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DNA合成反轉(zhuǎn)錄酶活性的介紹、活性和作用

更新時(shí)間:2025-10-22 16:52:33 類(lèi)型: 閱讀量:2858
導(dǎo)讀:反轉(zhuǎn)錄是指在基因工程進(jìn)行過(guò)程中,將RNA作為模板,將DNA遺傳信息提取出來(lái)的過(guò)程。對(duì)于DNA生物合成而言,反轉(zhuǎn)錄是一種特殊的方式。將RNA作為模板,利用反轉(zhuǎn)錄酶,合成DNA的過(guò)程,即是反轉(zhuǎn)錄。

反轉(zhuǎn)錄是指在基因工程進(jìn)行過(guò)程中,將RNA作為模板,將DNA遺傳信息提取出來(lái)的過(guò)程。對(duì)于DNA生物合成而言,反轉(zhuǎn)錄是一種特殊的方式。將RNA作為模板,利用反轉(zhuǎn)錄酶,合成DNA的過(guò)程,即是反轉(zhuǎn)錄。


反轉(zhuǎn)錄酶活性

多種酶活性為大多數(shù)反轉(zhuǎn)錄酶所具有,分別為下述幾種活性。

1、DNA聚合酶活性

利用RNA作為模板,對(duì)dNTP進(jìn)行催化使DNA合成的過(guò)程。需要將RNA作為此酶為引物。色氨酸的tRNA占多數(shù),DNA以5′→3′方向在引物tRNA3′-末端合成。反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA有比較高的出錯(cuò)率,因?yàn)?′→5′外切酶活性不為反轉(zhuǎn)錄酶所具備,即是校正功能其不具備。


2、RNase H活性

RNase H從RNA5′端將通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子的RNA分子水解掉。


1.jpg


3、DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性

底物使用dNTP,模板使用反轉(zhuǎn)錄合成的第yi條DNA單鏈,再次將第二條DNA分子合成。


4、其他

另外,DNA內(nèi)切酶活性還存在于某些反轉(zhuǎn)錄酶中,這也許和在宿主細(xì)胞染色體DNA中整合病毒基因相關(guān)聯(lián)。


介紹

反轉(zhuǎn)錄酶,又叫做依賴(lài)RNA的DNA聚合酶(RDDP),其在反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中起催化作用,就是利用RNA作為模板為DNA鏈的合成進(jìn)行催化。

合成的DNA鏈叫做與RNA互補(bǔ)DNA(cDNA)。在一些RNA病毒中存在反轉(zhuǎn)錄酶,病毒的惡性轉(zhuǎn)化可能與其相關(guān)。人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)亦是一種RNA病毒,反轉(zhuǎn)錄酶亦包含其中。反轉(zhuǎn)錄酶亦存在于小鼠及人的正常細(xì)胞和胚胎細(xì)胞中。推測(cè)細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育可能與其相關(guān)。


作用

反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)大大推動(dòng)了遺傳工程技術(shù)的發(fā)展,到目前為止,其作為一種工具酶,起到非常重要的作用。mRNA通過(guò)組織細(xì)胞被提取,并且將其作為模板,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,將互補(bǔ)的DNA(cDNA)合成出來(lái),通過(guò)這將cDNA文庫(kù)(cDNA library)構(gòu)建出來(lái),從中將特異的目的基因篩選出來(lái),使目的基因在基因工程技術(shù)中獲得,其為Z常用的方法。


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