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如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細胞
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2024-09-28 02:06 607閱讀次數(shù)
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如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細胞
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如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細胞
如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細胞[詳細]
2024-09-28 02:06
標準
大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備與組DNA的轉(zhuǎn)化
大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備與組DNA的轉(zhuǎn)化[詳細]
2016-07-12 00:00
其它
T7pLysY 感受態(tài)細胞
T7pLysY感受態(tài)細胞:T7pLysY菌株為大腸桿菌BL21增強型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,用于毒性或非毒性蛋白的表達。該菌株區(qū)別于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的優(yōu)勢在于T7RNA聚合酶基因整合在細菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,LysY表達的T7溶菌酶保留了對T7RNA聚合酶的YZ作用但缺失了水解細胞壁的酰胺酶活性,有利于降低基因的背景表達和避免誘導(dǎo)過程中細菌的裂解,菌株具有抗T1噬菌體感染等特點。T7pLysY表達感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于108cfu/μgDNA。T7pLysY感受態(tài)細胞說明書見附件。[詳細]
2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
如何制備粉末樣品
如今,粉末材料在 3D 打印、陶瓷、鋰電池、超硬材料、藥物等領(lǐng)域中都很常見。粉末樣品也是是掃描電鏡所經(jīng)常涉及到的樣品門類,甚至有些單位采購電鏡的主要目的就是為了觀察、分析粉末材料。而實際操作中,卻經(jīng)常由于樣品制備方法不當(dāng),無法達到預(yù)期的觀察效果。在這里,小編給大家分享一下自己Z常用的粉末制樣方法。 [詳細]
2020-06-30 13:36
應(yīng)用文章
大腸桿菌內(nèi)毒素試劑盒使用說明書
檢測范圍:96T0.03Eu/L0.8Eu/L使用目的:本試劑盒用于測定大腸桿菌樣本中內(nèi)毒素(endotoxin)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)水平。用純化的大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)毒素(endotoxin),再與HRP標記的內(nèi)毒素(endotoxin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)毒素(endotoxin)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)濃度。[詳細]
2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
stbl3 感受態(tài)細胞說明書
產(chǎn)品概述:常規(guī)質(zhì)粒制備的宿主菌,可進行藍白斑篩選;復(fù)制慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株,對慢病毒載體等較大的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的效果好,有效減低錯誤重組的可能性。細胞種類:大腸桿菌Stbl3菌株能有效地YZ長片段末端重復(fù)區(qū)的重組,非常適合于含有同向重復(fù)序列的慢病毒和其他反轉(zhuǎn)錄病毒載體的復(fù)制。此外,細胞非常穩(wěn)定,能提高慢病毒載體或其他不穩(wěn)定載體的克隆效率。轉(zhuǎn)化效率:使用1ng的質(zhì)粒DNA進行轉(zhuǎn)化時:100μlCompetentCellsStbl3/1ngpUC19進行轉(zhuǎn)化時產(chǎn)生的菌落數(shù)>1×10*8轉(zhuǎn)化子/1μgpUC19[詳細]
2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
DH5α感受態(tài)細胞說明書
本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。DH5α是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)α互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。[詳細]
2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
如何制備密度梯度離心液
如何制備密度梯度離心液[詳細]
2010-11-30 00:00
安裝說明
大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書
大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書[詳細]
2015-05-14 00:00
標準
Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞說明書
本產(chǎn)品是采用進口Rosetta菌株,經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。Rosetta菌株是攜帶氯霉素抗性質(zhì)粒BL21的衍生菌,補充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)對應(yīng)的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達107[詳細]
2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
BL21(DE3)感受態(tài)細胞說明書
本產(chǎn)品是大腸桿菌BL21(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。BL21(DE3)菌株適合表達非毒性蛋白,該菌株是以T7RNA聚合酶為表達系統(tǒng)的外源基因蛋白GX表達的宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達受λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動子調(diào)控,該區(qū)整合在BL21染色體上。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達107[詳細]
2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
T*P10感受態(tài)細胞說明書
本產(chǎn)品是大腸桿菌T*P10菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。T*P10是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)α互補,可用于藍白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108,適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。[詳細]
2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
Shuffle T7-B 感受態(tài)細胞說明書
ShuffleT7-B感受態(tài)細胞說明書,ShuffleT7-B菌株為大腸桿菌BL21增強型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,適用于T7啟動子啟動的蛋白表達。細胞內(nèi)組成型表達的二硫鍵異構(gòu)酶DsbC不僅有利于表達蛋白形成正確的二硫鍵,并具有分子伴侶的功能,幫助不含二硫鍵的蛋白正確折疊。T7RNA聚合酶基因整合在細菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,具有抗T1噬菌體感染特點。ShuffleT7-B感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于106cfu/μgDNA。[詳細]
2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
Shuffle T7-K12 感受態(tài)細胞說明書
ShuffleT7-K12感受態(tài)細胞說明書[詳細]
2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
E.Coli 感受態(tài)細胞的制備、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化、提取與酶切鑒定
E.Coli感受態(tài)細胞的制備、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化、提取與酶切鑒定[詳細]
2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
大腸桿菌宿主殘留蛋白試劑盒使用說明書
Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)試劑盒使用說明書檢測范圍:96T0.6ng/L-16ng/L使用目的:大腸桿菌宿主殘留蛋白試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)含量。實驗原理大腸桿菌宿主殘留蛋白試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)水平。用純化的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP),再與HRP標記的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(32ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液8ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液4ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液2ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。大腸桿菌宿主殘留蛋白試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
2024-09-14 19:14
產(chǎn)品樣冊
BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞說明書
本產(chǎn)品是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。該菌株攜帶pLysS質(zhì)粒,具有氯霉素抗性,適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。PLysS含有表達T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達水平,但不干擾目的蛋白的表達。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達107[詳細]
2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
GB1886.45—2016 食品安全國家標準食品添加劑 氯化鈣
本標準代替 GB22214—2008《食品添加劑 氯化鈣》。
本標準與 GB22214—2008相比,主要變化如下:
———標準名稱修改為“食品安全國家標準 食品添加劑 氯化鈣”。
本標準適用于食品添加劑氯化鈣。
本標準所用試劑和水在沒有注明其他要求時,均指分析純試劑和 GB/T6682規(guī)定的三級水。試驗中所需標準溶液、雜質(zhì)標準溶液、制劑和制品,在沒有注明其他要求時均按 GB/T601、GB/T602、GB/T603之規(guī)定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時,均指水溶液。
[詳細]
2018-11-23 15:59
標準
大腸桿菌不耐熱腸毒素(LTELISA試劑盒使用步驟
大腸桿菌不耐熱腸毒素(LTELISA試劑盒使用步驟[詳細]
2015-04-03 00:00
應(yīng)用文章
半價銷售大腸桿菌酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。大腸桿菌酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌(E.coli)表達。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大腸桿菌(E.coli)表達。用純化的大腸桿菌(E.coli)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中大腸桿菌(E.coli)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的大腸桿菌(E.coli)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中大腸桿菌(E.coli)的存在與否。試劑盒組成大腸桿菌酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算和結(jié)果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為大腸桿菌(E.coli)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為大腸桿菌(E.coli)陽性大腸桿菌酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
2018-09-19 10:00
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