手工測(cè)序以及自動(dòng)測(cè)序均屬于DNA序列測(cè)定，手工測(cè)序可分為maxam-gilbert化學(xué)降解法與sanger雙脫氧鏈終止法，事實(shí)上，目前dna序列分析的主流是自動(dòng)測(cè)序。373型、377型、310型、3700和3100型等多種型號(hào)DNA測(cè)序儀均已經(jīng)被美國(guó)pe abi公司生產(chǎn)出來(lái)了，在這幾款DNA測(cè)序儀中，臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室使用Z多的一種型號(hào)要屬310型。

EDF膠片顯影

EDF膠片的使用能夠使得測(cè)序條帶的對(duì)比度增強(qiáng)，若測(cè)序膠上條帶非常淡，那么Z好網(wǎng)EDF膠片轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)，在EDF膠片轉(zhuǎn)入銀染膠影像以后能夠使得條帶可讀性增強(qiáng)。

1. 在暗室內(nèi)，在熒光燈箱上放置染色過(guò)的粘于玻璃板的凝膠（膠面向上），若有合適的漫射板，也能夠使用白燈箱，為了使曝光時(shí)間得以確保，在不同時(shí)間用一小條EDF膠片進(jìn)行曝光，對(duì)不同的曝光強(qiáng)度進(jìn)行檢查，通常曝光20～40秒，就能夠使比較好的結(jié)果獲得。

2.將EDF膠片有缺刻的一角在紅燈下找到，然后在凝膠上放置膠片，使缺口位于左上角。因?yàn)镋DF膠片是單面的，所以使缺口在左上角必須確保。

3.將一干凈、干燥的玻璃板放置在EDF膠片上。

4.手工顯影EDF膠片步驟

（1） 在Kodak GBX顯影液中顯影1～5min；

（2） 水洗1min；

（3）在Kodak GBX定影液中定影3min；

（4）水洗1min。

意義

DNA測(cè)序方法的飛速發(fā)展除了使人類的全基因組序列為我們所知曉，而且還使得我們充分掌握了小麥、水稻、家蠶以及很多細(xì)菌。此時(shí)，科學(xué)家們的新目標(biāo)也就變成了對(duì)一段序列所代表的生物學(xué)意義的探明。用于編碼基因僅僅只有1.5%存在于核苷酸組成的龐大序列中，除此以外，扮演調(diào)控基因表達(dá)的角色有少許，其中功能未知的“垃圾DNA”占絕大部分，這一發(fā)現(xiàn)是科學(xué)家通過(guò)分析人類基因組序列獲得的。由表面可知，人與人之間有著繽紛復(fù)雜的不同之處，然而，深入到DNA水平上，卻僅僅存在0.1%基因編碼序列上的不同。大多數(shù)時(shí)候，人與人之間在一條序列上的差異只有一個(gè)核苷酸，科學(xué)家將這種現(xiàn)象命名為單核苷酸多態(tài)性（Single Nucleotide Polymorphisms，簡(jiǎn)稱SNPs）。

注意事項(xiàng)：

（1）曝光時(shí)間長(zhǎng)，那么對(duì)于背景的減弱有所幫助，曝光時(shí)間短那么EDF膠片影像較深。

（2）為了對(duì)所用光源的Z佳曝光時(shí)間進(jìn)行選擇，膠片曝光不同時(shí)間。

（3）在EDF膠片顯影之前必須完全干燥EDF膠片，為了不印上指紋需要戴手套進(jìn)行操作，同時(shí)留心自動(dòng)膠片處理器不能用。