化妝品食品添加劑藥物等投入使用前,都需要進(jìn)行大量的細(xì)胞毒性試驗,證明它們沒有毒性,對人體無害,才能正式銷售而且在這些產(chǎn)品的銷售過程中也必須要有相關(guān)部門的監(jiān)管,也需要對其定期進(jìn)行監(jiān)測,其中的檢測項目就是細(xì)胞毒性試驗?zāi)壳胺治黾?xì)胞毒性和細(xì)胞活性的方法有很多種,比較經(jīng)典的方法有臺盼藍(lán)染料法MTT法中性紅染色法等對細(xì)胞毒性的評估主要圍繞兩個方面的檢測:死細(xì)胞多少以及活細(xì)胞多少
死活細(xì)胞細(xì)胞膜存在通透性的差異:活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加,所以臺盼藍(lán)可以穿膜與解體的DNA結(jié)合顯色,而活細(xì)胞拒染該方法操作簡單,但是在實際實驗中,凋亡的細(xì)胞也會存在拒染的情況,如果待測細(xì)胞群自身凋亡比例較高,則活細(xì)胞比例將不準(zhǔn)確
與鑒定死細(xì)胞的臺盼藍(lán)法相反,MTT法和中性紅染色法是對活細(xì)胞進(jìn)行檢測中性紅為活性染料,其進(jìn)入細(xì)胞膜要求獲取儲存于活細(xì)胞溶酶體的能量而激活,如果細(xì)胞膜被任何物質(zhì)損壞,則其不能被胞吞而儲存于細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞受損越嚴(yán)重,中性紅攝取率更低而MTT能被活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶還原為非水溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能但是這兩個方法都需要長時間的染料孵育過程以及復(fù)雜的操作過程,而且容易受到其他因素的影響,造成結(jié)果的不準(zhǔn)確所以研究人員正在不斷尋找新的實驗方法,希望能獲得更簡單更快捷更準(zhǔn)確的方法 Muse 新一代智能細(xì)胞計數(shù)儀
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