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ELISA試劑盒具體操作流程
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本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2018-09-27 10:00 822閱讀次數(shù)
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ELISA試劑盒操作事宜如下:1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。2、酶標板置4℃。3、洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。6、洗板,同4。7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。9、洗板,同(4)。10、每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,Z終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。ELISA試劑盒13、數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。注:所用溶液配方(1)PBS:稱取0.2gKH2P04,2.9gNa2HP04?12H20、8.0gNaCl,0.2gKCl,加雙蒸水至1000ml。(2)包被緩沖液:稱取1.59gNa2CO3,2.938NaHCO3,加雙蒸水至1000m1。(3)洗滌液(PBST):含0.05%Tween-20的PBS。(4)稀釋液:含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS,主要用以稀釋抗體、標準品、樣品。(5)TMB顯色液:稱取1.84gNa2HP04.12H20,0.51g檸檬酸,加雙蒸水至1O0ml,配成檸檬酸-磷酸緩沖溶液。用10.5ml檸檬酸-磷酸緩沖溶液溶解1錠TMB,再加入35μl3%H2O2(6)細胞裂解液:1%TritonX-100,137mmol/LNaCl,20mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA,1mmol/LPMSF,pH7.4。(其中PMSF溶于異丙醇中,配成1Ommo/L,-20℃貯存?zhèn)溆谩?
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ELISA試劑盒具體操作流程
- ELISA試劑盒操作事宜如下:1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。2、酶標板置4℃。3、洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。6、洗板,同4。7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。9、洗板,同(4)。10、每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,Z終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。ELISA試劑盒13、數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。注:所用溶液配方(1)PBS:稱取0.2gKH2P04,2.9gNa2HP04?12H20、8.0gNaCl,0.2gKCl,加雙蒸水至1000ml。(2)包被緩沖液:稱取1.59gNa2CO3,2.938NaHCO3,加雙蒸水至1000m1。(3)洗滌液(PBST):含0.05%Tween-20的PBS。(4)稀釋液:含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS,主要用以稀釋抗體、標準品、樣品。(5)TMB顯色液:稱取1.84gNa2HP04.12H20,0.51g檸檬酸,加雙蒸水至1O0ml,配成檸檬酸-磷酸緩沖溶液。用10.5ml檸檬酸-磷酸緩沖溶液溶解1錠TMB,再加入35μl3%H2O2(6)細胞裂解液:1%TritonX-100,137mmol/LNaCl,20mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA,1mmol/LPMSF,pH7.4。(其中PMSF溶于異丙醇中,配成1Ommo/L,-20℃貯存?zhèn)溆谩?a href="/doc/detail_ee5b22a5c5bdae5c.html" target="_blank">[詳細]
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∮型瑢W(xué)一直認為裝修開始之前,一些主料應(yīng)該事先進場。我要說的是,除非是主體拆改需要用的主料,否則,諸如瓷磚、大芯板等主料的進場時間應(yīng)該在水電改造之后。因為電路改造如果涉及地面開槽的話,瓷磚、大芯板碼放的位置不當?shù)脑?,工人搬來搬去很是麻煩。前兩天“耗子”同學(xué)還跟我提到她家當初就遇到了工人滿屋子來回來去挪磚的問題,在此提醒同學(xué)注意。 ?。ㄋ模┠竟ぁ ∧竟?、瓦工、油工是施工環(huán)節(jié)的“三兄弟”,基本出場順序是:木瓦油?;境鰣鲈瓌t是誰臟誰先上?!罢l臟誰先上”也是決定家裝順序的一個基本原則之一,我后面還會提到。 其實像包立管、做裝飾吊頂、貼石膏線之類的木工活從某種意義上說也可以作為主體拆改的一個細環(huán)節(jié)考慮,本身和水電路改造并不沖突,有時候還需要一些配合,諸如我上篇帖子提到的“家里準備做假墻的話,要考慮假墻上是否有水電線路,如果有的話,應(yīng)該讓水電改造的工人預(yù)埋管?!薄 。ㄎ澹┵N磚 如果工人忙得開的話,工長一般會在“木工老大”還沒有結(jié)束的時候就讓“瓦工”進場貼磚,這很正常,因為兩者本身沒什么沖突?! ≡凇巴吖ぁ弊鳂I(yè)的過程,還涉及以下三個環(huán)節(jié)的安裝: 1、過門石、大理石窗臺的安裝。過門石的安裝可以和鋪地磚一起完成,也可以在鋪地磚之后,大理石窗臺的安裝一般在窗套做好之后,安裝大理石的工人會準備玻璃膠,順手就把大理石和窗套用玻璃膠封住了?! ?、地漏的安裝。地漏是家裝五金件中**個出場的,因為它要和地磚共同配合安裝。所以,同學(xué)們在開始逛建材的時候,應(yīng)該趕早兒買地漏。 3、油煙機的安裝。油煙機是家電**個出場的,廚房墻地磚鋪好之后,就可以考慮安裝油煙機了?! 巴吖ぁ彪x場,這時候可以約櫥柜第二次測量了,準確地說,在廚房墻地磚貼完并安裝完油煙機之后,就可以約櫥柜第二次測量?! 。┧γ嫫帷 坝凸だ先边M場,主要完成墻面基層處理、刷面漆、給“木工老大”打的家具上漆等工作。準備貼壁紙的同學(xué),只需要讓“油工老三”在計劃貼壁紙的墻面做基層處理就可以。至于是否要留Z后一遍面漆,個人感覺這個問題沒必要太較真兒,從我裝修過的經(jīng)驗來看,留一遍面漆的意義不是很大,因為后面的操作沒有比刷漆再臟的了?! 懙竭@里,死抗著喘口氣兒,跟大家閑聊兩句。當“老大”、“老三”相繼離場之后,很多同學(xué)會認為自己的裝修快結(jié)束了,其實按環(huán)節(jié)來數(shù)的話,三分之一還不到。大家之所以有這種感覺是因為,人們普遍理解的裝修只是裝修的“施工環(huán)節(jié)”,其實裝修的“安裝環(huán)節(jié)”也是裝修的重頭所在?! ∪绻f“設(shè)計環(huán)節(jié)”是把我們未來家的樣子“構(gòu)想”一下的話,那么“施工環(huán)節(jié)”就是把我們的家“包裝”一下,真正說“置備”家當幾乎都在“安裝環(huán)節(jié)”。喝口水兒,繼續(xù)…… ?。ㄆ撸N衛(wèi)吊頂 櫥柜吊頂作為安裝環(huán)節(jié)打頭陣的,還是在延續(xù)對家的“包裝”。在廚衛(wèi)吊頂?shù)耐瑫r,廚衛(wèi)的防潮吸頂燈、排風(fēng)扇(浴霸)應(yīng)該已經(jīng)買好了。同學(xué)們**把廚衛(wèi)吸頂燈、排風(fēng)扇(浴霸)同時裝好,或者留出線頭和開孔?! №樀啦逡痪洌沂菆詻Q主張“裝修外包論”的,即便工長跟我承諾他的工人水電改造做得如何如何規(guī)范、鋁扣板安裝如何如何規(guī)矩、木門做的如何如何結(jié)實,壁紙貼的如何如何專業(yè)、櫥柜打造的如何如何實用……在我看來,裝修隊所能做的,就是木工、貼磚、刷漆 因為我相信專業(yè)的施工、相信廠家的安裝水準、相信流水線作業(yè)的產(chǎn)物,大都要比裝修隊工人的手工略勝一籌。裝修如同博弈,賭的就是工人的手藝,所以,把寶押在“我家工人是施工天才”上,我心里不踏實?! 『芏嗯笥阎宰屟b修公司、裝修隊承擔(dān)了大量的施工任務(wù),其原因一方面是自己的時間不寬裕,還有一個原因是因為考慮“工程的銜接”問題。我當初決定水電改造外包,還有鄰居提醒我說:以后銜接起來很麻煩?! ∑鋵嵮b修的每個環(huán)節(jié)獨立性都很強,記得前陣子論壇還有南方的同學(xué)提出疑問,說他老家那邊裝修,每個環(huán)節(jié)都是業(yè)主請專門的工人做。家庭裝修就這么點事,本身真的沒什么銜接可言,反倒是同學(xué)們自己在家裝過程應(yīng)該盡可能發(fā)揮所謂的“銜接作用”,準確把握材料的選擇、掌握一些簡單的施工工藝流程、處理好對工人的關(guān)系等等,這才是關(guān)鍵所在?! ≌嬉f因為“銜接”出了問題,比如涉及后期潔具、燈具、五金的安裝等環(huán)節(jié)由誰來負責(zé)的問題,一方面要看你和工人的相處,看Z后有沒有人愿意“管”你;另一方面,真說到了沒人“管”的份兒上,我還是那句話“自從上帝發(fā)明了錢,就沒有解決不了的問題”?! ⊙b修,質(zhì)量永遠排在**位,是主要矛盾,是大原則。某些環(huán)節(jié)因為“銜接”出了問題,是次要矛盾。同學(xué)們在因為次要矛盾而準備在主要矛盾、在大原則上做出讓步的同時,還需慎重。 (八)廚柜安裝 吊頂結(jié)束后,可以約櫥柜上門安裝了。順利的話,一天的時間可以完成。同時安裝的還有水槽(可以不包括上下水件)和煤氣灶,櫥柜安裝之前**協(xié)調(diào)物業(yè)把煤氣通了,因為煤氣灶裝好之后需要試氣?! α?,剛才說到吊頂,有個問題值得大家探討,很多同學(xué)廚衛(wèi)吊頂選擇防水石膏板配合防水漆,裝修隊報價一般在120元以上每平米,比一般的鋁扣板、PVC扣板吊頂都要貴。石膏板吊頂從視覺上看起來比較平整,但是以后頂面水管一旦出現(xiàn)問題,或者樓上漏水需要樓下配合維修等,石膏板吊頂就要整體拆除,比起扣板吊頂費事得多。所以,大家在選擇石膏板吊頂?shù)臅r候還需慎重?! 。ň牛┠鹃T安裝 在櫥柜安裝的第二天,早在一個多月前木門測量完成后,現(xiàn)在可以約安裝了。順利的話,也是一天的時間,裝門的同時要安裝的合頁、門鎖、地吸。同學(xué)們事先應(yīng)該準備好相關(guān)五金?! ∪绻阆胱屇鹃T廠家安裝窗套、埡口的話,在木門廠家測量的時候也要一并測量,并在木門安裝當天同時安裝,同時應(yīng)考慮將大理石窗臺的安裝時間向后錯,排在窗套安裝之后?! 渥ⅲ耗鹃T的制作周期一般為一個月,所以,為了讓工期銜接緊密,要在主體拆改完成之后盡早讓木門廠家上門就門洞尺寸進行測量。關(guān)于門洞的處理,大家需要注意一點,如果家里門洞的高度不一致,需要工人處理成等高好看。 ?。ㄊ┑匕灏惭b 在木門安裝的第二天就可以安裝地板了,順利的話,也是一天的時間。地板安裝需要注意以下幾個問題: 1、地板安裝之前,**讓廠家上門勘測一下地面是否需要找平或局部找平,有的裝修公司或整修隊會建議同學(xué)地面找平或局部找平,以地板廠家的實際勘測為準; 2、地板安裝之前,家里的鋪裝地板的地面要清掃干凈,要保證地面的干燥,所以清掃過程不要用水?! ?、地板安裝時,有條件的話,地板的切割一定要在走廊。以前論壇還就這個問題討論過,有同學(xué)認為在走廊切割地板污染公共區(qū)域,不道德。我的想法是完工之后打掃一下,不打緊。在室內(nèi)切割地板對墻面的污染比較嚴重,類似的還有櫥柜的人造石臺面的切割,我相信裝修過的同學(xué)多少都有體會?! 。ㄊ唬╀佡N壁紙 在地板安裝的第二天,家里收拾干凈了,就可以約壁紙鋪貼了,順利的話,同樣是一天的時間。有條件的話,鋪貼壁紙的當天,地板應(yīng)該做一下保護;沒條件也沒關(guān)系,把清理地板上遺留的壁紙膠交給拓荒保潔也沒問題。鋪貼壁紙之前,墻面上要盡量做到“什么都不要有”?! 。ㄊ┥崞靼惭b 在壁紙鋪好的第二天,更換散熱器或者拆改散熱器的同學(xué)們可以踏踏實實的把散熱器掛墻上了。同樣是一天的時間?! ∧鹃T地板壁紙散熱器,這是一個被普遍認可的正確安裝順序,先裝木門是為了保證地板的踢腳線能和木門的門套緊密接合;后裝壁紙主要是因為地板的安裝比較臟,粉塵多,對壁紙污染嚴重。此處再次用到我前面說的“誰臟誰先上”的原則。Z后裝散熱器是因為只有墻面壁紙鋪好才能安裝散熱器?! ⊙b修過程的逐次逐步也就是在種種制約與被制約的條件下設(shè)計出來的。偶爾也有例外,比如霍爾茨門需要先裝地板后裝門,不過這樣的例外在裝修過程中并不多見?! 〈送?,我前面反復(fù)說“一天的時間”,有一層意思需要提醒同學(xué)們,“一天”對于整個裝修來說并不算漫長,所以,即便沒什么安裝沖突,比如櫥柜和木門,同學(xué)們也盡量不要在一天的時間里同時預(yù)約兩個安裝,特別是對上面提到的這些“大件”,因為安裝對于這些“大件”來說非常關(guān)鍵,**專盯一個現(xiàn)場,而不要“一心二用”。要學(xué)會安慰自己咱不差那一天?! 。ㄊ╅_關(guān)插座安裝 死抗著只有一句提醒:同學(xué)們應(yīng)該對家里各個自然間的開關(guān)插座數(shù)量、位置等問題有一個詳細的了解或者記錄,特別是對于貼壁紙的同學(xué),有時候壁紙工人不負責(zé)任,壁紙呼啦一下子鋪上去,他也不用壁紙刀在你開關(guān)插座的位置開孔標示。所以,仍然需要同學(xué)們自己心里有數(shù)?! 。ㄊ模艟甙惭b 裝燈,沒啥好說的。裝完燈,家里就亮了,告別了裝修期間100瓦的白熾燈泡刺眼的強光感覺不錯?! 。ㄊ澹┪褰饾嵕甙惭b 之前買好的上下水管件、衛(wèi)浴掛件、馬桶、晾衣架等等,一并就都裝上。前面那些“大件”裝好之后,家里仍然十分“生冷”,等到燈具、五金潔具裝好之后,家里就“活”了,真的“活”了。一點不夸張地說,你**次打開龍水看著水“嘩、嘩”的往出流,心里都會挺美;**次在家里新裝的馬桶出恭,都會很有成就感,對了,我還給它起了個不錯的名字“處女座”?! 。ㄊ┐昂煑U安裝 窗簾桿的安裝標志著家裝的基本結(jié)束。 ?。ㄊ撸┩鼗谋崱 ⊥鼗谋嵵?,不要裝窗簾,記得“解說窗簾”那篇帖子里提醒過大家。拓荒保潔時,家里不要有家具以及不必需的家電,要盡量保持更多的“平面”,以便拓荒保潔能夠徹底的清掃?! 。ㄊ耍┘揖哌M場 關(guān)于家具的購買時間,我的建議是,Z早也要在水電路改造完成之后,這樣,選擇家具的基本尺寸范圍我們心里才大致有數(shù)。所以,有些同學(xué)在裝修還沒開始之前,已經(jīng)急著把家具都訂了,個人感覺沒什么必要?! 。ㄊ牛┘译娺M場 到了這時候,家電該進場的進場,該安裝的安裝,準備入住了! ?。ǘ┘揖优滹棥 〖揖优滹?,家裝的Z后一步,而且已經(jīng)由裝修轉(zhuǎn)為裝飾了,包括窗簾的安裝都屬于家居配飾環(huán)節(jié)。至于買窗簾,**是在訂好家具之[詳細]
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應(yīng)用文章
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中英文Elisa試劑盒,干擾素(IFN-α)Elisa試劑盒雞Elisa試劑盒試劑盒使用說明書
- 雞α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中α干擾素(IFN-α)的含量。代做ELISA試劑盒,代測elisa試劑盒,上海廣銳生物科技有限公司實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中雞α干擾素(IFN-α)水平。用純化的雞α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α),再與HRP標記的羊抗雞抗體體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞α干擾素(IFN-α)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-10-23 10:31
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