(yīng)生化試劑產(chǎn)品、抗體抗原試劑、elisa檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫檢測試劑盒、培養(yǎng)基、對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)室耗材等產(chǎn)品,產(chǎn)品種類多,價(jià)格優(yōu)惠,為您提供Zyou質(zhì)的訂貨服務(wù)事宜,歡迎您咨詢訂購。公司網(wǎng)址:http://www.huayi-bio.comhttp://www.huayisw.net訂貨電話:021-24209192,021-24209195,13661674336相關(guān)抗原產(chǎn)品介紹:擬南芥ACA11蛋白多肽抗原/ACA11peptide植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)/AHA3peptide堿性成纖維細(xì)胞生長因子(多肽抗原)/bFGF血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原/ACE2(Angiotensinconvertingenzyme2)腦鈉素(多肽抗原)/BNP血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原/BNP/Biotin溴脫氧尿苷/BrdU(Bromodeoxyuridine)過敏毒素C5(補(bǔ)體C5)抗原/C5卵巢癌抗原/CA125細(xì)胞角蛋白19抗原/CK19激活的脫氧核糖核酸酶(抗原)/CAD(Caspase-ActivatedDeoxyribonuclease)Caspase肌紅蛋白抗原/MYOG鈣調(diào)節(jié)蛋白-1(抗原)/Calponin1軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原/COMP天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族(抗原)/Caspase-1(ICE;CASP-1;P45)Caspase-3(CPP32)半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(抗原)半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)/Caspase-6(NT)半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)/Caspase-6(CT)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原/phospho-AMPKalpha1(Thr172)peptaideCaspase-9白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)/Caspase-9神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原(人)/AD7C-NTP/NTP/AFpeptide半胱胺酸蛋白酶-10(抗原)/Caspase-10半胱胺酸蛋白酶蛋白-13(抗原)/Caspase-13CD19/CD19(B-lymphocyteantigenCD19)鹽酸克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA/ClenbuterolHydrochloride/BSA鹽酸克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白KLH/ClenbuterolHydrochloride/KLH雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白/Estradiol/BSA雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端)/DRADA/ADAR1(Double-strandedRNA-specificadenosinedeaminase)Nterminal雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原/DRADA/ADAR1(Double-strandedRNA-specificadenosinedeaminase)萊克多巴胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物/Ractopamine/BSA[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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使用 Agilent AssayMAP Bravo 和 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF 分析宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)
- 生物藥物(如單克隆抗體 (mAb))的使用正在快速增加。生物藥物為生物來源, 因此即使經(jīng)過多個(gè)純化步驟,Z終產(chǎn)品中仍然可能殘留一些低濃度宿主細(xì)胞 蛋白質(zhì) (HCP)。由于它們可能影響產(chǎn)品安全性和功效,因此根據(jù)法規(guī)要求必須對(duì)藥 品中的 HCP 濃度進(jìn)行監(jiān)測和控制1 。傳統(tǒng)上,酶聯(lián)免疫吸附測定法 (ELISA) 是定量 分析蛋白質(zhì)ZL藥物中 HCP 的標(biāo)準(zhǔn)方法。然而,ELISA 的特異性和覆蓋率不足以鑒 定并定量分析各種 HCP。因此,LC/MS 技術(shù)成為 HCP 分析的選擇之一。在 HCP 的 LC/MS 分析過程中,主要挑戰(zhàn)在于低豐度 HCP 肽段與高豐度藥品肽段的共洗脫。這 要求 LC/MS 系統(tǒng)具有更出色的肽段分離度以及寬動(dòng)態(tài)范圍。[詳細(xì)]
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2020-05-08 14:52
應(yīng)用文章
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利用 Agilent AdvanceBio 肽圖分析色譜柱進(jìn)行高分離度的 EPO 糖肽圖分析
- 2.7 μm Agilent AdvanceBio 肽圖分析色譜柱專為改善多肽分離和肽圖分析應(yīng)用而設(shè)計(jì)。 該色譜柱采用了表面多孔技術(shù),能夠?qū)崿F(xiàn)復(fù)雜多肽混合物的快速有效分離。本文以重組人 促紅細(xì)胞生成素 (rhEPO) 的胰酶分解物作為糖肽分析的消化物模型,展示了 AdvanceBio 肽圖分析色譜柱zhuo越的肽圖分析性能。與很多蛋白ZL藥物類似,rhEPO 在生產(chǎn)過程中 發(fā)生了修飾,因此表現(xiàn)出廣泛的異質(zhì)性。AdvanceBio 肽圖分析色譜柱采用了優(yōu)化的 C18 涂層技術(shù),能在一個(gè)很寬的洗脫范圍內(nèi)為多肽分析提供zhuo越的選擇性和分離度,以增強(qiáng) 糖肽片段的分離,從而實(shí)現(xiàn)其快速、有效和靈敏的質(zhì)譜分析。[詳細(xì)]
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2024-09-28 03:45
應(yīng)用文章
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使用 AdvanceBio SEC 色譜柱分析人促血紅細(xì)胞生成素的聚集體
- 使用 AdvanceBio SEC 色譜柱分析人促血紅細(xì)胞生成素的聚集體[詳細(xì)]
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2020-09-11 13:55
應(yīng)用文章
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使用 Agilent Bio SEC 色譜柱分析類病毒顆粒
- 使用 Agilent Bio SEC 色譜柱分析類病毒顆粒[詳細(xì)]
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2020-12-25 09:38
應(yīng)用文章
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利用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HPH-C8 色譜柱分析奧美拉唑中的雜質(zhì)
- 利用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HPH-C8 色譜柱分析奧美拉唑中的雜質(zhì)[詳細(xì)]
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2024-09-16 06:23
應(yīng)用文章
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Shodex色譜柱對(duì)蛋白質(zhì)和多肽的分析
- Shodex色譜柱對(duì)蛋白和多肽的分析[詳細(xì)]
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2018-08-20 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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采用 Agilent AdvanceBio SEC 200 ? 1.9 μm 色譜柱進(jìn)行單克隆抗體和抗體藥物偶聯(lián)物的體積排阻色譜分析
- 采用 Agilent AdvanceBio SEC 200 ? 1.9 μm 色譜柱進(jìn)行單克隆抗體和抗體藥物偶聯(lián)物的體積排阻色譜分析[詳細(xì)]
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2021-04-08 10:42
應(yīng)用文章
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使用Prominence-i 和核-殼技術(shù)色譜柱快速分析醫(yī)藥品雜質(zhì)
- 使用Prominence-i 和核-殼技術(shù)色譜柱快速分析醫(yī)藥品雜質(zhì)[詳細(xì)]
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2024-09-29 00:18
實(shí)驗(yàn)操作
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使用 Agilent Polaris C18-A 色譜柱分離有機(jī)酸
- 使用 Agilent Polaris C18-A 色譜柱分離有機(jī)酸[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:24
應(yīng)用文章
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使用高分辨率 Agilent 6546 LC/Q-TOF測定亞硝胺雜質(zhì)
- 使用高分辨率 Agilent 6546 LC/Q-TOF測定亞硝胺雜質(zhì)[詳細(xì)]
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2020-12-25 11:03
應(yīng)用文章
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使用 Agilent 8900 ICP-MS/MS分析高純度銅中的超痕量雜質(zhì)
- 使用 Agilent 8900 ICP-MS/MS分析高純度銅中的超痕量雜質(zhì)[詳細(xì)]
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2024-09-29 01:36
應(yīng)用文章
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使用UPC2/MS進(jìn)行雜質(zhì)分析
- 使用UPC2/MS進(jìn)行雜質(zhì)分析[詳細(xì)]
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2014-06-20 00:00
其它
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豬多肽YY酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 豬多肽YY酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中多肽YY(peptideYY)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬多肽YY(peptideYY)水平。用純化的豬多肽YY(peptideYY)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入多肽YY(peptideYY),再與HRP標(biāo)記的多肽YY(peptideYY)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多肽YY(peptideYY)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬多肽YY(peptideYY)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480pg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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特價(jià)大豆多肽酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。大豆多肽酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測范圍:96T2ng/L-90ng/L使用目的:本試劑盒用于測定發(fā)酵豆粕樣本中大豆多肽(peptide)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大豆多肽(peptide)水平。用純化的大豆多肽(peptide)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大豆多肽(peptide),再與HRP標(biāo)記的大豆多肽(peptide)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大豆多肽(peptide)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大豆多肽(peptide)濃度。試劑盒組成大豆多肽酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。大豆多肽酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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CP-PoraPLOT Q 色譜柱用于氯乙烯中雜質(zhì)的分析
- CP-PoraPLOT Q 色譜柱用于氯乙烯中雜質(zhì)的分析[詳細(xì)]
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2011-07-25 00:00
其它
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合成類固醇(生命科學(xué)GC色譜柱應(yīng)用)
- 合成類固醇(生命科學(xué)GC色譜柱應(yīng)用)[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:09
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