紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)技術(shù)指標(biāo)是衡量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)質(zhì)量好壞的主要依據(jù),也是保證分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確的基礎(chǔ)。一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)安裝調(diào)試是否合格或進(jìn)行驗(yàn)收等都需要進(jìn)行一定的技術(shù)指標(biāo)測(cè)試才能作出判斷。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要性能指標(biāo)較為繁多,一般包括以下幾項(xiàng):波長(zhǎng)范圍、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、波長(zhǎng)重復(fù)性、光譜帶寬、雜散光、分辨率、光度準(zhǔn)確度與透射比誤差、光度重復(fù)性與透射比重復(fù)性、噪聲、基線平直性等。
1、波長(zhǎng)范圍
波長(zhǎng)范圍是指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上、下限波長(zhǎng)之問(wèn)的工作范圍,是與光源、單色器及檢測(cè)器的光譜響應(yīng)特性有關(guān)。有的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在波長(zhǎng)范圍兩端缺乏足夠的能量,難以正常工作,表現(xiàn)為“1**%T”(透光率)或“0A”(吸光度)設(shè)定困難,基線兩端不平直等。

2、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定時(shí)標(biāo)稱(chēng)的波長(zhǎng)值與出射的光線實(shí)際波長(zhǎng)值(波長(zhǎng)的參考值或理論值)之間的符合程度,一般用多次波長(zhǎng)測(cè)量值平均值與參考值之差(即波長(zhǎng)誤差)來(lái)衡量。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的大小其實(shí)質(zhì)反映的是波長(zhǎng)的系統(tǒng)誤差,一般是由儀器裝置在制造中的缺陷或儀器沒(méi)有調(diào)整到Z佳狀態(tài)而造成的,它對(duì)測(cè)量的準(zhǔn)確度有很大影響,特別是在對(duì)不同紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行比較時(shí),波長(zhǎng)準(zhǔn)確度顯得更為重要。
3、波長(zhǎng)重復(fù)性
波長(zhǎng)重復(fù)性是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在相同測(cè)試條件下、一個(gè)較短的時(shí)間內(nèi),對(duì)同一吸收或發(fā)射譜線進(jìn)行連續(xù)多次波長(zhǎng)測(cè)量,測(cè)量結(jié)果的一致性。也稱(chēng)波長(zhǎng)精密度,即多次波長(zhǎng)測(cè)試數(shù)據(jù)的符合程度。波長(zhǎng)重復(fù)性一般用多次波長(zhǎng)測(cè)試數(shù)據(jù)的離散性,即取波長(zhǎng)準(zhǔn)確度多次測(cè)試結(jié)果中Zda值與Z小值之差來(lái)衡量。
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性有密切關(guān)系。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度反映的是儀器系統(tǒng)誤差,波長(zhǎng)重復(fù)性反映的是儀器隨機(jī)誤差。主要是由環(huán)境條件變化、波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)的不精密性、機(jī)械振動(dòng)或讀數(shù)誤差等原因造成的。
4、光譜帶寬
光譜帶寬指從經(jīng)過(guò)單色器后從出射狹縫出來(lái)的單色光的譜線輪廓曲線中峰高一半高度處的譜帶寬度。光譜帶寬可以表征儀器的光譜分辨率。光譜帶寬越小越好,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一般可通過(guò)調(diào)窄狹縫,使光譜帶寬變小,但是同時(shí)光源能量弱,可能影響儀器對(duì)信號(hào)的檢測(cè),降低儀器的靈敏度。光源輝線或一些較尖銳的吸收光譜都可用于光譜帶寬的檢查。
5、雜散光
雜散光是指到達(dá)檢測(cè)器的任何被測(cè)波長(zhǎng)以外的其它波長(zhǎng)的光。一般用在某規(guī)定的波長(zhǎng)下測(cè)定在理論上該波長(zhǎng)下完全不吸收的某種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比來(lái)衡量。如紫外區(qū)可用NaI溶液測(cè)定波長(zhǎng)為220nm處的雜散光,在可見(jiàn)區(qū)可用各種有色玻璃截止濾光片。雜散光是光譜測(cè)量中誤差的主要來(lái)源。雜散光越小越好。
6、分辨率
分辨率是指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)于緊密相鄰的峰可分辨的Z小波長(zhǎng)間隔,是衡量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)性能的重要指標(biāo)之一。單色器輸出的單色光的光譜純度、強(qiáng)度以及檢測(cè)器的光譜靈敏度等是影響儀器分辨率的主要因素。新版的檢定規(guī)程已取消分辨率要求,一般可用Z小光譜帶寬來(lái)衡量。
7、光度準(zhǔn)確度與透射比誤差
光度準(zhǔn)確度是吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確程度,一般用透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)實(shí)測(cè)吸光度值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差(吸光度誤差)衡量。因?yàn)槲舛日`差在整個(gè)量程范圍內(nèi)的示值是非線性的,因此用吸光度表示光度準(zhǔn)確度時(shí),必須指定其吸光度范圍。光度準(zhǔn)確度也可用透射比表示,即透射比準(zhǔn)確度,一般用透射比誤差(實(shí)測(cè)透射比值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差)來(lái)衡量。透射比誤差是一個(gè)反映紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)綜合性能的指標(biāo),與波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、雜散光、儀器穩(wěn)定性等眾多因素有關(guān)。

8、光度重復(fù)性與透射比重復(fù)性
光度重復(fù)性是在相同的儀器上、相同條件下,如儀器波長(zhǎng)、光譜帶寬不變,在短時(shí)間對(duì)同一樣品進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定吸光度,所測(cè)得值的一致性。光度重復(fù)性是影響分析結(jié)果可靠性的Z主要因素,是關(guān)鍵性技術(shù)指標(biāo),一般用多次重復(fù)測(cè)量吸光度的Zda值與Z小值之差來(lái)衡量。如按同樣方式測(cè)定透射比,即為透射比重復(fù)性。
9、噪聲
噪聲是信號(hào)隨時(shí)間而無(wú)規(guī)則的變化。噪聲測(cè)量的方法是在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱穩(wěn)定后,在一定波長(zhǎng)和一定光譜帶寬下,分別掃描透射比1**%或0透射比幾分鐘(一般取2min),量取獲得圖譜中Zda值至Z小值之間的值作為噪聲水平。如掃描較長(zhǎng)時(shí)間,一般30min,可獲得漂移。但在實(shí)際測(cè)定中,常用信噪比來(lái)描述儀器的性能,如在1**%線掃描時(shí),噪聲是1%,則信噪比為100:1。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。
10、基線平直性
基線平直性是吸收池中不放任何東西時(shí)掃描基線(1**%T線或0A線),基線傾斜彎曲的程度,它是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的重要性能指標(biāo)之一。一般用掃描圖譜中起點(diǎn)吸光度與偏離起點(diǎn)吸光度(取Zda偏離點(diǎn))之差來(lái)衡量。
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