酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。

洗板

1.浸泡的時間適當(dāng)。

2.每孔加入洗液超過350微升，不溢孔，殘留少于5微升.

3.洗板的次數(shù)按照說明書的要求。

4.避免洗板機(jī)堵孔。

顯色

1.A液和B液應(yīng)當(dāng)盡可能不要和污染物接觸。

2.不能將廠家不同，批次不同的酶顯色液混用。

3.對底物溶液的有效性進(jìn)行檢查。

4.當(dāng)試劑顯色的時候，先將A液加入，再將B液加入，A液和B液的加入順序不能顛倒。

終止和讀數(shù)

1.在將終止液加完后，半個小時內(nèi)對數(shù)據(jù)進(jìn)行讀取。

2.確保酶標(biāo)板的底部清潔干燥。

3.設(shè)定正確的酶標(biāo)儀臨界值計(jì)算公式。

4.肉眼的判斷不準(zhǔn)確，會對結(jié)果產(chǎn)生影響。

5.酶標(biāo)儀選擇合適的波長。

結(jié)果判讀

標(biāo)本

1.保持血清新鮮，防止細(xì)菌污染。

2.如果血清在5日之內(nèi)檢測，那么可以保存在4攝氏度下，不然低溫保存。

3.防止溶血、高脂學(xué)以及纖維蛋白凝塊。

試劑

1.在使用試劑之前，先將檢測試劑盒放在室溫下平衡15-30min,使活性劑溶解和酶等液體的初始反應(yīng)溫度得到保證。

2.對外包裝和內(nèi)組分是否漏液進(jìn)行檢查。

3.試劑盒在2-8攝氏度下保存。

加樣

1.需防止在孔壁上部添加。

2.加樣速度不應(yīng)過快。

3.不能夠?qū)悠窞R出。

4.防止氣泡產(chǎn)生。

5.加樣器盡量使用同一個，槍頭需裝緊，加樣后混合均勻。

6.加樣器必須定期校準(zhǔn)。

溫育

1.溫育應(yīng)當(dāng)選擇合適的溫度。

2.反應(yīng)時間必須足夠充分。

3.排除“邊緣效應(yīng)”。