核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。下面就讓小編為你介紹一下總RNA抽提試劑TRIZOL。
TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑,能夠直接將總RNA由細(xì)胞或組織中提取出來。苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì)包含其中,可以將細(xì)胞迅速破碎并且對細(xì)胞釋放出的核酸酶起YZ作用。苯酚為TRIZOL的主要成分。TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時可以使RNA的完整性得以保持,所以十分有用于RNA的純化與RNA的標(biāo)準(zhǔn)化。

成分
苯酚為TRIZOL的主要成分,將細(xì)胞裂解,解聚釋放出細(xì)胞中的蛋白,核酸物質(zhì)為苯酚的主要作用。盡管苯酚能夠有效地使蛋白質(zhì)變性,然而RNA酶活性不能被其完全YZ,所以還將β-巰基乙醇、異硫氰酸胍、8-羥基喹啉等加入到了TRIzol中用于內(nèi)源和外源RNase(RNA酶)的YZ。
TRIZOL是一種即用型試劑,能夠?qū)⒖俁NA從細(xì)胞和組織中提取出來。在樣品裂解或勻漿過程中,TRIZOL可以使RNA完整性得以保持。在將氯仿加入以后,溶液分為水相和有機(jī)相,RNA在水相中。將水相取出,RNA的沉淀回收可以使用異丙醇。
0.1%的8-羥基喹啉能夠使RNase得到Y(jié)Z,與氯仿聯(lián)合使用能夠使YZ作用增強(qiáng)。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類QL的蛋白質(zhì)變性劑,能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)溶解并且消除蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu),降解細(xì)胞結(jié)構(gòu),使核蛋白迅速與核酸分離。對RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵的破壞是β-巰基乙醇的主要作用。
基本特點
Trizol試劑能夠?qū)θ?、動物、植物、?xì)菌不同組織的總RNA進(jìn)行快速提取,使用該方法分離少量的組織(50-100 mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1 g)和細(xì)胞(>107)的效果都比較好。TRIZOL試劑操作上的簡單性使多個的樣品的同時處理被允許。能夠在一小時內(nèi)完成所有的操作。TRIZOL抽提的總RNA可以使DNA和蛋白的污染得以避免。所以可以用于分子克隆、RNA酶保護(hù)分析、體外翻譯、poly(A)+ 選擇、斑點雜交、RNA印跡分析。并且根據(jù)DNA、RNA和蛋白質(zhì)在不同溶液中的溶解性質(zhì),能夠分離純化出不同層中的RNA(上層)、DNA(中層)、蛋白質(zhì)(下層),有極好的效率。Trizol試劑可以對不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出起到促進(jìn)作用。
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