綠色熒光蛋白GFP的應(yīng)用 綠色熒光蛋白GFP的應(yīng)用主要集中在利用其熒光性質(zhì)的基礎(chǔ)上作為一種標(biāo)記物 1 綠色熒光蛋白GFP在分子生物學(xué)上的應(yīng)用 1.1 綠色熒光蛋白GFP作為報(bào)告基因 報(bào)告基因是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的DNA，如傳統(tǒng)的熒光素酶（LUX）基因和-葡萄糖苷酶（GUS）基因綠色熒光蛋白GFP作為基因報(bào)告可用來檢測(cè)轉(zhuǎn)基因效率，把綠色熒光蛋白GFP基因連接到目的基因的啟動(dòng)子之后，通過測(cè)定GFP的熒光強(qiáng)度就可以對(duì)該基因的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)目前，此方法無論在農(nóng)桿菌介導(dǎo)或基因槍介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化中還是在活細(xì)胞轉(zhuǎn)基因胚胎和動(dòng)物中都已得到非常廣泛的應(yīng)用，特別是在活細(xì)胞基因表達(dá)的時(shí)空成像方面 1.2 綠色熒光蛋白GFP作為融合標(biāo)簽 綠色熒光蛋白GFPZ成功的一類應(yīng)用就是把綠色熒光蛋白GFP作為標(biāo)簽融合到主體蛋白中來檢測(cè)蛋白質(zhì)分子的定位遷移構(gòu)象變化以及分子間的相互作用，或者靶向標(biāo)記某些細(xì)胞器在多數(shù)情況下，綠色熒光蛋白GFP基因在N-或C-末端與異源基因用常規(guī)的分子生物學(xué)手段就可以接合構(gòu)成編碼融合蛋白的嵌合基因，其表達(dá)產(chǎn)物既保持了外源蛋白的生物活性，又表現(xiàn)出與天然GFP相似的熒光特性GFP的這種特性為蛋白質(zhì)提供了一種熒光標(biāo)記，不僅可以檢測(cè)蛋白質(zhì)分子的定位遷移，還可以研究蛋白質(zhì)分子的相互作用以及蛋白質(zhì)構(gòu)象變化，并依靠熒光共振能量轉(zhuǎn)移即FRET來進(jìn)行檢測(cè) 熒光蛋白觀察鏡 熒光蛋白激發(fā)光源 熒光蛋白觀察鏡(無激發(fā)光源） 熒光蛋白觀察鏡