核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)使得樣本核酸提取工作自動(dòng)完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。下面就讓小編帶你了解一下DNA提取常見(jiàn)問(wèn)題。
DNA提取常見(jiàn)問(wèn)題
DNA提取量少
原因一:沉淀不完全
解決方法:低溫沉淀,使沉淀時(shí)間延長(zhǎng),將輔助物加入,對(duì)沉淀起到促進(jìn)作用。
原因二:洗滌時(shí)DNA丟失
解決方法:在洗滌時(shí),洗滌液Z好使用槍頭將其吸出,不要傾倒。
原因三:實(shí)驗(yàn)材料不好或者量少
解決方法:材料盡可能選用新鮮的。

原因四:破壁或者裂解不充分
解決方法:動(dòng)植物要?jiǎng)驖{研磨充分,G+菌、酵母菌裂解之前先采用酶或者機(jī)械方式破壁,高溫裂解時(shí),淫蕩適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。
DNA降解
原因一:提取過(guò)程操作劇烈
解決方法:細(xì)胞裂解之后的后續(xù)操作應(yīng)當(dāng)盡可能輕柔。
原因二:外源核酸酶污染
解決方法:使用無(wú)菌水配置所有試劑,對(duì)耗材高溫滅菌。
原因三:反復(fù)凍融
在緩沖液中分裝保存DNA,從而使反復(fù)凍融得以避免。
原因四:材料不新鮮或者反復(fù)凍融
解決方法:盡可能采用新鮮材料,為了防止反復(fù)凍融,應(yīng)將材料低溫保存。
原因五:對(duì)內(nèi)源核酸酶的活性沒(méi)有很好YZ
解決方法:在對(duì)內(nèi)源核酸酶含量豐富的材料DNA進(jìn)行提取時(shí),可以對(duì)裂解液中螯合劑的含量進(jìn)行增加。
DNA樣品不純
原因一:DNA在溶解之前,有酒精殘留,酒精會(huì)對(duì)后續(xù)酶解反應(yīng)起到Y(jié)Z作用
解決方法:對(duì)DNA重新沉淀,充分揮發(fā)酒精。
原因二:有金屬離子殘留在DNA中
解決方法:將70%乙醇洗滌次數(shù)增加2-3次
原因三:有蛋白、多糖以及多酚等雜質(zhì)存在于DNA中
解決方法:對(duì)DNA重新純化,將蛋白、多糖以及多酚等雜質(zhì)除去。
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