紫外分析儀分為很多系列，有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列，不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進電泳分析、檢測，PCR產(chǎn)物檢測，DNA指紋圖譜分析，紙層分析或薄層分析等。

操作規(guī)程

1.制備DNA

對薩姆布魯克等（1996) 的方法加以參照并且稍稍改進。

（1）在裂解液中溶入切碎的100 mg左右的足肌。

（2）將蛋白酶K加入使終濃度為100μg/ ml，充分混合均勻之后在37攝氏度下消化4～5小時。

（3）依次將體積的飽和酚、酚/ 氯仿/ 異戊醇（25 ：24 ：1) 和氯仿/ 異戊醇（24 ：1) 抽提蛋白加入到樣品中，之后使用雙倍體積的無水乙醇沉淀，干燥DNA以后再將適量TE加入溶解，保存在4攝氏度下。

（4）使用紫外分光光度計對DNA 純度進行測定和對模板濃度進行估算，并且采用瓊脂糖凝膠電泳對DNA分子量進行檢測。

2、擴增

試劑：

20 ng 模板DNA

2U Taq 酶

0.12 mmol/ L dNTPs

0.12 mmol/ L 引物

2 mmol/ L Mg2+

10 ×Buffer

反應(yīng)總體積為25μl。

儀器：

PCR 擴增儀

PCR反應(yīng)程序：

（1）95攝氏度下預(yù)變性5分鐘，94攝氏度下變性45秒，36攝氏度下復(fù)性45秒，72攝氏度下延伸90秒，經(jīng)過30個循環(huán)，72攝氏度延伸10分鐘，保存于4攝氏度。

（2）每次不含模板DNA 的空白對照都設(shè)于PCR 反應(yīng)中。

（3）通過1.2 %瓊脂糖凝膠電泳對擴增產(chǎn)物進行分離，溴化乙錠染色，在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并拍照記錄。

3、處理數(shù)據(jù)

記RAPD 電泳譜帶位點上無擴增位點為0，有擴增位點的為1，將原始數(shù)據(jù)矩陣建立，統(tǒng)計數(shù)據(jù)利用Pop Gene（Ver1132) 軟件。