Westernblot 檢測化學(xué)發(fā)光成像的特點(diǎn)
Westernblot檢測化學(xué)發(fā)光成像的特點(diǎn):Westernblot是蛋白質(zhì)研究中Z常用的一個手段,大部分Westernblot顯色底物是化學(xué)發(fā)光底物,Z后的顯示方法有膠片(壓片)法和化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)
膠片法需要暗房X膠片,配置顯影液定影液然后進(jìn)行壓片顯影定影,要得到一個比較理想的圖片往往需要重復(fù)壓片幾次操作非常繁瑣而且需要耗材
化學(xué)發(fā)光成像凝膠系統(tǒng)超越了膠片法,不需要暗房壓片顯影定影,關(guān)鍵的條帶不會因?yàn)槠毓獠蛔慊蛘咂毓膺^度而丟失而且該方法無耗材,圖片結(jié)果為電子文檔,方便存檔和長期保存
化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)與普通凝膠成像系統(tǒng)相比,其特點(diǎn)體現(xiàn)在:
1高靈敏度CCD芯片:采用化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)通用的高靈敏度CCD芯片
2高動態(tài)范圍:CCD芯片選定后,相機(jī)的動態(tài)范圍就有AD轉(zhuǎn)換器決定,國際知名的化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)均采用了16bitAD轉(zhuǎn)換,而12bit的相機(jī)用于凝膠成像沒有問題,用于化學(xué)發(fā)光就不合適了
3低噪音:相機(jī)產(chǎn)生的噪音有兩種,分別是熱噪音和讀出噪音,在降低熱噪音方面,經(jīng)過多級半導(dǎo)體制冷,使得CCD芯片溫度低于環(huán)境溫度50左右,且溫度可控,控溫精度為±0.2,并可控制半導(dǎo)體制冷開關(guān)和風(fēng)扇開關(guān);在降低讀出噪音方面,通常采用低噪音的16位A/D轉(zhuǎn)換,同時(shí)反復(fù)優(yōu)化電路設(shè)計(jì),降低噪音
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