為保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，紫外可見分光光度計在正式使用前需要進行校正，其中Z重要的是波長的校正。那么紫外可見光分光光度計波長如何校正呢，除此之外，還有哪些需要校正，校正流程是怎么樣的呢？

紫外可見分光光度計校準(zhǔn)方法

紫外可見分光光度計的校準(zhǔn)主要是通過對一些有數(shù)值型的技術(shù)指標(biāo)測試來進行。如波長準(zhǔn)確度、波長重復(fù)性、光譜帶寬、雜散光、分辨率、透射比誤差、透射比重復(fù)性、噪聲、基線平直性等，由于技術(shù)指標(biāo)測試方法已有介紹，本部分主要介紹波長準(zhǔn)確度和波長重復(fù)性、透射比準(zhǔn)確度和透射比重復(fù)性兩個項目校準(zhǔn)的具體儀器條件或校準(zhǔn)步驟。

1、波長準(zhǔn)確度和波長重復(fù)性校正

若儀器能夠放置低壓汞燈的，按照檢定規(guī)程用低壓汞燈進行全波長測試，否則可用儀器固有的氘燈測試，取單束光能量方式，掃描速度15nm／min，響應(yīng)快，Z小帶寬0．1nm，量程0～100％，對486．02nm和656．10nm兩個單峰進行單方向重復(fù)掃描3次，測量出譜圖上的2條譜線波長，波長測量的平均值與波長的標(biāo)準(zhǔn)值之差就是波長準(zhǔn)確度，測量波長的Zda值與Z小值之差就是波長重復(fù)性。

2、透射比準(zhǔn)確度和透射比重復(fù)性校正

取帶寬2nm，用1套標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池分別裝空白溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0．006000％的重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，在235nm，257nm，313nm，350nm四個波長處連續(xù)3次測量透射比，與檢定規(guī)程中附帶的標(biāo)準(zhǔn)值進行比較，測量平均值與標(biāo)準(zhǔn)值之差就是透射比準(zhǔn)確度，測量值的Zda值與Z小值之差就是透射比重復(fù)性。

紫外可見分光光度計波長校正的正確操作方法

紫外可見分光光度計的波長校正應(yīng)如何操作呢?下面將為您詳細(xì)說明:

1、首先打開吸收池暗室蓋(光門自動關(guān)閉),調(diào)節(jié)[0%t]旋鈕,使數(shù)字顯示為“00.0”,蓋上吸收池蓋,將參比溶液置于光路,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光率[1**%t]旋鈕,使數(shù)學(xué)顯示為“100.0”。

2、如果顯示不到“100”,則可適當(dāng)增加電流放大器靈敏度檔數(shù),但應(yīng)盡可能使用低檔數(shù),這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。當(dāng)改變靈敏度后必須重新校正“0”和“100”。

3、按“1”連續(xù)幾次調(diào)整“00.0”和“100.0”后,如將選擇開關(guān)置于“a”,調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,使數(shù)字顯示為“.000”,即可進行下面吸光度a的測量;如將選擇開關(guān)置于“c”,將標(biāo)準(zhǔn)溶液推入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示值為已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度數(shù)值,即可進行下面濃度c的測量。

可見分光光度計校正注意事項

1、校準(zhǔn)前，應(yīng)使儀器開機預(yù)熱足夠時間穩(wěn)定后進行，一般至少30min后進行。

2、采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時必須注意應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)值的復(fù)現(xiàn)條件（即標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)規(guī)定的使用條件）下進行校準(zhǔn)，否則會產(chǎn)生錯誤的校準(zhǔn)結(jié)果。例如，使用GBW (E)130066分光光度計標(biāo)準(zhǔn)溶液進行校準(zhǔn)時，必須滿足兩個條件：a．被校準(zhǔn)儀器的光譜帶寬應(yīng)該是2nm，若儀器光譜帶寬不能調(diào)節(jié)并大于2nm，則標(biāo)準(zhǔn)溶液給出的值不適用，應(yīng)該采用修正值；b．校準(zhǔn)時所采用的兩只石英比色皿應(yīng)該是內(nèi)徑(10±0．2)mm，并且在235nm、257nm、313nm、350nm處，具有很好的配對性，這樣才能復(fù)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)值。

3、使用標(biāo)準(zhǔn)溶液來校準(zhǔn)時，還必須特別注意校準(zhǔn)測量時的實驗室溫度，因為這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同溫度下有不同的透射比標(biāo)準(zhǔn)值。

4、標(biāo)準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須在說明書規(guī)定條件下保存，例如干涉濾光片應(yīng)該保在干燥潔凈的環(huán)境中，以免表面被污染、受潮開膠或霉變等。所有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均應(yīng)在證書上注明的有效期內(nèi)使用。

5、選用的中性濾光片標(biāo)準(zhǔn)值的不確定度一定要符合傳遞標(biāo)準(zhǔn)。校準(zhǔn)時，要注意標(biāo)準(zhǔn)濾光片的方向性。