實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有靈敏度高、特異性高和精確性高的優(yōu)點(diǎn),此項(xiàng)技術(shù)已被應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品檢測和環(huán)境監(jiān)測等多個(gè)領(lǐng)域。
在食品檢測方面的應(yīng)用
1.轉(zhuǎn)基因
利用熒光定量PCR技術(shù)擴(kuò)增放大轉(zhuǎn)基因信號(hào)。
2.微生物
食品安全和人民群眾的生活息息相關(guān),在生產(chǎn)、儲(chǔ)藏、運(yùn)輸、銷售等一系列過程中,食品會(huì)受到來自微生物的污染。食品中的致病菌可以通過熒光定量PCR技術(shù)來檢測。
在環(huán)境監(jiān)測方面的應(yīng)用
河流中環(huán)境微生物隨著季節(jié)變化的情況能夠通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)被檢測出來,地表水和飲用水中致病菌也可以通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行檢測。

在分子生物學(xué)領(lǐng)域的研究應(yīng)用
1.用于單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測分析
不同人群對(duì)疾病的易感性和對(duì)同一種藥物ZL同一種疾病的效果也不形同,個(gè)體差異的遺傳是基于遺傳物質(zhì)DNA的多態(tài)性RELP,STR,ABO血型和SNP。SNP廣泛地存在于人類基因組中,為Z常見的一種人類可遺傳變異,對(duì)于遺傳性疾病的研究具有重要的意義。
2.DNA甲基化檢測
表觀遺傳學(xué)重要的標(biāo)記信息為DNA甲基化,對(duì)于表觀遺傳學(xué)的時(shí)空特異性研究來說,由實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)將基因組甲基化水平數(shù)據(jù)得到具有重要意義。
3.定量核酸濃度
核酸濃度測定的傳統(tǒng)方法是使用分光光度計(jì)或瓊脂糖凝膠電泳,測定的結(jié)果不僅不夠精確而且容易受到污染。上述的問題通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR就能夠解決,實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有很高的準(zhǔn)確性和靈敏度并且沒有污染。該技術(shù)是定量分析某些傳染性疾病和檢測病原微生物和病毒的shou選。
4.研究基因表達(dá)
基因時(shí)間、空間表達(dá)水平差異的比較能夠應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)。
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究應(yīng)用
1.用于病原體檢測
定量常規(guī)PCR做不到,在操作中容易受到污染從而使假陽性結(jié)果出現(xiàn),然而該問題應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)能夠解決。提供疾病的診斷和ZL依據(jù)、抗結(jié)核藥物ZL后病人痰樣本病原體DNA含量的定量檢測、丙肝病毒、宮頸癌及其癌前病變有關(guān)的人類乳頭瘤病毒的檢測均可以應(yīng)用該項(xiàng)技術(shù)。該項(xiàng)技術(shù)還能夠?qū)α看竽c桿菌樣本一次性的檢測,非常簡單準(zhǔn)確。
2.腫瘤基因檢測
腫瘤具有非常復(fù)雜的發(fā)生機(jī)制,目前,尚不清楚它的發(fā)病機(jī)理。隨著基因分子水平研究不斷發(fā)展,目前被人們廣泛接受的致癌性發(fā)生的根本原因是腫瘤基因發(fā)生突變等遺傳學(xué)改變。在多種腫瘤早期和良性階段就已經(jīng)出現(xiàn)癌基因表達(dá)異常和突變。
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