方案背景

根據(jù) 2020 年版《中國(guó)藥典》通則 0931 的定義，“溶出度是指活性藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑中在規(guī)定條件下的溶出速率和程度”。根據(jù)溶出度實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以預(yù)測(cè)藥物在人體內(nèi)釋放情況以及制劑中藥物成分的含量。因此，準(zhǔn)確的溶出度測(cè)試由為重要。

在傳統(tǒng)溶出實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)取樣點(diǎn)需要手動(dòng)完成樣品收集、處理及轉(zhuǎn)移，高頻率取樣過(guò)程中的手動(dòng)操作面臨更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。溶出速度快的速釋樣品，取樣時(shí)間誤差以及不同操作人員的取樣行為差異都有可能導(dǎo)致錯(cuò)過(guò)藥物快速釋放的關(guān)鍵階段。而緩釋片劑取樣會(huì)持續(xù) 24 小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間，分析人員的長(zhǎng)時(shí)間疲勞操作可能降低取樣準(zhǔn)確度，增加操作失誤的風(fēng)險(xiǎn)。

如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？

圖 1. 安捷倫在線(xiàn)液相系統(tǒng)與 Flexible cube 聯(lián)機(jī)進(jìn)行溶出測(cè)試示意圖

安捷倫在線(xiàn)液相色譜與 Flexible Cube 模塊聯(lián)用，建立了用于溶出測(cè)試的全流程自動(dòng)化分析系統(tǒng)。該系統(tǒng)利用安捷倫在線(xiàn)液相色譜監(jiān)測(cè)軟件監(jiān)控并觸發(fā) Flexible Cube 在指定時(shí)間進(jìn)行溶出液過(guò)濾和樣品傳輸，定時(shí)通過(guò)流路切換將各時(shí)間點(diǎn)的溶出樣品轉(zhuǎn)移至在線(xiàn)液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)時(shí)分析，使分析人員能夠?qū)崟r(shí)查看溶出度或釋放度，并根據(jù)實(shí)時(shí)檢測(cè)結(jié)果及時(shí)進(jìn)行制劑工藝技術(shù)調(diào)整或質(zhì)量端的批次放行。

在線(xiàn)液相系統(tǒng)進(jìn)行溶出檢測(cè)的應(yīng)用實(shí)例

本實(shí)驗(yàn)以丙戊酸鈉片劑為例，使用在線(xiàn)液相色譜與 FlexibleCube 聯(lián)用分別對(duì)緩釋片劑和速釋片劑進(jìn)行全自動(dòng)化溶出實(shí)驗(yàn)。

丙戊酸鈉緩釋片劑溶出實(shí)驗(yàn)

根據(jù)丙戊酸鈉緩釋片劑的釋放特性，本實(shí)驗(yàn)設(shè)定 4 個(gè)取樣點(diǎn)（分別為 1 小時(shí)、3 小時(shí)、6 小時(shí)、12 小時(shí)），并平行進(jìn)行 6 組溶出實(shí)驗(yàn)。利用在線(xiàn)液相色譜監(jiān)測(cè)軟件，根據(jù)預(yù)設(shè)的處理方法對(duì)采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行自動(dòng)處理，然后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)并繪制溶出曲線(xiàn)。

表 1. 緩釋片劑溶出度結(jié)果

圖 2. 緩釋片劑溶出曲線(xiàn)

通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)品峰面積，繪制丙戊酸鈉緩釋片劑的溶出曲線(xiàn)，結(jié)合溶出度測(cè)試結(jié)果，溶出時(shí)間為 1 h、3 h、6 h 和 12 h 時(shí)的平均溶出度分別為 24.9%、47.3%、71.2% 和 85.3%，表明在設(shè)定的實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)，藥物zui終已基本溶出，6 組實(shí)驗(yàn)平行性良好，符合預(yù)期。

丙戊酸鈉速釋片劑溶出實(shí)驗(yàn)

與緩釋片劑不同，根據(jù)丙戊酸鈉速釋片劑的釋放特性，設(shè)定了更密集的溶出測(cè)試取樣時(shí)間點(diǎn)。速釋片劑旨在快速釋放藥物，通常在 30 分鐘內(nèi)釋放大部分藥物。根據(jù)速釋片劑的特點(diǎn)，我們在 45 分鐘內(nèi)選擇了 4 個(gè)取樣點(diǎn)（分別為 3 分鐘、15 分鐘、30 分鐘、45 分鐘），并平行進(jìn)行 6 組溶出實(shí)驗(yàn)。利用在線(xiàn)液相色譜監(jiān)測(cè)軟件，根據(jù)預(yù)設(shè)的處理方法對(duì)采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行自動(dòng)處理，然后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)并繪制溶出曲線(xiàn)。

表 2. 速釋片劑溶出度結(jié)果

圖 3. 速釋片劑溶出曲線(xiàn)

通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)品峰面積，繪制丙戊酸鈉速釋片劑的溶出曲線(xiàn)。結(jié)合溶出度數(shù)據(jù)可知，溶出時(shí)間為 3 min 時(shí)的溶出度為 41.7%，15 min 時(shí)的溶出度為 98.1%，且 30–45 min 的溶出度穩(wěn)定保持在 98% 以上，表明在設(shè)定的實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)，藥物zui終已完全溶出。

結(jié) 語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)將安捷倫在線(xiàn)液相色譜系統(tǒng)與 Flexible Cube 模塊聯(lián)用，建立了用于溶出測(cè)試的全流程自動(dòng)化分析系統(tǒng)。其中采用 CDS 軟件控制 Flexible Cube，在指定時(shí)間完成流路的選擇和溶出液的傳輸，并利用在線(xiàn)液相色譜系統(tǒng)對(duì)收集的溶出液進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程、減少人工操作并提高測(cè)試精度和效率，為各種制劑的溶出測(cè)試提供強(qiáng)有力的支持。同時(shí)，所開(kāi)發(fā)的方案表現(xiàn)出良好的可擴(kuò)展性和通用性，適用于其他平行反應(yīng)監(jiān)控等實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，在藥物研發(fā)和生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景。