在ELISA 操作中，洗滌是Z主要的關(guān)鍵技術(shù)，操作時(shí)尤為注意： 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板後**在吸水紙或毛巾（選擇干凈無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干（若使用易掉渣的紙，紙屑會(huì)留在板孔中，由于紙屑中含有氧化劑而造成高值陰性）； 注意各種試劑盒的洗液不要混用如果洗液需要稀釋，應(yīng)按要求稀釋，所用的水電導(dǎo)率**在1.5us/cm 之下，洗液如果結(jié)晶應(yīng)待其融解後配制 保證洗板浸泡時(shí)間為40 秒左右，孔內(nèi)液體被洗板機(jī)吸收得越干凈洗滌效果更好，手工洗板防止洗液在孔內(nèi)形成氣泡 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī) 在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間 參考ELISA#洗滌 顯 色： 結(jié)果不好的可能原因 顯色劑配制後放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流 解決方法： 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 加樣時(shí)保持顯色劑不外流，且加樣量要準(zhǔn)確，順序不能顛倒 AB液應(yīng)避免接觸金屬器械 可以參考ELISA#顯色和比色 終 止： 結(jié)果不好的可能原因： 加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加 解決方法： 加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡，及時(shí)終止顯色 讀 板： 結(jié)果不好的可能原因： 讀板時(shí)板底底部不透明帶水滴有劃痕及不規(guī)則的表面 應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔 此外酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30，使用前先預(yù)熱儀器15-30 分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定