液相色譜儀屬于高精度、比較貴重的分析測(cè)量?jī)x器。它的更新速度較快，要求檢驗(yàn)人員掌握較高的專業(yè)操作技術(shù)，因此在檢驗(yàn)中要認(rèn)真仔細(xì)，多加思考，不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，在工作中邊檢邊學(xué)，逐步提高檢驗(yàn)水平，提供準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。在日常使用中必須由專業(yè)技術(shù)人員嚴(yán)格按照相關(guān)的操作規(guī)程來(lái)使用，以免不正規(guī)的操作造成檢驗(yàn)結(jié)果失準(zhǔn)或者儀器損壞。

液相色譜儀啟動(dòng)前的檢查

1、流動(dòng)相的制備要與裝置相適應(yīng)

流動(dòng)相必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾：在送液泵內(nèi)。為了防止雜質(zhì)和顆粒進(jìn)入流路，要裝有0.45um的吸濾器，否則會(huì)導(dǎo)致流路污染。使儀器工作不正常。

(1)流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用：流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)。容易產(chǎn)生氣泡。導(dǎo)致儀器基線很難穩(wěn)定：特別是發(fā)生漂移后。一定要使流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后再使用。

(2)流動(dòng)相務(wù)必進(jìn)行脫氣：使用液相色譜儀時(shí)遇到的麻煩就是流動(dòng)相產(chǎn)生氣泡。這會(huì)引起泵輸液不暢和檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲和漂移。

(3)檢查溶劑瓶?jī)?nèi)吸濾器是否堵塞：溶劑的質(zhì)量或微生物的生長(zhǎng)會(huì)堵塞吸濾器。從而影響液相色譜系統(tǒng)的正常運(yùn)行。

有效防止液相色譜儀吸濾器堵塞的方法：①若需使用含鹽的流動(dòng)相，使用前務(wù)必過(guò)濾；②流動(dòng)相若為蒸餾水或含鹽的緩沖液，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；③盡量避免溶劑瓶在陽(yáng)光下暴曬。

液相色譜儀吸濾器堵塞后的處理方法：①取下吸濾器濾頭，放在(1：4，v/v)硝酸溶液燒杯中超聲清洗15min；②取出后用蒸餾水超聲清洗10min；③用吸耳球吹出過(guò)濾頭中的液體；④再換蒸餾水超聲清洗10min；⑤用吸耳球吹出過(guò)濾頭中的水分：將吸濾器濾頭重新放入溶劑瓶中(正相系統(tǒng)注意將吸濾器濾頭烘干再使用)。

(4)更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)

①更換有互溶性的流動(dòng)相時(shí)：a.將吸濾器部分放入準(zhǔn)備更換流動(dòng)相的燒杯中邊震動(dòng)邊清洗。更換燒杯中的流動(dòng)相直至清洗干凈：b.打開(kāi)排液閥。按清洗鍵清洗泵中的流動(dòng)相。c.然后將吸濾器部分再放人流動(dòng)相瓶?jī)?nèi)。關(guān)閉排液閥，在較短時(shí)間內(nèi)清洗流路。d.Z后連接柱和檢測(cè)器，清洗整個(gè)分析流路。

②更換無(wú)互溶性的流動(dòng)相時(shí)：準(zhǔn)備與新舊流動(dòng)相具有互溶性的中間清洗液。首先換成中間清洗液。然后再把中間清洗液換成新的流動(dòng)相。每次更換順序都要遵循前述的a-d的順序。

③更換緩沖液的流動(dòng)相時(shí)：在新舊流動(dòng)相的任一方或雙方使用緩沖液時(shí)。準(zhǔn)備蒸餾水做中間清洗液。首先用蒸餾水置換整個(gè)流路，然后更換成新的流動(dòng)相，防止緩沖液中的鹽析出。

2、輸液泵

(1)如果液相色譜儀進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液。使用注射器吸液：發(fā)現(xiàn)進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液或有大氣泡時(shí)。打開(kāi)排液閥，用注射器從排液管中吸液。若空氣量太大。有時(shí)用泵的清洗功能也無(wú)法徹底清除空氣。

(2)通常在液相色譜儀輸液前進(jìn)行流動(dòng)相的清洗：例如。停機(jī)夜間的溫度與白天相差大時(shí)?；驇滋煳撮_(kāi)機(jī)時(shí)。有時(shí)在泵頭內(nèi)會(huì)產(chǎn)生氣泡。如果不清除就輸液。會(huì)由于氣泡不能脫出而造成輸液不暢。因此。需進(jìn)行5min的清洗。以便排出氣泡。

3、六通閥

(1)樣品溶液進(jìn)樣前必須用0.45um濾膜過(guò)濾，以減少微粒對(duì)進(jìn)樣閥的磨損。

(2)轉(zhuǎn)動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢。更不能停留在中間位置。否則流動(dòng)相受阻。會(huì)使泵內(nèi)壓力劇增。甚至超過(guò)泵的Zda壓力。再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位時(shí)。過(guò)高的壓力將使柱頭損壞。

(3)為防止緩沖鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。通?？捎盟疀_洗。或先用能溶解樣品的溶劑沖洗。再用水沖洗。

4、自動(dòng)進(jìn)樣器

(1)確認(rèn)清洗液：自動(dòng)迸樣器的清洗液，請(qǐng)使用與流動(dòng)相相同的液體。但是含鹽分時(shí)必須清除鹽分。另外，清洗液在六通閥內(nèi)與流動(dòng)相接通。這時(shí)須注意鹽分不要析出(鹽的析出是造成堵塞的原因)。

(2)清洗液脫氣：自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗液，也是封入在樣品計(jì)量部分的溶劑。其在連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生氣泡導(dǎo)致誤差，必須使用脫氣裝置進(jìn)行脫氣。

(3)必須凈化清洗液：例如，停機(jī)夜間的室溫與白天相差較大時(shí)。或幾天未開(kāi)機(jī)時(shí)，清洗液的流路中會(huì)產(chǎn)生氣泡，如不除去氣泡就進(jìn)行分析，進(jìn)樣量會(huì)產(chǎn)生偏差，因此，在等待基線穩(wěn)定的時(shí)間內(nèi)，應(yīng)進(jìn)行清洗，排出氣泡。用吸液器從排液器徹底吸引(啟動(dòng)注水)后。關(guān)閉排液。進(jìn)行清洗。

液相色譜儀啟動(dòng)后(等待穩(wěn)定后時(shí))的檢驗(yàn)

1、液相色譜儀漏液的噪聲和基線漂移

確認(rèn)在分析條件下裝置啟動(dòng)后。液體流動(dòng)的部分以及液體流過(guò)的部分全部不漏液。如有漏液。要把漏液處系緊或更換零件。

2、泵的壓力的檢查

液相色譜儀輸液泵的壓力必須穩(wěn)定。才能取得良好的分析結(jié)果。根據(jù)需要的壓力和流動(dòng)相種類的不同有所差異，但變動(dòng)幅度在0.5MPa以內(nèi)為正常。若壓力變動(dòng)大再清洗1次，如還是不行，則應(yīng)考慮單向閥內(nèi)部是否污染。試按下述操作進(jìn)行：

(1)關(guān)閉排液閥，取下進(jìn)液管的過(guò)濾器，從這里用吸液器將流動(dòng)相強(qiáng)行壓入(臟物粘在單向閥的內(nèi)部時(shí)有效)。

(2) 按使用說(shuō)明書(shū)中所列的異丙醇進(jìn)行清洗。

(3)試更換單向閥(應(yīng)有備用件)。

3、基線噪聲和基線漂移的檢查

在檢查液相色譜儀基線噪聲和基線漂移時(shí)。Z好選擇沒(méi)有進(jìn)樣時(shí)的空白運(yùn)行基線。常見(jiàn)的幾種現(xiàn)象和處理方法：

(1)液相色譜儀基線噪聲異常大時(shí)：可認(rèn)為是檢測(cè)池中進(jìn)入氣泡未脫出。氣泡脫出不凈時(shí)，可能是檢測(cè)池被污染。按使用說(shuō)明書(shū)所述的檢測(cè)池清洗方法進(jìn)行清洗。并檢查燈的亮度。亮度低時(shí)更換燈泡。

(2)出現(xiàn)基線漂移和不規(guī)則波動(dòng)時(shí)：分段檢查色譜柱、流路配管、進(jìn)樣器、檢測(cè)池、泵及流動(dòng)相等可能受到污染的部件。如污染，必須進(jìn)行徹底清洗。

(3)產(chǎn)生規(guī)則的(周期性的)波動(dòng)時(shí)：可考慮空氣調(diào)節(jié)器的風(fēng)直吹在檢測(cè)器上?；蛴捎诳照{(diào)設(shè)備性能造成室溫變化所致等。

液相色譜儀分析結(jié)束后的工作

1、色譜柱的清洗

在一段時(shí)間內(nèi)不進(jìn)行分析時(shí)。建議清洗色譜柱。并將其從裝置上卸下：種類不同的色譜柱，清洗的方法也不同。必須按色譜柱的使用說(shuō)明書(shū)確認(rèn)。存放時(shí)。色譜柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑(甲醇或乙腈)。兩端要封死。色譜柱要輕拿輕放。

2、裝置的清洗

使用緩沖液時(shí)。液相色譜儀分析完后必須用水洗凈。一段時(shí)間內(nèi)不使用時(shí)。色譜柱清洗后將柱卸下。與色譜柱連接的出入管道。用聯(lián)接器進(jìn)行短路連接，清洗流路。為防止流路內(nèi)部發(fā)霉或產(chǎn)生細(xì)菌。建議用異丙醇、甲醇等清洗流路后進(jìn)行封存。洗凈后進(jìn)液過(guò)濾器和檢測(cè)器出口管道浸泡在裝有清洗液的容器中。以防干燥。

結(jié)束語(yǔ)

液相色譜儀是分離分析技術(shù)的核心，對(duì)我國(guó)食品檢驗(yàn)的工作起著非常重要的作用。因此，我們要加大對(duì)液相色譜儀使用和注意事項(xiàng)的重視，保證食品的質(zhì)量安全。