FPLC全稱為快速蛋白液相色譜(Fast protein liquid chromatography),其原理與GX液相色譜理論類似,是由經(jīng)典的液體柱層析引入氣相色譜理論,并且對相體進(jìn)行了改革,配用高壓輸液泵,采用高靈敏檢測器、梯度洗脫裝置、自動(dòng)收集裝置和微機(jī)等發(fā)展起來的現(xiàn)代液相色譜。
近些年以來,在HPLC基礎(chǔ)上發(fā)展出了新型色譜技術(shù),包括低壓液相色譜(LPLC)、中壓液相色譜(MPLC)以及快速蛋白液相色譜(FPLC),在這些新型色譜技術(shù)當(dāng)中,快速蛋白液相色譜(FPLC)可以非常迅速地分離復(fù)雜混合物,能夠在短時(shí)間內(nèi)對大量樣品加以純化。其特性表現(xiàn)為較大的容量、較高的回收效率以及不易失活的生物大分子等。能夠越來越廣泛地使用于生命科學(xué)研究及藥物生產(chǎn)上。

HPLC與FPLC的異同
FPLC與HPLC的相同點(diǎn):
輸液泵、高靈敏檢測器、梯度洗脫裝置、自動(dòng)收集裝置和計(jì)算機(jī)控制等設(shè)備均為FPLC與HPLC所采用,快速、分辨率高、分離效能高等特點(diǎn)FPLC與HPLC也均具備。
FPLC與HPLC的不同點(diǎn):
由耐高壓的塑料管組成FPLC的管道系統(tǒng),由柱塞式泵驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,中低壓,使用內(nèi)徑較大的色譜柱,分析精度較高,0~100 mL/min(Z大流速可達(dá)1 000 mL/min)為流速范圍,分析精度低于HPLC,僅使用常規(guī)無機(jī)鹽溶液,對于大規(guī)模純化樣品非常適用。
HPLC的管道系統(tǒng)所采用的材料大都為金屬,往復(fù)泵或隔膜泵一起驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,高壓,使用內(nèi)徑較小的色譜柱,有較高的分析精度,流速Z大一般不高于20 mL/min(有些制備級HPLC能夠達(dá)到300 mL/min),有時(shí)一定濃度的有機(jī)溶劑需要被使用,對于微量樣本檢測或少量純化制備君適用。
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