紫外可見分光光度計是依據(jù)紫外-可見分光光度法原理設(shè)計的,是在190~800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度,用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定的方法。紫外可見分光光度計是精密儀器設(shè)備,對該儀器的使用一定要嚴(yán)格管理,千萬不能大意。在其使用過程當(dāng)中有著嚴(yán)格的操作流程,也存在很多的注意事項,一定要做到清楚明白的了解。
1、使用前儀器要調(diào)零、調(diào)百校準(zhǔn),參比溶液又稱空白溶液。
2、測量時用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時,基體中雖不含被測物質(zhì),但含有別的物質(zhì),這時必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì),此時必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測定結(jié)果。
3、在色譜分析中,有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰,計算機在數(shù)據(jù)處理中不會計入它們,不影響測定。
4、啟動儀器之前,一定要把樣品室內(nèi)存放的防潮劑拿出,儀器進行正常運轉(zhuǎn)檢查的時候,千萬不能開啟樣品室蓋;
5、要求比色皿當(dāng)中的液體占總體積的66%-80%Z佳,千萬不能讓液體太多,以致于液體外泄腐蝕儀器;
6、正常檢測的時候,需要保證比色皿干凈,內(nèi)壁上液滴需要使用專業(yè)的紙進行擦拭,千萬不能使用手進行直接的擦拭,容易對使用人員的手造成傷害,相信沒有人希望這樣的事情發(fā)生。
7、紫外可見分光光度計在正常運轉(zhuǎn)的時候,嚴(yán)禁把液體溶劑放置于儀器的表層上,如果出現(xiàn)液體外泄的情況,一定要保證進行及時的清潔處理。
8、當(dāng)檢測完畢之后,需要及時將比色皿內(nèi)的液體處理掉,使用蒸餾水將其清理干凈,同時倒置進行晾干處理。
9、Z后需要將儀器的電源關(guān)閉,把防潮劑放入到樣品室內(nèi),做好防塵處理,等到管理人員同意方可離去。
1、開機:
打開電腦以及紫外可見分光光度計。
軟件的打開:直接點擊圖標(biāo),然后從菜單欄,文件——打開,找到相關(guān)標(biāo)線打開。(另一種方法,從我的電腦——紫外——找到標(biāo)線打開)
點擊connecTIon,機器自檢,待自檢結(jié)束,點擊“OK”(若實驗前機器處于打開狀態(tài)就不會出現(xiàn)自檢)
2、調(diào)零:
首先在里面一個通道放裝有蒸餾水的比色皿(放入比色皿后一定要把蓋關(guān)閉),調(diào)零。然后再外面一個通道放裝有蒸餾水的比色皿,觀察吸光度,選擇Z小的一個,然后再次調(diào)零。(多點幾次調(diào)零鍵,以確保調(diào)零)
3、測樣:
用選擇好的比色皿測試,首先用要測得樣品潤洗比色皿兩到三次。然后倒入樣品(注意,拿比色皿時,不要碰到光滑面,用手指捏住毛面即可,倒液體盡量不要溢出到光面,如有溢出,用擦鏡紙擦干,觀察,沒有水珠和痕跡,再放入通道中。以免影響吸光度。)
在數(shù)據(jù)欄,ID欄敲入數(shù)字編碼,然后把光標(biāo)放在濃度或者吸光度欄,點擊read,得吸光度。(測樣品時應(yīng)多取幾次樣品做平行,直到結(jié)果數(shù)字相近)測量結(jié)束后,保存數(shù)據(jù)并把數(shù)據(jù)抄錄下來,做進一步的計算分析。
斷開連接,點擊unconnenTIon。一次關(guān)閉分光光度計,電腦。關(guān)掉電源。用蒸餾水清洗用過的比色皿,放回原處。把實驗臺上整理干凈。
4、吸附實驗流程:
取適當(dāng)初始濃度的樣品,加入適量管——震蕩或者攪拌一定時間——離心分離——取樣,稀釋至50ml——分光光度計檢測——記錄數(shù)據(jù)
5、注意:
1)、離心分離時要選擇一樣的管,并且倒入相同的樣品。
2)、實驗過程要做好詳細記錄。
3)、實驗結(jié)束把用過的儀器,器皿,清洗干凈,烘干。
1、每天使用結(jié)束后,應(yīng)仔細檢查樣品室內(nèi)是否有溶液溢出,若有溢出必須隨時用濾紙吸干;
2、可見分光光度計儀器使用完畢,用防塵套罩住。
3、分光光度儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動。
4、為了延長光源使用壽命,在不使時不要開光源燈。
5、單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。
6、必須正確使用吸收池,保護吸收池光學(xué)面。
7、光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間暴光,應(yīng)避免強光照射或受潮積塵。
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