細(xì)胞培養(yǎng)箱是提供穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（95%），來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。細(xì)胞培養(yǎng)時，細(xì)胞可能會出現(xiàn)死亡的現(xiàn)象，那么就讓小編帶你了解一下細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)該注意哪些問題，以確保細(xì)胞在培養(yǎng)箱內(nèi)健康的成長。

1.保證實(shí)驗材料無菌

由于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，是真菌生長的良好環(huán)境，所以必須定期的對細(xì)胞培養(yǎng)箱進(jìn)行清潔。除此之外，應(yīng)該先用酒精擦拭干凈培養(yǎng)瓶，移液管和其他相關(guān)的物品后，再將它們放入到超凈臺，防止污染。

2.處理培養(yǎng)物時要小心

溫度不斷的波動或者劇烈的搖晃都會嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長。所以培養(yǎng)箱Z好要溫度恒定，不晃動，放在離電動儀器較遠(yuǎn)的地方。除此之外，一次處理多個細(xì)胞系可能會對細(xì)胞的表型和基因型產(chǎn)生影響，所以應(yīng)該盡量避免。為了確定細(xì)胞系的身份，還需要定期完成STR圖譜的分析。

3.正確解凍細(xì)胞

雖然解凍的操作步驟很簡單，還是需要恰當(dāng)?shù)牟僮?，防止?xì)胞受到傷害。細(xì)胞不能夠長時間暴露在高溫的條件下。所以為了防止對DMSO直接造成傷害，應(yīng)該先把凍存管放在37度的水浴中兩分鐘，然后再用條件培養(yǎng)基稀釋。

4.使用對數(shù)生長期的細(xì)胞

細(xì)胞的培養(yǎng)過程總共分為停滯期，對數(shù)期和平臺期三個階段，這三個階段分別代表了低細(xì)胞生長，高細(xì)胞生長和無細(xì)胞生長。細(xì)胞越有活力，細(xì)胞就越健康，分裂也就越快，在對數(shù)期以百分之七十到八十的匯合度存在。

5.傳代前，不能讓細(xì)胞完全匯合

貼壁細(xì)胞所占培養(yǎng)瓶表面積的百分比被稱為匯合度。完全匯合表面貼壁細(xì)胞百分bai的占據(jù)了培養(yǎng)瓶的表面。如果細(xì)胞呈現(xiàn)完全匯合狀態(tài)，那么就表面細(xì)胞不能夠生長。所以要使用有活力的細(xì)胞。

6.選擇良好的培養(yǎng)基

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基影響著產(chǎn)品的質(zhì)量，產(chǎn)量和成本。為了更好的實(shí)驗結(jié)果，需要對每一種培養(yǎng)物進(jìn)行培養(yǎng)基定制。

7.配置干粉培養(yǎng)基時要注意水的質(zhì)量

比起干粉培養(yǎng)，液體培養(yǎng)常常會獲得質(zhì)量更高的結(jié)果。這或許與水的質(zhì)量有關(guān)。

8.利用細(xì)胞代謝特性優(yōu)化培養(yǎng)基

對使用過的培養(yǎng)基進(jìn)行分析，對于鑒定必要成分（包括氨基酸和維生素）的代謝速率很有幫助。

9.避免細(xì)胞過度消化

為了實(shí)現(xiàn)貼壁細(xì)胞的傳代，需要通過胰蛋白酶消化使細(xì)胞和容器結(jié)合的蛋白質(zhì)。但是，細(xì)胞不能在胰蛋白酶中太長時間，否則胰蛋白酶會消化細(xì)胞表面的蛋白。

10.培養(yǎng)基不能持續(xù)使用抗生素

細(xì)胞培養(yǎng)物不能長時間在抗生素中，否則會出現(xiàn)對抗生素有著天然耐藥性的菌株出現(xiàn)，潛在的污染可能會被掩蓋在這種現(xiàn)象里。